- 刘宁;寻禹;李亚丹;王婷婷;钟爱军;姚亮元;袁秀菊;向双林;
目的研究丙戊酸对脑红蛋白表达的影响和机制,及其对双氧水诱导的神经损伤的保护作用。方法 Western blot、RT-PCR和荧光素酶活性实验检测丙戊酸对小鼠和人脑红蛋白表达的影响;荧光素酶活性实验分析CREB在丙戊酸诱导脑红蛋白启动子活性过程中的作用;MTT实验分析丙戊酸对双氧水诱导的神经损伤的保护能力。结果发现丙戊酸上调小鼠和人脑红蛋白的蛋白和mRNA水平,并能上调脑红蛋白基因的启动子活性;CREB特异性抑制剂KG-501和CREB显性负突变体KCREB均抑制丙戊酸诱导脑红蛋白基因的启动子活性;丙戊酸可保护N2a神经瘤母细胞免受双氧水诱导的损伤。结论 CREB介导了丙戊酸诱导的脑红蛋白表达上调;脑红蛋白可能在丙戊酸保护N2a细胞免受氧化应激诱导的神经损伤过程中扮演重要作用。
2014年05期 v.30 619-623页 [查看摘要][在线阅读][下载 348K] [下载次数：340 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 刘宁;寻禹;李亚丹;王婷婷;钟爱军;姚亮元;袁秀菊;向双林;
目的研究丙戊酸对脑红蛋白表达的影响和机制,及其对双氧水诱导的神经损伤的保护作用。方法 Western blot、RT-PCR和荧光素酶活性实验检测丙戊酸对小鼠和人脑红蛋白表达的影响;荧光素酶活性实验分析CREB在丙戊酸诱导脑红蛋白启动子活性过程中的作用;MTT实验分析丙戊酸对双氧水诱导的神经损伤的保护能力。结果发现丙戊酸上调小鼠和人脑红蛋白的蛋白和mRNA水平,并能上调脑红蛋白基因的启动子活性;CREB特异性抑制剂KG-501和CREB显性负突变体KCREB均抑制丙戊酸诱导脑红蛋白基因的启动子活性;丙戊酸可保护N2a神经瘤母细胞免受双氧水诱导的损伤。结论 CREB介导了丙戊酸诱导的脑红蛋白表达上调;脑红蛋白可能在丙戊酸保护N2a细胞免受氧化应激诱导的神经损伤过程中扮演重要作用。
2014年05期 v.30 619-623页 [查看摘要][在线阅读][下载 348K] [下载次数：340 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 郭佳;边云飞;肖传实;李志东;
目的研究脂联素(adiponectin,APN)对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,IR)损伤的保护作用,并从氧化-抗氧化角度初步探讨其作用机制。方法 Sprague Dawley大鼠随机分为糖尿病组和非糖尿病组。糖尿病组腹腔注射链脲佐菌素致糖尿病。非糖尿病组和糖尿病组大鼠被随机分为正常组(NS)、缺血/再灌注组(NIR)、糖尿病组(DS)、DS+IR组(DIR)、DS+IR+APN组(APN)。NIR组、DIR组、APN组动物经历IR损伤,APN组于再灌注前10 min经舌静脉注射APN。结果糖尿病模型组动物血糖明显升高,体重下降(P<0.05)。NIR组和DIR组心梗面积增加,细胞凋亡增多;心肌组织MDA含量、ROS生成均明显高于各自的对照NS组和DS组;SOD、NO活性则分别明显减低(P<0.05或P<0.01);并且DIR组上述指标变化较NIR组更明显。APN预处理可明显逆转DIR所致的心肌凋亡,并抑制氧化应激(P<0.05或P<0.01)。结论 APN可能通过增强抗氧化能力减轻糖尿病大鼠心肌IR损伤。
2014年05期 v.30 623-627页 [查看摘要][在线阅读][下载 343K] [下载次数：450 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：11 ] |[阅读次数：1 ] - 郭佳;边云飞;肖传实;李志东;
目的研究脂联素(adiponectin,APN)对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,IR)损伤的保护作用,并从氧化-抗氧化角度初步探讨其作用机制。方法 Sprague Dawley大鼠随机分为糖尿病组和非糖尿病组。糖尿病组腹腔注射链脲佐菌素致糖尿病。非糖尿病组和糖尿病组大鼠被随机分为正常组(NS)、缺血/再灌注组(NIR)、糖尿病组(DS)、DS+IR组(DIR)、DS+IR+APN组(APN)。NIR组、DIR组、APN组动物经历IR损伤,APN组于再灌注前10 min经舌静脉注射APN。结果糖尿病模型组动物血糖明显升高,体重下降(P<0.05)。NIR组和DIR组心梗面积增加,细胞凋亡增多;心肌组织MDA含量、ROS生成均明显高于各自的对照NS组和DS组;SOD、NO活性则分别明显减低(P<0.05或P<0.01);并且DIR组上述指标变化较NIR组更明显。APN预处理可明显逆转DIR所致的心肌凋亡,并抑制氧化应激(P<0.05或P<0.01)。结论 APN可能通过增强抗氧化能力减轻糖尿病大鼠心肌IR损伤。
