- 蔡轶;黄珺珺;刘夏雯;黄碧云;朱柳;吴波;
目的研究过表达尼克酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyltransferase,Nampt)对心肌细胞肥大的影响,并初步探讨NF-κB在其中的作用。方法心肌细胞给予苯肾上腺素(PE)或过表达Nampt处理,采用Real-time PCR检测Nampt、ANP和BNP的mRNA表达,利用Western blot检测Nampt的蛋白水平,使用免疫荧光检测心肌细胞表面积,采用双荧光素酶报告基因的方法检测NF-κB依赖的转录活性。结果过表达Nampt能够诱导ANP和BNP等肥大基因的激活,增加心肌细胞表面积;过表达Nampt能够增加NF-κB依赖的转录活性,而沉默NF-κB的p65亚基能够部分取消Nampt对心肌细胞肥大的调控作用。结论过表达Nampt能够诱导心肌细胞肥大,其机制可能与NF-κB的激活有关。
2017年01期 v.33 33-39页 [查看摘要][在线阅读][下载 896K] [下载次数：273 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：2 ] - 蔡轶;黄珺珺;刘夏雯;黄碧云;朱柳;吴波;
目的研究过表达尼克酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyltransferase,Nampt)对心肌细胞肥大的影响,并初步探讨NF-κB在其中的作用。方法心肌细胞给予苯肾上腺素(PE)或过表达Nampt处理,采用Real-time PCR检测Nampt、ANP和BNP的mRNA表达,利用Western blot检测Nampt的蛋白水平,使用免疫荧光检测心肌细胞表面积,采用双荧光素酶报告基因的方法检测NF-κB依赖的转录活性。结果过表达Nampt能够诱导ANP和BNP等肥大基因的激活,增加心肌细胞表面积;过表达Nampt能够增加NF-κB依赖的转录活性,而沉默NF-κB的p65亚基能够部分取消Nampt对心肌细胞肥大的调控作用。结论过表达Nampt能够诱导心肌细胞肥大,其机制可能与NF-κB的激活有关。
2017年01期 v.33 33-39页 [查看摘要][在线阅读][下载 896K] [下载次数：273 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 张君;程笑;杨欢;杨滢霖;赵廷坤;王奇;王月华;杜冠华;
目的探讨山奈酚(kaempferol,KAE)对慢性脑缺血大鼠的作用及其机制。方法采用双侧颈总动脉永久性结扎(bilateral common carotid arteries occlusion,2VO)建立大鼠慢性脑缺血动物模型;Morris水迷宫、抓握实验检测大鼠行为学;尼氏染色及HE染色观察脑组织病理改变;比色法检测MDA含量和SOD活性;Western blot检测脑组织DJ-1蛋白表达水平。结果与2-VO模型组比较,KAE明显改善慢性脑缺血诱导的学习记忆障碍和抓握能力损伤。此外,KAE明显减轻2VO大鼠脑组织病理损伤,增高脑组织中SOD活性,提高海马和皮层中抗氧化蛋白DJ-1的表达水平。结论KAE明显改善慢性脑缺血诱导的大鼠认知功能障碍、四肢平衡能力障碍及病理损伤,其机制可能与提高体内抗氧化系统有关。
2017年01期 v.33 39-44页 [查看摘要][在线阅读][下载 1031K] [下载次数：974 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：67 ] |[阅读次数：1 ] - 张君;程笑;杨欢;杨滢霖;赵廷坤;王奇;王月华;杜冠华;
目的探讨山奈酚(kaempferol,KAE)对慢性脑缺血大鼠的作用及其机制。方法采用双侧颈总动脉永久性结扎(bilateral common carotid arteries occlusion,2VO)建立大鼠慢性脑缺血动物模型;Morris水迷宫、抓握实验检测大鼠行为学;尼氏染色及HE染色观察脑组织病理改变;比色法检测MDA含量和SOD活性;Western blot检测脑组织DJ-1蛋白表达水平。结果与2-VO模型组比较,KAE明显改善慢性脑缺血诱导的学习记忆障碍和抓握能力损伤。此外,KAE明显减轻2VO大鼠脑组织病理损伤,增高脑组织中SOD活性,提高海马和皮层中抗氧化蛋白DJ-1的表达水平。结论KAE明显改善慢性脑缺血诱导的大鼠认知功能障碍、四肢平衡能力障碍及病理损伤,其机制可能与提高体内抗氧化系统有关。
2017年01期 v.33 39-44页 [查看摘要][在线阅读][下载 1031K] [下载次数：974 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：67 ] |[阅读次数：1 ] - 杨翔宇;李晓红;肖静;胡洁媚;冯娟;霍然;何国东;吴岳恒;余细勇;
目的探讨生理和炎性微环境下人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)能否通过外泌体诱导调节性T细胞的生成来发挥免疫抑制功能。方法胶原酶消化法分离h UC-MSCs,应用流式细胞术鉴定h UC-MSCs。IFN-γ模拟体内炎性微环境,以未预处理为对照,分别提取外泌体,得到Nor-h UC-exo和IFN-γ-stimulated h UC-exo,分析其浓度及粒径分布等特征、并鉴定表面标记蛋白CD63的表达。采用h UC-MSCs、Nor-h UCexo、IFN-γpretreated-h UC-MSCs、IFN-γstimulated h UC-exo与人外周血单个核细胞共培养5 d后,流式细胞术检测T细胞的增殖、调节性T细胞的比例变化。结果 h UC-MSCs高表达CD73、CD44等间充质干细胞标志物。IFN-γ刺激前后外泌体粒径无明显变化,但IFN-γ刺激后分泌量和CD63增加(P<0.05)。CFSE染料示踪结果显示,h UC-MSCs来源的外泌体抑制PBMCs增殖(P<0.01),且IFN-γ刺激后明显提高外泌体的免疫抑制能力(P<0.01)。在活化T细胞中,IFN-γ-stimulated h UC-exo组Treg比例(11.53±0.88%)与IFN-γpretreated-h UC-MSCs组(7.54±0.50%)(P<0.05)、Norh UC-exo组(6.60±0.56%)(P<0.01)、对照组(3.87±0.73%)(P<0.01)相比升高。结论 h UC-MSCs可通过分泌外泌体来发挥免疫调节作用,在炎症因子刺激下h UCMSCs分泌的外泌体明显促进调节性T细胞的生成,h UC-exo可能是潜在的免疫抑制载体。
2017年01期 v.33 45-51页 [查看摘要][在线阅读][下载 1858K] [下载次数：1123 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：20 ] |[阅读次数：1 ] - 杨翔宇;李晓红;肖静;胡洁媚;冯娟;霍然;何国东;吴岳恒;余细勇;