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目的评价血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白转导对脑缺血/再灌注损伤沙土鼠海马神经元的影响。方法构建11R(11个精氨酸残基)-HO-1蛋白,50只沙土鼠随机分为5组(n=10):脑缺血/再灌注组(C组),沙土鼠行脑缺血/再灌注损伤。脑缺血/再灌注+生理盐水组(S组)、脑缺血/再灌注+11R组(R组)、脑缺血/再灌注+5 mg·kg-111R-HO-1组(H1组)和脑缺血/再灌注+25 mg·kg-111R-HO-1组(H2组),各组沙土鼠腹腔分别注射5 mg·kg-1生理盐水、5mg·kg-111R蛋白、5 mg·kg-111R-HO-1蛋白或25 mg·kg-111R-HO-1蛋白,3 h后行脑缺血/再灌注损伤。24 h后取沙土鼠海马,电镜下观察海马组织线粒体的变化,检测海马神经元凋亡、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平。结果C组、S组和R组3组间海马神经元线粒体变性率、神经元凋亡率、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平变化无差异(P>0.05);H1组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs C组、S组和R组,P<0.01);H2组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs H1组,P<0.01)。结论 HO-1蛋白转导减轻了脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤。
2014年05期 v.30 628-632页 [查看摘要][在线阅读][下载 195K] [下载次数：162 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 万晓红;王雁;赵国良;陈华梅;邵建林;
目的评价血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白转导对脑缺血/再灌注损伤沙土鼠海马神经元的影响。方法构建11R(11个精氨酸残基)-HO-1蛋白,50只沙土鼠随机分为5组(n=10):脑缺血/再灌注组(C组),沙土鼠行脑缺血/再灌注损伤。脑缺血/再灌注+生理盐水组(S组)、脑缺血/再灌注+11R组(R组)、脑缺血/再灌注+5 mg·kg-111R-HO-1组(H1组)和脑缺血/再灌注+25 mg·kg-111R-HO-1组(H2组),各组沙土鼠腹腔分别注射5 mg·kg-1生理盐水、5mg·kg-111R蛋白、5 mg·kg-111R-HO-1蛋白或25 mg·kg-111R-HO-1蛋白,3 h后行脑缺血/再灌注损伤。24 h后取沙土鼠海马,电镜下观察海马组织线粒体的变化,检测海马神经元凋亡、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平。结果C组、S组和R组3组间海马神经元线粒体变性率、神经元凋亡率、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平变化无差异(P>0.05);H1组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs C组、S组和R组,P<0.01);H2组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs H1组,P<0.01)。结论 HO-1蛋白转导减轻了脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤。
2014年05期 v.30 628-632页 [查看摘要][在线阅读][下载 195K] [下载次数：162 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 李振;刘啸白;刘云会;薛一雪;王萍;刘丽波;
目的探索内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ(endothelial monocyte activating polypeptide-Ⅱ,EMAP-Ⅱ)增强血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)通透性的相关信号机制。方法采集出生3~5 d的Wistar胎鼠的大脑皮质,应用酶消化法及葡聚糖离心法获得脑微血管段后,接种于培养皿中进行脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)原代培养;将BMECs与C6脑胶质瘤细胞共培养,构建体外BTB模型;共培养后的BMEC被随机分成5组(每组6例):对照组、EMAP-Ⅱ组、H7+EMAP-Ⅱ组、C3 exoenzyme+EMAP-Ⅱ组和C3 exoenzyme+H7+EMAP-Ⅱ组。