目的探讨生理和炎性微环境下人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)能否通过外泌体诱导调节性T细胞的生成来发挥免疫抑制功能。方法胶原酶消化法分离h UC-MSCs,应用流式细胞术鉴定h UC-MSCs。IFN-γ模拟体内炎性微环境,以未预处理为对照,分别提取外泌体,得到Nor-h UC-exo和IFN-γ-stimulated h UC-exo,分析其浓度及粒径分布等特征、并鉴定表面标记蛋白CD63的表达。采用h UC-MSCs、Nor-h UCexo、IFN-γpretreated-h UC-MSCs、IFN-γstimulated h UC-exo与人外周血单个核细胞共培养5 d后,流式细胞术检测T细胞的增殖、调节性T细胞的比例变化。结果 h UC-MSCs高表达CD73、CD44等间充质干细胞标志物。IFN-γ刺激前后外泌体粒径无明显变化,但IFN-γ刺激后分泌量和CD63增加(P<0.05)。CFSE染料示踪结果显示,h UC-MSCs来源的外泌体抑制PBMCs增殖(P<0.01),且IFN-γ刺激后明显提高外泌体的免疫抑制能力(P<0.01)。在活化T细胞中,IFN-γ-stimulated h UC-exo组Treg比例(11.53±0.88%)与IFN-γpretreated-h UC-MSCs组(7.54±0.50%)(P<0.05)、Norh UC-exo组(6.60±0.56%)(P<0.01)、对照组(3.87±0.73%)(P<0.01)相比升高。结论 h UC-MSCs可通过分泌外泌体来发挥免疫调节作用,在炎症因子刺激下h UCMSCs分泌的外泌体明显促进调节性T细胞的生成,h UC-exo可能是潜在的免疫抑制载体。
2017年01期 v.33 45-51页 [查看摘要][在线阅读][下载 1858K] [下载次数：1123 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：20 ] |[阅读次数：1 ] - 李海燕;伏箫燕;崔婷;蒋青松;邱红梅;
目的研究组蛋白乙酰化与慢性不可预见刺激(chronic unpredictable stress,CUS)致大鼠抑郁行为的关系。方法30只♂Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为对照组和模型组,采用孤养结合CUS方式连续刺激28 d建立大鼠抑郁症模型;以开场实验和强迫游泳实验评价大鼠抑郁行为;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠前脑皮层和海马组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)mRNA表达;采用Western blot法检测大鼠前脑皮层和海马组蛋白H3(histone3,H3)、组蛋白H4(histone 4,H4)、乙酰化组蛋白H3(actylation-histone 3,ac H3)及乙酰化组蛋白H4(actylation-histone4,ac H4)蛋白表达水平。结果与对照组大鼠相比,模型组大鼠开场实验得分明显降低(P<0.01)、强迫游泳实验不动时间明显延长(P<0.01)、前脑皮层和海马HDAC2 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.01)、组蛋白H3和组蛋白H4蛋白表达均无明显差异、ac H3及ac H4蛋白水平均明显降低(P<0.01)。结论 CUS诱导大鼠产生抑郁样行为改变,其机制可能与脑内HDAC表达增高致组蛋白乙酰化修饰水平降低有关。
2017年01期 v.33 52-58页 [查看摘要][在线阅读][下载 1120K] [下载次数：398 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 李海燕;伏箫燕;崔婷;蒋青松;邱红梅;
目的研究组蛋白乙酰化与慢性不可预见刺激(chronic unpredictable stress,CUS)致大鼠抑郁行为的关系。方法30只♂Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为对照组和模型组,采用孤养结合CUS方式连续刺激28 d建立大鼠抑郁症模型;以开场实验和强迫游泳实验评价大鼠抑郁行为;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠前脑皮层和海马组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)mRNA表达;采用Western blot法检测大鼠前脑皮层和海马组蛋白H3(histone3,H3)、组蛋白H4(histone 4,H4)、乙酰化组蛋白H3(actylation-histone 3,ac H3)及乙酰化组蛋白H4(actylation-histone4,ac H4)蛋白表达水平。结果与对照组大鼠相比,模型组大鼠开场实验得分明显降低(P<0.01)、强迫游泳实验不动时间明显延长(P<0.01)、前脑皮层和海马HDAC2 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.01)、组蛋白H3和组蛋白H4蛋白表达均无明显差异、ac H3及ac H4蛋白水平均明显降低(P<0.01)。结论 CUS诱导大鼠产生抑郁样行为改变,其机制可能与脑内HDAC表达增高致组蛋白乙酰化修饰水平降低有关。
2017年01期 v.33 52-58页 [查看摘要][在线阅读][下载 1120K] [下载次数：398 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 刘锦花;李恒;和七一;张迎锋;陈典成;罗聪;余晓东;
目的评价抗尖吻蝮蛇(D.acutus)毒Ig Y对该蛇毒主要活性的中和能力。方法通过不同浓度Ig Y与该蛇毒混合孵育后,再用生化方法检测该蛇毒的多种活性。结果体外实验表明,Ig Y能明显地中和该蛇毒的PLA_2、5'-核苷酸酶、透明质酸酶、金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶(纤维蛋白酶)等酶活性;小鼠实验表明,Ig Y对小鼠的半有效保护剂量(ED_(50))为1 131.09μg。结论该抗尖吻蝮蛇毒Ig Y具有很好的中和活性,且Ig Y无明显的毒性。
2017年01期 v.33 58-62页 [查看摘要][在线阅读][下载 409K] [下载次数：170 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 刘锦花;李恒;和七一;张迎锋;陈典成;罗聪;余晓东;
目的评价抗尖吻蝮蛇(D.acutus)毒Ig Y对该蛇毒主要活性的中和能力。方法通过不同浓度Ig Y与该蛇毒混合孵育后,再用生化方法检测该蛇毒的多种活性。结果体外实验表明,Ig Y能明显地中和该蛇毒的PLA_2、5'-核苷酸酶、透明质酸酶、金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶(纤维蛋白酶)等酶活性;小鼠实验表明,Ig Y对小鼠的半有效保护剂量(ED_(50))为1 131.09μg。结论该抗尖吻蝮蛇毒Ig Y具有很好的中和活性,且Ig Y无明显的毒性。
2017年01期 v.33 58-62页 [查看摘要][在线阅读][下载 409K] [下载次数：170 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 李敬美;丁圆媛;潘夕春;刘雅;陈晓红;张海港;
目的观察血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导H9c2心肌细胞肥大过程中细胞周期调控因子mRNA的时相性表达。方法 AngⅡ(1.0μmol·L~(-1))刺激H9c2细胞,分别于0 min、5 min、10 min、30 min、1 h、2 h、3 h、6 h、12h、24 h、48 h,罗丹明标记鬼笔环肽染色并检测细胞面积;Real-time PCR法检测细胞周期蛋白(cyclin)B、D、E,细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinases,CDK)1、2、4、6,以及CDK抑制因子p21 mRNA的表达变化情况。结果随着AngⅡ刺激时间的延长,H9c2细胞面积逐渐增大;细胞周期调节因子均于刺激后出现短暂反应性表达增加,周期蛋白E与CDK2、CDK4 mRNA在5 min时达到峰值,周期蛋白D mRNA在10 min时达到峰值,随后一直呈减少趋势;CDK6与周期蛋白B mRNA表达出现双峰现象,分别于5 min和30min达第一峰,随后表达减少,于2 h达最低点,接着又表达增加,于12 h达第二峰。p21 mRNA表达量于30 min达峰值,随后逐步减少,3 h时表达最低,之后又缓慢增加。结论AngⅡ诱导H9c2心肌细胞肥大发生的病理过程与细胞周期调控因子的震荡性表达相关,各因子共同促进细胞肥大反应。
2017年01期 v.33 63-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 909K] [下载次数：232 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：1 ] - 李敬美;丁圆媛;潘夕春;刘雅;陈晓红;张海港;
目的观察血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导H9c2心肌细胞肥大过程中细胞周期调控因子mRNA的时相性表达。方法 AngⅡ(1.0μmol·L~(-1))刺激H9c2细胞,分别于0 min、5 min、10 min、30 min、1 h、2 h、3 h、6 h、12h、24 h、48 h,罗丹明标记鬼笔环肽染色并检测细胞面积;Real-time PCR法检测细胞周期蛋白(cyclin)B、D、E,细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinases,CDK)1、2、4、6,以及CDK抑制因子p21 mRNA的表达变化情况。结果随着AngⅡ刺激时间的延长,H9c2细胞面积逐渐增大;细胞周期调节因子均于刺激后出现短暂反应性表达增加,周期蛋白E与CDK2、CDK4 mRNA在5 min时达到峰值,周期蛋白D mRNA在10 min时达到峰值,随后一直呈减少趋势;CDK6与周期蛋白B mRNA表达出现双峰现象,分别于5 min和30min达第一峰,随后表达减少,于2 h达最低点,接着又表达增加,于12 h达第二峰。p21 mRNA表达量于30 min达峰值,随后逐步减少,3 h时表达最低,之后又缓慢增加。结论AngⅡ诱导H9c2心肌细胞肥大发生的病理过程与细胞周期调控因子的震荡性表达相关,各因子共同促进细胞肥大反应。
2017年01期 v.33 63-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 909K] [下载次数：232 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：1 ] - 郑书国;朱元美;陶善珺;郑浩文;任尤楠;赵梦秋;杨解人;吴元洁;
目的观察丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)对间歇性高糖诱导的大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)c-Jun氨基末端激酶(JNK)活化和细胞凋亡的影响。方法 INS-1细胞与丹酚酸B预孵24 h后暴露于间歇性高糖(11.1 mmol·L~(-1)12 h,33.3 mmol·L~(-1)12 h)72 h。MTT法测定细胞活力,ELISA法测定葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力,荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blot法检测胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)蛋白表达和JNK活化水平。结果丹酚酸B可明显减轻间歇性高糖诱导的INS-1细胞损伤和凋亡(P<0.05,P<0.01),提高葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力(P<0.05,P<0.01);与丹酚酸B预孵可明显降低细胞内ROS水平、抑制JNK活化,并提高PDX-1蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论丹酚酸B可有效减轻间歇性高糖诱导的INS-1细胞损伤和凋亡,提高胰岛素分泌水平,其机制可能与降低细胞内ROS水平、抑制JNK活化和上调PDX-1蛋白表达有关。
2017年01期 v.33 68-73页 [查看摘要][在线阅读][下载 889K] [下载次数：352 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：1 ] - 郑书国;朱元美;陶善珺;郑浩文;任尤楠;赵梦秋;杨解人;吴元洁;
目的观察丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)对间歇性高糖诱导的大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)c-Jun氨基末端激酶(JNK)活化和细胞凋亡的影响。方法 INS-1细胞与丹酚酸B预孵24 h后暴露于间歇性高糖(11.1 mmol·L~(-1)12 h,33.3 mmol·L~(-1)12 h)72 h。MTT法测定细胞活力,ELISA法测定葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力,荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blot法检测胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)蛋白表达和JNK活化水平。结果丹酚酸B可明显减轻间歇性高糖诱导的INS-1细胞损伤和凋亡(P<0.05,P<0.01),提高葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力(P<0.05,P<0.01);与丹酚酸B预孵可明显降低细胞内ROS水平、抑制JNK活化,并提高PDX-1蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论丹酚酸B可有效减轻间歇性高糖诱导的INS-1细胞损伤和凋亡,提高胰岛素分泌水平,其机制可能与降低细胞内ROS水平、抑制JNK活化和上调PDX-1蛋白表达有关。