测定跨内皮阻抗值和辣根过氧化物酶流量评估各组BTB通透性变化情况;Western blot法检测BMECs上紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的表达水平变化;免疫荧光法检测occludin和ZO-1在BMECs上的分布与表达。Western blot法检测BMECs上肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)和磷酸化肌球蛋白轻链(phosphomyosin light chain,pMLC)的表达水平变化。结果与对照组相比较,EMAP-Ⅱ组BTB的通透性明显增高,BMECs上occludin和ZO-1的表达水平明显降低,pMLC的表达水平明显增高;EMAP-Ⅱ的上述作用受到蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制剂H7或(和)RhoA抑制剂C3 exoenzyme预处理的明显抑制。结论信号分子PKC和RhoA在EMAP-Ⅱ增强BTB通透性过程中发挥着重要的作用,信号通路PKC-pMLC和RhoA-pMLC参与调控该过程。
2014年05期 v.30 632-637页 [查看摘要][在线阅读][下载 328K] [下载次数：125 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 李振;刘啸白;刘云会;薛一雪;王萍;刘丽波;
目的探索内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ(endothelial monocyte activating polypeptide-Ⅱ,EMAP-Ⅱ)增强血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)通透性的相关信号机制。方法采集出生3~5 d的Wistar胎鼠的大脑皮质,应用酶消化法及葡聚糖离心法获得脑微血管段后,接种于培养皿中进行脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)原代培养;将BMECs与C6脑胶质瘤细胞共培养,构建体外BTB模型;共培养后的BMEC被随机分成5组(每组6例):对照组、EMAP-Ⅱ组、H7+EMAP-Ⅱ组、C3 exoenzyme+EMAP-Ⅱ组和C3 exoenzyme+H7+EMAP-Ⅱ组。测定跨内皮阻抗值和辣根过氧化物酶流量评估各组BTB通透性变化情况;Western blot法检测BMECs上紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的表达水平变化;免疫荧光法检测occludin和ZO-1在BMECs上的分布与表达。Western blot法检测BMECs上肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)和磷酸化肌球蛋白轻链(phosphomyosin light chain,pMLC)的表达水平变化。结果与对照组相比较,EMAP-Ⅱ组BTB的通透性明显增高,BMECs上occludin和ZO-1的表达水平明显降低,pMLC的表达水平明显增高;EMAP-Ⅱ的上述作用受到蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制剂H7或(和)RhoA抑制剂C3 exoenzyme预处理的明显抑制。结论信号分子PKC和RhoA在EMAP-Ⅱ增强BTB通透性过程中发挥着重要的作用,信号通路PKC-pMLC和RhoA-pMLC参与调控该过程。
2014年05期 v.30 632-637页 [查看摘要][在线阅读][下载 328K] [下载次数：125 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 马婧怡;张万鑫;陈虹;姜勇;屠鹏飞;丁慧;
目的研究松果菊苷(ECH)对血管性痴呆大鼠氧化应激损伤的保护作用。方法采用间隔3 d分2次结扎大鼠双侧颈总动脉法制备血管性痴呆(VD)模型;给药后,采用生化方法测定皮层及海马组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)的活力;HE染色,光学显微镜下观察各组大鼠海马组织CA1区组织结构的变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠的皮层及海马组织中的GSH含量以及GSH-Px的活力明显下降(P<0.01),NO含量及NOS的活力明显升高(P<0.05,P<0.01),海马CA1区细胞数目减少,细胞排列紊乱稀疏,细胞形态不完整,结构不正常,胞质稀少,胞核与胞质界限模糊,细胞核深染、固缩,呈三角形或不规则形,核仁不明显,并出现增生胶质细胞;与模型组比较,各给药组大鼠皮层及海马组织中的GSH含量以及GSH-Px的活力有不同程度的升高(P<0.05,P<0.01),NOS的活力有不同程度的降低(P<0.05,P<0.01),同时大鼠海马CA1区神经元排列较为整齐,结构相对正常,核固缩现象减少,深染程度降低;与阳性药组以及假手术组比较,ECH高剂量组的皮层及海马组织中GSH、NO含量,GSH-Px、NOS的活力差异均无显著性(P>0.05),且ECH高剂量组海马CA1区神经元损伤程度低,更接近于假手术组。结论松果菊苷对血管性痴呆大鼠氧化应激损伤有较好的保护作用。
2014年05期 v.30 638-642页 [查看摘要][在线阅读][下载 196K] [下载次数：999 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：40 ] |[阅读次数：1 ] - 马婧怡;张万鑫;陈虹;姜勇;屠鹏飞;丁慧;
目的研究松果菊苷(ECH)对血管性痴呆大鼠氧化应激损伤的保护作用。方法采用间隔3 d分2次结扎大鼠双侧颈总动脉法制备血管性痴呆(VD)模型;给药后,采用生化方法测定皮层及海马组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)的活力;HE染色,光学显微镜下观察各组大鼠海马组织CA1区组织结构的变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠的皮层及海马组织中的GSH含量以及GSH-Px的活力明显下降(P<0.01),NO含量及NOS的活力明显升高(P<0.05,P<0.01),海马CA1区细胞数目减少,细胞排列紊乱稀疏,细胞形态不完整,结构不正常,胞质稀少,胞核与胞质界限模糊,细胞核深染、固缩,呈三角形或不规则形,核仁不明显,并出现增生胶质细胞;与模型组比较,各给药组大鼠皮层及海马组织中的GSH含量以及GSH-Px的活力有不同程度的升高(P<0.05,P<0.01),NOS的活力有不同程度的降低(P<0.05,P<0.01),同时大鼠海马CA1区神经元排列较为整齐,结构相对正常,核固缩现象减少,深染程度降低;与阳性药组以及假手术组比较,ECH高剂量组的皮层及海马组织中GSH、NO含量,GSH-Px、NOS的活力差异均无显著性(P>0.05),且ECH高剂量组海马CA1区神经元损伤程度低,更接近于假手术组。结论松果菊苷对血管性痴呆大鼠氧化应激损伤有较好的保护作用。
2014年05期 v.30 638-642页 [查看摘要][在线阅读][下载 196K] [下载次数：999 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：40 ] |[阅读次数：1 ] - 侯绍章;郑芳芳;李媛;高岭;
目的观察甘草酸(glycyrrhizic acid,GA)对糖化终产物(advanced glycation endproducts,AGEs)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)细胞增殖、细胞周期及细胞外基质成分中纤粘连蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)的影响。方法用含AGEs的培养液配制GA,同时设牛血清白蛋白(BSA)对照组。HBZY-1各组细胞培养48 h后,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,ELISA方法测定细胞上清液中FN和C-Ⅳ。结果在AGEs的刺激下,细胞增殖明显,细胞S期延长,G1期缩短,PI从35.01%±4.21%增长到44.93%±0.25%(P<0.05),细胞分泌FN和C-Ⅳ明显增加(P<0.05)。加入GA后,细胞异常增殖明显减少,S期细胞减少,G1期增加,PI从44.93%±0.25%减少到42.16%±1.04%(P<0.05),细胞分泌FN和C-Ⅳ有所减少(P<0.05)。结论 GA能对抗AGEs对HBZY-1细胞的损伤作用,其可能是通过抑制AGEs诱导细胞的异常增殖和改变细胞周期来保护细胞免受AGEs的损害,另外,甘草酸能降低ECM中FN和C-Ⅳ的合成。
2014年05期 v.30 642-645页 [查看摘要][在线阅读][下载 198K] [下载次数：280 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：15 ] |[阅读次数：1 ] - 侯绍章;郑芳芳;李媛;高岭;