2017年01期 v.33 68-73页 [查看摘要][在线阅读][下载 889K] [下载次数：352 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：1 ] - 王海燕;郝亮;郭宇松;王永利;郭炜;
目的探讨高血压对大鼠脑血管收缩性的影响及其与钠泵活性的关系。方法取♂Wistar大鼠(WR)和自发性高血压大鼠(SHR)基底动脉环,通过Multi Myograph张力换能系统记录血管张力变化,比较两种大鼠离体脑动脉对KCl和5-羟色胺(5-HT)的收缩反应,分析高血压病变对脑血管收缩性和钠泵活性的影响。结果与WR基底动脉相比,SHR基底动脉的KCl和5-HT量效曲线明显右移,再复K+所致血管舒张作用减弱,提示高血压病变可明显降低脑血管钠泵活性及KCl和5-HT的收缩反应;哇巴因(Ouabain,OUA)浓度依赖性收缩SHR脑血管,其量效关系曲线可经两点结合模型进行最佳拟合,Kd分别为:1.7×10~(-8)mol·L~(-1)和1.6×10~(-5)mol·L~(-1),表明SHR脑基底动脉上存在高、低亲和力两种不同功能的钠泵。用5×10~(-7)mol·L~(-1)和10~(-4)mol·L~(-1)的OUA分别抑制高、低亲和力钠泵,仅能在SHR而非WR脑血管明显左移KCl和5-HT量效曲线,表明OUA可明显增强KCl和5-HT对脑血管的收缩作用,且OUA增强5-HT收缩SHR脑血管的作用呈明显的浓度依赖性(r=0.9393,P<0.05);在SHR脑血管,这两个浓度OUA对KCl量效曲线的左移幅度无明显差别,而对5-HT收缩量效曲线的左移幅度却有明显不同,提示仅高亲和力钠泵介导了SHR脑血管对KCl的收缩反应,而SHR脑血管对5-HT的收缩反应则由高、低亲和力两种钠泵共同参与。结论高血压病变可明显降低脑血管对血管收缩剂的反应性,其机制可能与高血压所致钠泵活性降低或钠泵对OUA敏感性增加有关。
2017年01期 v.33 74-83页 [查看摘要][在线阅读][下载 1178K] [下载次数：235 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：2 ] - 王海燕;郝亮;郭宇松;王永利;郭炜;
目的探讨高血压对大鼠脑血管收缩性的影响及其与钠泵活性的关系。方法取♂Wistar大鼠(WR)和自发性高血压大鼠(SHR)基底动脉环,通过Multi Myograph张力换能系统记录血管张力变化,比较两种大鼠离体脑动脉对KCl和5-羟色胺(5-HT)的收缩反应,分析高血压病变对脑血管收缩性和钠泵活性的影响。结果与WR基底动脉相比,SHR基底动脉的KCl和5-HT量效曲线明显右移,再复K+所致血管舒张作用减弱,提示高血压病变可明显降低脑血管钠泵活性及KCl和5-HT的收缩反应;哇巴因(Ouabain,OUA)浓度依赖性收缩SHR脑血管,其量效关系曲线可经两点结合模型进行最佳拟合,Kd分别为:1.7×10~(-8)mol·L~(-1)和1.6×10~(-5)mol·L~(-1),表明SHR脑基底动脉上存在高、低亲和力两种不同功能的钠泵。用5×10~(-7)mol·L~(-1)和10~(-4)mol·L~(-1)的OUA分别抑制高、低亲和力钠泵,仅能在SHR而非WR脑血管明显左移KCl和5-HT量效曲线,表明OUA可明显增强KCl和5-HT对脑血管的收缩作用,且OUA增强5-HT收缩SHR脑血管的作用呈明显的浓度依赖性(r=0.9393,P<0.05);在SHR脑血管,这两个浓度OUA对KCl量效曲线的左移幅度无明显差别,而对5-HT收缩量效曲线的左移幅度却有明显不同,提示仅高亲和力钠泵介导了SHR脑血管对KCl的收缩反应,而SHR脑血管对5-HT的收缩反应则由高、低亲和力两种钠泵共同参与。结论高血压病变可明显降低脑血管对血管收缩剂的反应性,其机制可能与高血压所致钠泵活性降低或钠泵对OUA敏感性增加有关。
2017年01期 v.33 74-83页 [查看摘要][在线阅读][下载 1178K] [下载次数：235 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：2 ] - 宋来新;张长城;王婷;刘珍财;韩贵芳;袁丁;赵海霞;
目的探讨淫羊藿总黄酮(total flavonoids of Epimedium,TFE)对自然衰老大鼠脑组织中MAPK/NF-κB信号通路影响及其抗炎作用。方法 HE染色观察各组大鼠海马CA1、CA3和DG区神经元形态的变化。Western blot法检测各组大鼠海马组织中衰老相关蛋白p21、凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达,核转录因子NF-κB p65及其下游炎症因子TNF-α、IL-1β和COX-2的表达,以及MAPK信号通路相关蛋白的表达。结果 TFE可明显改善自然衰老组大鼠海马神经细胞形态结构,神经细胞排列整齐紧密。同时,TFE可明显下调自然衰老组大鼠海马组织中p21、Bax蛋白表达水平,上调Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax的比值,且可明显降低NF-κB p65核蛋白及其下游炎症因子TNF-α、IL-1β和COX-2的表达,以及MAPK信号通路相关蛋白(p-ERK1/2、p-JNK、p-p38 MAPK)的表达。结论 TFE对自然衰老大鼠炎症反应具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制MAPK信号通路的激活,从而抑制NF-κB的核易位及其下游炎症细胞因子表达,进而延缓脑衰老。
2017年01期 v.33 84-90页 [查看摘要][在线阅读][下载 1325K] [下载次数：1648 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：78 ] |[阅读次数：1 ] - 宋来新;张长城;王婷;刘珍财;韩贵芳;袁丁;赵海霞;