目的观察甘草酸(glycyrrhizic acid,GA)对糖化终产物(advanced glycation endproducts,AGEs)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)细胞增殖、细胞周期及细胞外基质成分中纤粘连蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)的影响。方法用含AGEs的培养液配制GA,同时设牛血清白蛋白(BSA)对照组。HBZY-1各组细胞培养48 h后,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,ELISA方法测定细胞上清液中FN和C-Ⅳ。结果在AGEs的刺激下,细胞增殖明显,细胞S期延长,G1期缩短,PI从35.01%±4.21%增长到44.93%±0.25%(P<0.05),细胞分泌FN和C-Ⅳ明显增加(P<0.05)。加入GA后,细胞异常增殖明显减少,S期细胞减少,G1期增加,PI从44.93%±0.25%减少到42.16%±1.04%(P<0.05),细胞分泌FN和C-Ⅳ有所减少(P<0.05)。结论 GA能对抗AGEs对HBZY-1细胞的损伤作用,其可能是通过抑制AGEs诱导细胞的异常增殖和改变细胞周期来保护细胞免受AGEs的损害,另外,甘草酸能降低ECM中FN和C-Ⅳ的合成。
2014年05期 v.30 642-645页 [查看摘要][在线阅读][下载 198K] [下载次数：280 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：15 ] |[阅读次数：2 ] - 刘雪青;陈北冬;鲍利;吴伟;孙文佳;齐若梅;
目的探讨银杏内酯B对人脐静脉内皮细胞连接蛋白以及血管渗透性的影响。方法用银杏内酯B(0.2、0.4、0.6 g·L-1)孵育人脐静脉内皮细胞1 h,再用ox-LDL刺激细胞4 h,用Western blot及免疫荧光法检测JAM-A、Cx43的表达。用白细胞迁移实验观察ox-LDL损伤内皮细胞以及银杏内酯B对单核细胞向内皮细胞下迁移的影响。结果①ox-LDL刺激内皮细胞4 h,JAM-A表达增加了22%,Cx43表达增加了24%,银杏内酯B处理的细胞JAM-A、Cx43表达明显降低。免疫荧光检测获得了同样的结果。②PI3K特异性抑制剂LY294002同样抑制了ox-LDL刺激的JAM-A、Cx43表达,表明银杏内酯B降低JAM-A、Cx43表达与抑制Akt磷酸化相关。③白细胞迁移实验表明,银杏内酯B明显减少ox-LDL诱导的单核细胞向内皮细胞下迁移。结论银杏内酯B能抑制ox-LDL刺激的内皮细胞连接蛋白JAM-A、Cx43表达,从而改善血管渗透性,减少白细胞迁移,分子机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。
2014年05期 v.30 646-651页 [查看摘要][在线阅读][下载 568K] [下载次数：343 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 刘雪青;陈北冬;鲍利;吴伟;孙文佳;齐若梅;
目的探讨银杏内酯B对人脐静脉内皮细胞连接蛋白以及血管渗透性的影响。方法用银杏内酯B(0.2、0.4、0.6 g·L-1)孵育人脐静脉内皮细胞1 h,再用ox-LDL刺激细胞4 h,用Western blot及免疫荧光法检测JAM-A、Cx43的表达。用白细胞迁移实验观察ox-LDL损伤内皮细胞以及银杏内酯B对单核细胞向内皮细胞下迁移的影响。结果①ox-LDL刺激内皮细胞4 h,JAM-A表达增加了22%,Cx43表达增加了24%,银杏内酯B处理的细胞JAM-A、Cx43表达明显降低。免疫荧光检测获得了同样的结果。②PI3K特异性抑制剂LY294002同样抑制了ox-LDL刺激的JAM-A、Cx43表达,表明银杏内酯B降低JAM-A、Cx43表达与抑制Akt磷酸化相关。③白细胞迁移实验表明,银杏内酯B明显减少ox-LDL诱导的单核细胞向内皮细胞下迁移。结论银杏内酯B能抑制ox-LDL刺激的内皮细胞连接蛋白JAM-A、Cx43表达,从而改善血管渗透性,减少白细胞迁移,分子机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。
2014年05期 v.30 646-651页 [查看摘要][在线阅读][下载 568K] [下载次数：343 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 王伟;戴敏;徐忠东;
目的观察丹皮酚(Pae)对脂多糖(LPS)与三磷酸腺苷(ATP)诱导大鼠原代小胶质细胞NLRP3炎症小体激活的影响,探讨Pae对小胶质细胞炎症反应的抑制作用及其具体机制。方法采用白细胞分化抗原11b(CD11b)免疫荧光染色法鉴定小胶质细胞;采用ELISA法测定培养液中白细胞介素-1β(IL-1β)的水平;采用Western blot检测细胞NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达水平;采用2',7'-二氯二氢荧光素二乙酯(DCFH-DA)为荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)的水平。结果 LPS(0.5 mg·L-1)/ATP(5 mmol·L-1)能增加小胶质细胞ROS及上清液IL-1β水平,上调细胞NLRP3、ASC和caspase-1蛋白水平;Pae能减少细胞ROS和上清液IL-1β水平,抑制LPS和ATP双信号上调的NLRP3、ASC和caspase-1蛋白水平。结论 Pae能抑制LPS/ATP激活的小胶质细胞NLRP3炎症小体,减少细胞上清液IL-1β水平,Pae对NLRP3炎症小体抑制作用可能与其下调小胶质细胞ROS水平有关。