目的探讨淫羊藿总黄酮(total flavonoids of Epimedium,TFE)对自然衰老大鼠脑组织中MAPK/NF-κB信号通路影响及其抗炎作用。方法 HE染色观察各组大鼠海马CA1、CA3和DG区神经元形态的变化。Western blot法检测各组大鼠海马组织中衰老相关蛋白p21、凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达,核转录因子NF-κB p65及其下游炎症因子TNF-α、IL-1β和COX-2的表达,以及MAPK信号通路相关蛋白的表达。结果 TFE可明显改善自然衰老组大鼠海马神经细胞形态结构,神经细胞排列整齐紧密。同时,TFE可明显下调自然衰老组大鼠海马组织中p21、Bax蛋白表达水平,上调Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax的比值,且可明显降低NF-κB p65核蛋白及其下游炎症因子TNF-α、IL-1β和COX-2的表达,以及MAPK信号通路相关蛋白(p-ERK1/2、p-JNK、p-p38 MAPK)的表达。结论 TFE对自然衰老大鼠炎症反应具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制MAPK信号通路的激活,从而抑制NF-κB的核易位及其下游炎症细胞因子表达,进而延缓脑衰老。
2017年01期 v.33 84-90页 [查看摘要][在线阅读][下载 1325K] [下载次数：1648 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：78 ] |[阅读次数：1 ] - 雷明;苏敬阳;李卓;晏珊;孙雪菲;朱彤;郝丽英;
目的构建心肌Cav1.2钙离子通道三维结构模型,检验模型的准确性与可靠性。方法利用SWISS-MODEL同源建模服务器,对豚鼠心肌细胞Cav1.2通道α1亚基进行同源建模,建模结果提交至加州大学蛋白质结构在线检测服务器进行检测评估,并对结构模型进行打分。利用MOE软件分子对接程序模拟阻断剂或药物与Cav1.2通道模型的结合,进一步验证通道模型的准确性与可靠性。结果在SWISS-MODEL服务器上搜寻到的模板序列Cav1.1α1S与目标序列Cav1.2α1C均为L型钙通道,序列比对结果显示其同源性高达71.5%,选择自动模式(automated mode)进行同源建模。L型钙通道阻断剂维拉帕米、硝苯地平、地尔硫卓能结合到Cav1.2通道三维结构模型的特定区域,而钠通道特异性阻断剂河豚毒素并未与该模型相结合,中药有效成份白花前胡甲素和小檗碱与该模型也有一定的结合。结论成功构建了心肌Cav1.2钙离子通道三维结构模型,为后续研究提供了可靠样本,也为同源建模在研究离子通道三维结构预测中的应用奠定了基础。
2017年01期 v.33 90-94页 [查看摘要][在线阅读][下载 1009K] [下载次数：745 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 雷明;苏敬阳;李卓;晏珊;孙雪菲;朱彤;郝丽英;
目的构建心肌Cav1.2钙离子通道三维结构模型,检验模型的准确性与可靠性。方法利用SWISS-MODEL同源建模服务器,对豚鼠心肌细胞Cav1.2通道α1亚基进行同源建模,建模结果提交至加州大学蛋白质结构在线检测服务器进行检测评估,并对结构模型进行打分。利用MOE软件分子对接程序模拟阻断剂或药物与Cav1.2通道模型的结合,进一步验证通道模型的准确性与可靠性。结果在SWISS-MODEL服务器上搜寻到的模板序列Cav1.1α1S与目标序列Cav1.2α1C均为L型钙通道,序列比对结果显示其同源性高达71.5%,选择自动模式(automated mode)进行同源建模。L型钙通道阻断剂维拉帕米、硝苯地平、地尔硫卓能结合到Cav1.2通道三维结构模型的特定区域,而钠通道特异性阻断剂河豚毒素并未与该模型相结合,中药有效成份白花前胡甲素和小檗碱与该模型也有一定的结合。结论成功构建了心肌Cav1.2钙离子通道三维结构模型,为后续研究提供了可靠样本,也为同源建模在研究离子通道三维结构预测中的应用奠定了基础。
2017年01期 v.33 90-94页 [查看摘要][在线阅读][下载 1009K] [下载次数：745 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 徐小惠;范氏泰和;韦晓洁;覃妮;黄仁彬;
目的探讨杨桃根总提取物(EACR)对糖尿病小鼠肾损伤及其抗氧化应激的作用。方法小鼠尾静脉注射120mg·g~(-1)链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型小鼠,随机分为5组:模型对照组、缬沙坦组(20 mg·kg~(-1))、EACR低、中、高剂量组(300、600、1 200 mg·kg~(-1)),再设正常对照组,每组10只小鼠。分别于药前、药后测各组小鼠空腹血糖(FBG)。末次给药后,收集血清和尿液,检测小鼠血清中肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)的含量以及24 h尿量及尿蛋白水平;试剂盒检测小鼠肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和丙二醛(MDA)含量;HE染色观察肾脏组织的病理学变化;ELISA法检测肾组织中氧化氢酶(CAT)、活性氧簇(ROS)的含量;蛋白免疫印迹法检测肾组织中Cyto-C、AIF、caspase-3的蛋白表达。结果与模型组比较,缬沙坦组以及EACR中、高剂量组的血清生化指标和24h尿蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。糖尿病小鼠给药后,EACR能明显降低MDA含量,提高SOD、GSH-Px、CAT活性;下调ROS、Cyto-C、AIF、caspase-3的表达(P<0.05)。HE结果显示EACR还能改善糖尿病小鼠肾小球病理变化。结论杨桃根总提取物可减轻糖尿病小鼠血清中Cr和BUN的水平,降低肾脏组织中MDA、ROS含量,以及提高组织中抗氧化因子SOD、GSH-Px活性及CAT的含量,下调肾组织中Cyto-C、AIF、caspase-3的蛋白表达,缓解氧化应激对肾组织所造成的损伤,从而起到改善糖尿病小鼠肾损伤的作用。
2017年01期 v.33 95-100页 [查看摘要][在线阅读][下载 611K] [下载次数：983 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：42 ] |[阅读次数：1 ] - 徐小惠;范氏泰和;韦晓洁;覃妮;黄仁彬;
目的探讨杨桃根总提取物(EACR)对糖尿病小鼠肾损伤及其抗氧化应激的作用。方法小鼠尾静脉注射120mg·g~(-1)链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型小鼠,随机分为5组:模型对照组、缬沙坦组(20 mg·kg~(-1))、EACR低、中、高剂量组(300、600、1 200 mg·kg~(-1)),再设正常对照组,每组10只小鼠。分别于药前、药后测各组小鼠空腹血糖(FBG)。末次给药后,收集血清和尿液,检测小鼠血清中肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)的含量以及24 h尿量及尿蛋白水平;试剂盒检测小鼠肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和丙二醛(MDA)含量;HE染色观察肾脏组织的病理学变化;ELISA法检测肾组织中氧化氢酶(CAT)、活性氧簇(ROS)的含量;蛋白免疫印迹法检测肾组织中Cyto-C、AIF、caspase-3的蛋白表达。结果与模型组比较,缬沙坦组以及EACR中、高剂量组的血清生化指标和24h尿蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。糖尿病小鼠给药后,EACR能明显降低MDA含量,提高SOD、GSH-Px、CAT活性;下调ROS、Cyto-C、AIF、caspase-3的表达(P<0.05)。HE结果显示EACR还能改善糖尿病小鼠肾小球病理变化。结论杨桃根总提取物可减轻糖尿病小鼠血清中Cr和BUN的水平,降低肾脏组织中MDA、ROS含量,以及提高组织中抗氧化因子SOD、GSH-Px活性及CAT的含量,下调肾组织中Cyto-C、AIF、caspase-3的蛋白表达,缓解氧化应激对肾组织所造成的损伤,从而起到改善糖尿病小鼠肾损伤的作用。