2014年05期 v.30 652-656页 [查看摘要][在线阅读][下载 333K] [下载次数：1115 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 王伟;戴敏;徐忠东;
目的观察丹皮酚(Pae)对脂多糖(LPS)与三磷酸腺苷(ATP)诱导大鼠原代小胶质细胞NLRP3炎症小体激活的影响,探讨Pae对小胶质细胞炎症反应的抑制作用及其具体机制。方法采用白细胞分化抗原11b(CD11b)免疫荧光染色法鉴定小胶质细胞;采用ELISA法测定培养液中白细胞介素-1β(IL-1β)的水平;采用Western blot检测细胞NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达水平;采用2',7'-二氯二氢荧光素二乙酯(DCFH-DA)为荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)的水平。结果 LPS(0.5 mg·L-1)/ATP(5 mmol·L-1)能增加小胶质细胞ROS及上清液IL-1β水平,上调细胞NLRP3、ASC和caspase-1蛋白水平;Pae能减少细胞ROS和上清液IL-1β水平,抑制LPS和ATP双信号上调的NLRP3、ASC和caspase-1蛋白水平。结论 Pae能抑制LPS/ATP激活的小胶质细胞NLRP3炎症小体,减少细胞上清液IL-1β水平,Pae对NLRP3炎症小体抑制作用可能与其下调小胶质细胞ROS水平有关。
2014年05期 v.30 652-656页 [查看摘要][在线阅读][下载 333K] [下载次数：1115 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 李沐涵;王明艳;赵凤鸣;陈海彬;周红光;赵青春;李文婷;吴勉华;
目的探讨没食子酸(gallic acid,GA)抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖的作用,揭示其促凋亡的相关分子机制。方法体外培养人肝癌细胞SMMC-7721,MTT法观察细胞在GA作用24、48、72 h后的增殖情况;用倒置显微镜观察细胞形态学的变化;透视电镜观察细胞内部结构变化;Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡;采用RT-PCR技术研究p53 mRNA的变化;应用Western blot法检测p53蛋白水平的表达。探讨GA对人肝癌细胞SMMC-7721的诱导凋亡作用及机制。结果剂量为6.25~50μmol·L-1GA作用SMMC-7721细胞48 h有明显的增殖抑制活性,引起核固缩、凝聚、碎裂,诱导细胞凋亡,并呈剂量依赖性;RT-PCR和Western blot结果显示,GA能升高p53 mRNA水平和p53蛋白表达。结论 GA可抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖,诱导凋亡,可能与其上调肿瘤相关抑癌基因p53有关。
2014年05期 v.30 657-661页 [查看摘要][在线阅读][下载 266K] [下载次数：353 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：18 ] |[阅读次数：1 ] - 李沐涵;王明艳;赵凤鸣;陈海彬;周红光;赵青春;李文婷;吴勉华;
目的探讨没食子酸(gallic acid,GA)抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖的作用,揭示其促凋亡的相关分子机制。方法体外培养人肝癌细胞SMMC-7721,MTT法观察细胞在GA作用24、48、72 h后的增殖情况;用倒置显微镜观察细胞形态学的变化;透视电镜观察细胞内部结构变化;Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡;采用RT-PCR技术研究p53 mRNA的变化;应用Western blot法检测p53蛋白水平的表达。探讨GA对人肝癌细胞SMMC-7721的诱导凋亡作用及机制。结果剂量为6.25~50μmol·L-1GA作用SMMC-7721细胞48 h有明显的增殖抑制活性,引起核固缩、凝聚、碎裂,诱导细胞凋亡,并呈剂量依赖性;RT-PCR和Western blot结果显示,GA能升高p53 mRNA水平和p53蛋白表达。结论 GA可抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖,诱导凋亡,可能与其上调肿瘤相关抑癌基因p53有关。