2017年01期 v.33 95-100页 [查看摘要][在线阅读][下载 611K] [下载次数：983 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：42 ] |[阅读次数：1 ] - 高晨光;张猜;赵安妮;李楠;陈虹;曹波;
目的研究新型鬼臼毒素衍生物LN-13对多药耐药肿瘤细胞株K562/A02产生的凋亡作用及潜在机制。方法MTT法测定LN-13和阳性对照药VP-16抑制K562/A02细胞48 h后的生长情况及其IC50值,Hoechst 33342、PI双染色观察LN-13作用K562/A02细胞48 h后的形态变化,流式细胞术测定LN-13作用K562/A02细胞48 h的凋亡情况,RTPCR检测LN-13作用K562/A02细胞后Bcl-2、Bax、Caspase-3、mdr-1基因表达的影响,Western blot检测LN-13作用K562/A02细胞后P-gp的表达情况。结果 LN-13对K562/A02细胞生长有显著地抑制,IC50值3.32μmol·L~(-1),Hoechst 33342、PI双染色观察到LN-13作用后,K562/A02细胞发生明显凋亡形态。流式细胞术检测LN-13(2、4、8μmol·L~(-1))作用K562/A02细胞48 h后,出现剂量递增趋势的凋亡比例,分别达到15.0%、48.0%、68.96%。另外,随着LN-13剂量增加,K562/A02细胞的Bax、Caspase-3基因表达增加,mdr-1基因表达减少,另外也下调了P-gp表达,差异有统计学意义。结论 LN-13可诱导多药耐药肿瘤细胞K562/A02产生凋亡作用,其机制可能是通过抑制P-gp蛋白表达及凋亡相关基因表达。
2017年01期 v.33 100-104页 [查看摘要][在线阅读][下载 600K] [下载次数：232 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：2 ] - 高晨光;张猜;赵安妮;李楠;陈虹;曹波;
目的研究新型鬼臼毒素衍生物LN-13对多药耐药肿瘤细胞株K562/A02产生的凋亡作用及潜在机制。方法MTT法测定LN-13和阳性对照药VP-16抑制K562/A02细胞48 h后的生长情况及其IC50值,Hoechst 33342、PI双染色观察LN-13作用K562/A02细胞48 h后的形态变化,流式细胞术测定LN-13作用K562/A02细胞48 h的凋亡情况,RTPCR检测LN-13作用K562/A02细胞后Bcl-2、Bax、Caspase-3、mdr-1基因表达的影响,Western blot检测LN-13作用K562/A02细胞后P-gp的表达情况。结果 LN-13对K562/A02细胞生长有显著地抑制,IC50值3.32μmol·L~(-1),Hoechst 33342、PI双染色观察到LN-13作用后,K562/A02细胞发生明显凋亡形态。流式细胞术检测LN-13(2、4、8μmol·L~(-1))作用K562/A02细胞48 h后,出现剂量递增趋势的凋亡比例,分别达到15.0%、48.0%、68.96%。另外,随着LN-13剂量增加,K562/A02细胞的Bax、Caspase-3基因表达增加,mdr-1基因表达减少,另外也下调了P-gp表达,差异有统计学意义。结论 LN-13可诱导多药耐药肿瘤细胞K562/A02产生凋亡作用,其机制可能是通过抑制P-gp蛋白表达及凋亡相关基因表达。
2017年01期 v.33 100-104页 [查看摘要][在线阅读][下载 600K] [下载次数：232 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：1 ] - 蒋曦;赵应征;潘建春;俞雪锋;
目的研究反式虾青素对酒精诱导的记忆功能障碍的改善作用及对小鼠海马、前额叶皮质NF-κB p65、i NOS和TNF-α表达的影响。方法取40只♂ICR小鼠,随机分为空白对照组、酒精模型组7 d、14 d、21 d、28 d,通过观察小鼠对酒精的偏好程度,并采用水迷宫测试,确定小鼠认知记忆障碍出现的时间点。另取40只♂ICR小鼠,将其分为对照组、酒精模型组及反式虾青素(20、40、80 mg·kg~(-1))给药组,21 d慢性给药后,分别观察小鼠训练后1 h和24 h的探索平台潜伏期时间、进入目标象限次数、目标象限停留时间和游动速度;Western blot检测小鼠海马和前额叶皮层NF-κB p65、i NOS和TNF-α的表达。结果小鼠在给予酒精21 d后,摄入酒精量明显增加(P<0.01),并出现记忆功能障碍,表现为探索平台潜伏期增加(P<0.01)、进入目标象限次数减少(P<0.01)、目标象限停留时间减少(P<0.01)。21 d慢性给予80 mg·kg~(-1)反式虾青素后,能明显改善酒精引起的记忆功能障碍。此外,21 d酒精组海马脑区NF-κB p65、i NOS和TNF-α表达均明显增加(P<0.01),给予40、80 mg·kg~(-1)反式虾青素能明显抑制海马脑区NF-κB p65、i NOS和TNF-α的表达(P<0.01);相比于海马脑区,前额叶皮层脑区3种炎症相关蛋白表达也明显增加,但仅有80 mg·kg~(-1)反式虾青素能抑制其表达(P<0.05)。结论反式虾青素通过抑制海马与前额叶皮层脑区炎症相关蛋白NF-κB p65、i NOS和TNF-α的表达,发挥抗神经炎症的作用,从而改善慢性酒精引起的记忆功能障碍。
2017年01期 v.33 105-113页 [查看摘要][在线阅读][下载 1688K] [下载次数：612 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 蒋曦;赵应征;潘建春;俞雪锋;