2014年05期 v.30 657-661页 [查看摘要][在线阅读][下载 266K] [下载次数：353 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：18 ] |[阅读次数：1 ] - 于潇冰;王琴;杨克凡;范丽霞;张在军;王玉强;陶亮;
目的研究氯肟衍生物arimoclomol和TCO-2对记忆障碍动物学习记忆能力的影响并初步探讨其机制。方法采用东莨菪碱致记忆获得性障碍小鼠模型和侧脑室注射Aβ1-42所致记忆障碍大鼠模型。动物分为正常组、模型组、多奈哌齐对照组、arimoclomol干预组和TCO-2干预组。正常组与模型组动物每日相同时间腹腔注射相应剂量的药物溶剂(生理盐水);多奈哌齐对照组及待测药物干预组分别给予相应剂量的药物。给药8 d后,采用Morris水迷宫方法检测动物的空间学习记忆能力,并且检测动物海马组织的乙酰胆碱酯酶活性;检测侧脑室注射Aβ1-42大鼠海马组织的Aβ1-42含量,并测定磷酸化tau蛋白表达。结果与模型对照组相比,给予两种氯肟衍生物的动物搜索平台潜伏期缩短,穿越平台次数增加,表明氯肟衍生物可以明显改善注射东莨菪碱或Aβ1-42引起的记忆障碍;给予氯肟化合物还能够明显降低脑内乙酰胆碱酯酶活性和Aβ1-42含量,下调磷酸化tau蛋白的表达。结论氯肟衍生物可改善东莨菪碱以及侧脑室注射Aβ1-42所致的记忆障碍,其作用机制可能与增强中枢胆碱能系统功能、降低脑内Aβ蛋白和磷酸化tau蛋白含量有关。
2014年05期 v.30 662-667页 [查看摘要][在线阅读][下载 213K] [下载次数：251 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 于潇冰;王琴;杨克凡;范丽霞;张在军;王玉强;陶亮;
目的研究氯肟衍生物arimoclomol和TCO-2对记忆障碍动物学习记忆能力的影响并初步探讨其机制。方法采用东莨菪碱致记忆获得性障碍小鼠模型和侧脑室注射Aβ1-42所致记忆障碍大鼠模型。动物分为正常组、模型组、多奈哌齐对照组、arimoclomol干预组和TCO-2干预组。正常组与模型组动物每日相同时间腹腔注射相应剂量的药物溶剂(生理盐水);多奈哌齐对照组及待测药物干预组分别给予相应剂量的药物。给药8 d后,采用Morris水迷宫方法检测动物的空间学习记忆能力,并且检测动物海马组织的乙酰胆碱酯酶活性;检测侧脑室注射Aβ1-42大鼠海马组织的Aβ1-42含量,并测定磷酸化tau蛋白表达。结果与模型对照组相比,给予两种氯肟衍生物的动物搜索平台潜伏期缩短,穿越平台次数增加,表明氯肟衍生物可以明显改善注射东莨菪碱或Aβ1-42引起的记忆障碍;给予氯肟化合物还能够明显降低脑内乙酰胆碱酯酶活性和Aβ1-42含量,下调磷酸化tau蛋白的表达。结论氯肟衍生物可改善东莨菪碱以及侧脑室注射Aβ1-42所致的记忆障碍,其作用机制可能与增强中枢胆碱能系统功能、降低脑内Aβ蛋白和磷酸化tau蛋白含量有关。
2014年05期 v.30 662-667页 [查看摘要][在线阅读][下载 213K] [下载次数：251 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：3 ] - 曹晓正;杨小红;曹建国;向红琳;
目的研究8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)能否有效逆转人宫颈癌SiHa细胞系球形成细胞上皮-间叶样表型转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。方法体外培养SiHa细胞系细胞,干细胞条件培养基悬浮培养得到球形成细胞(sphere forming cells,SFCs)。以BrMC处理SFCs后,通过单层贴壁培养观察细胞形态。Western blot分析SFCs的E-cadherin、N-cadherin和Twist1蛋白表达水平。结果与亲本细胞比较,SiHa细胞系SFCs呈现间叶样细胞(梭形细胞)形态,并低表达E-cadherin和高表达N-cadherin蛋白。BrMC(1.0μmol·L-1)处理72 h后,SFCs由梭形细胞转变为多边形细胞;BrMC(0.1和1.0μmol·L-1)作用24 h,SFCs中E-cadherin表达上调,N-cadherin和Twist1蛋白表达降低。结论 BrMC具有逆转SiHa细胞系SFCs的EMT作用,其机制涉及降低Twsit1蛋白表达。
2014年05期 v.30 668-671页 [查看摘要][在线阅读][下载 455K] [下载次数：178 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：14 ] |[阅读次数：1 ] - 曹晓正;杨小红;曹建国;向红琳;
目的研究8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)能否有效逆转人宫颈癌SiHa细胞系球形成细胞上皮-间叶样表型转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。方法体外培养SiHa细胞系细胞,干细胞条件培养基悬浮培养得到球形成细胞(sphere forming cells,SFCs)。以BrMC处理SFCs后,通过单层贴壁培养观察细胞形态。Western blot分析SFCs的E-cadherin、N-cadherin和Twist1蛋白表达水平。结果与亲本细胞比较,SiHa细胞系SFCs呈现间叶样细胞(梭形细胞)形态,并低表达E-cadherin和高表达N-cadherin蛋白。BrMC(1.0μmol·L-1)处理72 h后,SFCs由梭形细胞转变为多边形细胞;BrMC(0.1和1.0μmol·L-1)作用24 h,SFCs中E-cadherin表达上调,N-cadherin和Twist1蛋白表达降低。结论 BrMC具有逆转SiHa细胞系SFCs的EMT作用,其机制涉及降低Twsit1蛋白表达。
2014年05期 v.30 668-671页 [查看摘要][在线阅读][下载 455K] [下载次数：178 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：14 ] |[阅读次数：1 ] - 吕程;吴小兰;殷中琼;景波;李正文;戴书俊;
目的观察青刺果总黄酮对四氧嘧啶导致的糖尿病小鼠肾组织形态学的影响,探讨其对肾脏的保护作用。方法腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型,连续4周给予青刺果总黄酮灌胃治疗。2周及4周后分别处死小鼠,测血糖,称肾重和计算肾脏脏器指数。取部分肾做切片,分别在光镜和电镜下观察肾脏病理变化。结果糖尿病模型小鼠经青刺果总黄酮治疗后,在光镜和电镜下均可观察到由四氧嘧啶导致的肾脏病变的减轻。经青刺果总黄酮治疗的糖尿病小鼠其肾小球体积减小,基底膜无明显增厚;肾小管内糖原沉积减少,间质纤维减少;细胞器损伤较模型组轻微。结论青刺果总黄酮能有效的改善糖尿病小鼠肾脏的病变,控制肾脏肥大,对糖尿病肾病有一定的保护作用。
2014年05期 v.30 672-675页 [查看摘要][在线阅读][下载 452K] [下载次数：259 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 吕程;吴小兰;殷中琼;景波;李正文;戴书俊;
目的观察青刺果总黄酮对四氧嘧啶导致的糖尿病小鼠肾组织形态学的影响,探讨其对肾脏的保护作用。方法腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型,连续4周给予青刺果总黄酮灌胃治疗。2周及4周后分别处死小鼠,测血糖,称肾重和计算肾脏脏器指数。取部分肾做切片,分别在光镜和电镜下观察肾脏病理变化。结果糖尿病模型小鼠经青刺果总黄酮治疗后,在光镜和电镜下均可观察到由四氧嘧啶导致的肾脏病变的减轻。经青刺果总黄酮治疗的糖尿病小鼠其肾小球体积减小,基底膜无明显增厚;肾小管内糖原沉积减少,间质纤维减少;细胞器损伤较模型组轻微。结论青刺果总黄酮能有效的改善糖尿病小鼠肾脏的病变,控制肾脏肥大,对糖尿病肾病有一定的保护作用。
2014年05期 v.30 672-675页 [查看摘要][在线阅读][下载 452K] [下载次数：259 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 郝永龙;陈美荣;黄铭;
目的研究中华眼镜蛇神经毒素PLGA微球制备及通过鼻黏膜给药的镇痛作用。方法采用复乳溶剂挥发法制备眼镜蛇神经毒素PLGA微球,采用大鼠甩尾法测定其镇痛效果。结果采用W/O/O方法,成功制备出中华眼镜蛇神经毒素鼻腔给药PLGA微球,微球平均粒径25μm左右,药物包埋率达80%以上。通过大鼠甩尾法显示明显的镇痛效果。结论将中华眼镜蛇神经毒素制成微球制剂鼻腔给药,镇痛作用明显增强。
2014年05期 v.30 676-679页 [查看摘要][在线阅读][下载 153K] [下载次数：216 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 郝永龙;陈美荣;黄铭;
目的研究中华眼镜蛇神经毒素PLGA微球制备及通过鼻黏膜给药的镇痛作用。方法采用复乳溶剂挥发法制备眼镜蛇神经毒素PLGA微球,采用大鼠甩尾法测定其镇痛效果。结果采用W/O/O方法,成功制备出中华眼镜蛇神经毒素鼻腔给药PLGA微球,微球平均粒径25μm左右,药物包埋率达80%以上。通过大鼠甩尾法显示明显的镇痛效果。结论将中华眼镜蛇神经毒素制成微球制剂鼻腔给药,镇痛作用明显增强。
2014年05期 v.30 676-679页 [查看摘要][在线阅读][下载 153K] [下载次数：216 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 李敏;孙玲;李红玲;孙黔云;
目的研究阿托伐他汀(ATV)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)导致人微血管内皮细