目的研究反式虾青素对酒精诱导的记忆功能障碍的改善作用及对小鼠海马、前额叶皮质NF-κB p65、i NOS和TNF-α表达的影响。方法取40只♂ICR小鼠,随机分为空白对照组、酒精模型组7 d、14 d、21 d、28 d,通过观察小鼠对酒精的偏好程度,并采用水迷宫测试,确定小鼠认知记忆障碍出现的时间点。另取40只♂ICR小鼠,将其分为对照组、酒精模型组及反式虾青素(20、40、80 mg·kg~(-1))给药组,21 d慢性给药后,分别观察小鼠训练后1 h和24 h的探索平台潜伏期时间、进入目标象限次数、目标象限停留时间和游动速度;Western blot检测小鼠海马和前额叶皮层NF-κB p65、i NOS和TNF-α的表达。结果小鼠在给予酒精21 d后,摄入酒精量明显增加(P<0.01),并出现记忆功能障碍,表现为探索平台潜伏期增加(P<0.01)、进入目标象限次数减少(P<0.01)、目标象限停留时间减少(P<0.01)。21 d慢性给予80 mg·kg~(-1)反式虾青素后,能明显改善酒精引起的记忆功能障碍。此外,21 d酒精组海马脑区NF-κB p65、i NOS和TNF-α表达均明显增加(P<0.01),给予40、80 mg·kg~(-1)反式虾青素能明显抑制海马脑区NF-κB p65、i NOS和TNF-α的表达(P<0.01);相比于海马脑区,前额叶皮层脑区3种炎症相关蛋白表达也明显增加,但仅有80 mg·kg~(-1)反式虾青素能抑制其表达(P<0.05)。结论反式虾青素通过抑制海马与前额叶皮层脑区炎症相关蛋白NF-κB p65、i NOS和TNF-α的表达,发挥抗神经炎症的作用,从而改善慢性酒精引起的记忆功能障碍。
2017年01期 v.33 105-113页 [查看摘要][在线阅读][下载 1688K] [下载次数：612 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 石雪萍;李静;冉建华;熊伟;李海星;郭珮;陈地龙;
目的探究人参皂苷Rh2(ginsenoside Rh2,Rh2)诱导人结肠癌细胞SW480凋亡作用机制。方法 CCK-8法检测Rh2对SW480细胞增殖的影响;流式细胞术(Flow cyto Metry,FCM)检测Rh2对SW480细胞凋亡的影响;Hoechst33258染色观察Rh2对SW480细胞凋亡形态学的影响;Western blot检测经Rh2诱导SW480细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53、cleaved caspase-3,PI3K/AKT/GSK-3β信号通路相关蛋白PI3K、AKT、P-AKT、GSK-3β、P-GSK-3β表达量变化;LY294002、Rh2单独及联合诱导SW480细胞后,蛋白PI3K、AKT、P-AKT、GSK-3β、P-GSK-3β表达量变化。结果CCK-8结果显示Rh2呈时间浓度依赖抑制SW480细胞增殖。FCM结果显示细胞早期凋亡率由正常对照组的(0.70±0.09)%增至(11.06±1.04)%(P<0.05)。Hoechst33258结果显示,Rh2诱导SW480细胞48h后呈现典型的凋亡形态学改变。Western blot结果显示,经Rh2诱导的SW480细胞,凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低,Bax、p53、激活型胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达增加;PI3K/AKT/GSK-3β信号通路蛋白PI3K、P-AKT、P-GSK-3β表达量与对照组比较明显减少,AKT、GSK-3β表达量无明显变化;LY294002、Rh2和LY294002与Rh2联合诱导SW480细胞后,总AKT蛋白和总GSK-3β蛋白表达量基本一致,LY294002与Rh2联合用药对SW480细胞中PI3K、P-AKT和P-GSK-3β的表达抑制作用较单独用药更加明显。结论Rh2可能是通过抑制PI3K/AKT/GSK-3β通路,激活p53信号通路,激活caspase-3,破坏Bcl-2/Bax比例,诱导结肠癌细胞SW480凋亡。
2017年01期 v.33 114-119页 [查看摘要][在线阅读][下载 861K] [下载次数：1960 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：67 ] |[阅读次数：2 ] - 石雪萍;李静;冉建华;熊伟;李海星;郭珮;陈地龙;
目的探究人参皂苷Rh2(ginsenoside Rh2,Rh2)诱导人结肠癌细胞SW480凋亡作用机制。方法 CCK-8法检测Rh2对SW480细胞增殖的影响;流式细胞术(Flow cyto Metry,FCM)检测Rh2对SW480细胞凋亡的影响;Hoechst33258染色观察Rh2对SW480细胞凋亡形态学的影响;Western blot检测经Rh2诱导SW480细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53、cleaved caspase-3,PI3K/AKT/GSK-3β信号通路相关蛋白PI3K、AKT、P-AKT、GSK-3β、P-GSK-3β表达量变化;LY294002、Rh2单独及联合诱导SW480细胞后,蛋白PI3K、AKT、P-AKT、GSK-3β、P-GSK-3β表达量变化。结果CCK-8结果显示Rh2呈时间浓度依赖抑制SW480细胞增殖。FCM结果显示细胞早期凋亡率由正常对照组的(0.70±0.09)%增至(11.06±1.04)%(P<0.05)。Hoechst33258结果显示,Rh2诱导SW480细胞48h后呈现典型的凋亡形态学改变。Western blot结果显示,经Rh2诱导的SW480细胞,凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低,Bax、p53、激活型胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达增加;PI3K/AKT/GSK-3β信号通路蛋白PI3K、P-AKT、P-GSK-3β表达量与对照组比较明显减少,AKT、GSK-3β表达量无明显变化;LY294002、Rh2和LY294002与Rh2联合诱导SW480细胞后,总AKT蛋白和总GSK-3β蛋白表达量基本一致,LY294002与Rh2联合用药对SW480细胞中PI3K、P-AKT和P-GSK-3β的表达抑制作用较单独用药更加明显。结论Rh2可能是通过抑制PI3K/AKT/GSK-3β通路,激活p53信号通路,激活caspase-3,破坏Bcl-2/Bax比例,诱导结肠癌细胞SW480凋亡。
2017年01期 v.33 114-119页 [查看摘要][在线阅读][下载 861K] [下载次数：1960 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：67 ] |[阅读次数：1 ] - 张军;谷翔;黄问银;张普华;殷嫦嫦;于欢;张义平;王丽丽;李卫东;
目的研究胰高血糖素样肽素-1(glucogon like pep tide-1,GLP-1)对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导H9C2心肌细胞凋亡的保护作用机制。方法体外培养H9C2细胞,实验分为4组:正常对照组、100 mg·L~(-1)AGEs试验组、AGEs(100 mg·L~(-1))+GLP-1(10 nmol·L~(-1))组、AGEs(100 mg·L~(-1))+NAC(5 mmol·L~(-1))组,处理24 h。通过CCK-8比色法检测细胞存活率,相差显微镜观察细胞形态,双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜摄片观察细胞内活性氧(ROS)水平;RT-PCR法测定Bax、Bcl-2 mRNA基因的表达;运用Hoechst 33258检测试剂盒及流式细胞术检测心肌细胞的凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达量。结果与正常组相比,100 mg·L~(-1)AGEs组降低H9C2细胞生存率,活性氧(ROS)生成量增加;与AGEs组相比,AGEs+GLP-1组细胞生成率提高,活性氧(ROS)生成量减少。与正常组相比,AGEs组促凋亡蛋白Bax表达增加,抑制凋亡蛋白Bcl-2减少,细胞凋亡率升高;AGEs+GLP-1组较AGEs组下调促凋亡蛋白Bax,上调凋亡抑制蛋白Bcl-2,细胞凋亡率减少。结论 GLP-1对AGEs诱导的心肌细胞凋亡具有保护作用,其保护机制与减少活性氧(ROS)有关。
2017年01期 v.33 120-126页 [查看摘要][在线阅读][下载 1081K] [下载次数：772 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：25 ] |[阅读次数：1 ] - 张军;谷翔;黄问银;张普华;殷嫦嫦;于欢;张义平;王丽丽;李卫东;
目的研究胰高血糖素样肽素-1(glucogon like pep tide-1,GLP-1)对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导H9C2心肌细胞凋亡的保护作用机制。方法体外培养H9C2细胞,实验分为4组:正常对照组、100 mg·L~(-1)AGEs试验组、AGEs(100 mg·L~(-1))+GLP-1(10 nmol·L~(-1))组、AGEs(100 mg·L~(-1))+NAC(5 mmol·L~(-1))组,处理24 h。通过CCK-8比色法检测细胞存活率,相差显微镜观察细胞形态,双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜摄片观察细胞内活性氧(ROS)水平;RT-PCR法测定Bax、Bcl-2 mRNA基因的表达;运用Hoechst 33258检测试剂盒及流式细胞术检测心肌细胞的凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达量。结果与正常组相比,100 mg·L~(-1)AGEs组降低H9C2细胞生存率,活性氧(ROS)生成量增加;与AGEs组相比,AGEs+GLP-1组细胞生成率提高,活性氧(ROS)生成量减少。与正常组相比,AGEs组促凋亡蛋白Bax表达增加,抑制凋亡蛋白Bcl-2减少,细胞凋亡率升高;AGEs+GLP-1组较AGEs组下调促凋亡蛋白Bax,上调凋亡抑制蛋白Bcl-2,细胞凋亡率减少。结论 GLP-1对AGEs诱导的心肌细胞凋亡具有保护作用,其保护机制与减少活性氧(ROS)有关。
2017年01期 v.33 120-126页 [查看摘要][在线阅读][下载 1081K] [下载次数：772 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：25 ] |[阅读次数：1 ] - 张雪燕;艾子莺;苟泽鹏;陈静;易娟;赵怀顺;魏虎来;
目的研究2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)通过抑制糖代谢增强白血病K562/ADM多药耐药细胞对阿霉素(adriamycin,ADM)敏感性的作用及机制。方法以白血病K562/ADM及其亲本K562细胞为靶细胞模型,MTT法检测细胞增殖活性,葡萄糖、乳酸、己糖激酶测试盒分析葡萄糖消耗量、乳酸生成量和己糖激酶(hexokinase,HK)活性。Western blot法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)表达和磷酸化(p-m TOR)以及葡萄糖转运体-4(glucose transporter-4,GLUT-4)的表达。结果与亲本K562细胞相比,白血病K562/ADM耐药细胞HK活性、GLUT-4表达水平和有氧糖酵解能力增强。2-DG能够明显抑制K562/ADM及K562细胞的HK活性、葡萄糖消耗量和乳酸生成量,呈时间-浓度依赖性地抑制白血病细胞的增殖活性。低剂量2-DG和ADM可诱导K562/ADM细胞mT OR高表达及磷酸化水平增高,但2-DG与ADM联合则可有效对抗ADM诱导的K562/ADM细胞mT OR高表达和磷酸化,并可降低GLUT-4的表达,提高K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性。结论 2-DG通过竞争性抑制HK活性和抵抗ADM诱发的代偿性mT OR活化,降低GLUT-4表达,有效阻断有氧糖酵解途径而降低K562/ADM耐药细胞的增殖活性、增强其对化疗药物的敏感性。
2017年01期 v.33 126-132页 [查看摘要][在线阅读][下载 1221K] [下载次数：423 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 张雪燕;艾子莺;苟泽鹏;陈静;易娟;赵怀顺;魏虎来;
目的研究2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)通过抑制糖代谢增强白血病K562/ADM多药耐药细胞对阿霉素(adriamycin,ADM)敏感性的作用及机制。方法以白血病K562/ADM及其亲本K562细胞为靶细胞模型,MTT法检测细胞增殖活性,葡萄糖、乳酸、己糖激酶测试盒分析葡萄糖消耗量、乳酸生成量和己糖激酶(hexokinase,HK)活性。Western blot法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)表达和磷酸化(p-m TOR)以及葡萄糖转运体-4(glucose transporter-4,GLUT-4)的表达。结果与亲本K562细胞相比,白血病K562/ADM耐药细胞HK活性、GLUT-4表达水平和有氧糖酵解能力增强。2-DG能够明显抑制K562/ADM及K562细胞的HK活性、葡萄糖消耗量和乳酸生成量,呈时间-浓度依赖性地抑制白血病细胞的增殖活性。低剂量2-DG和ADM可诱导K562/ADM细胞mT OR高表达及磷酸化水平增高,但2-DG与ADM联合则可有效对抗ADM诱导的K562/ADM细胞mT OR高表达和磷酸化,并可降低GLUT-4的表达,提高K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性。结论 2-DG通过竞争性抑制HK活性和抵抗ADM诱发的代偿性mT OR活化,降低GLUT-4表达,有效阻断有氧糖酵解途径而降低K562/ADM耐药细胞的增殖活性、增强其对化疗药物的敏感性。
2017年01期 v.33 126-132页 [查看摘要][在线阅读][下载 1221K] [下载次数：423 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ]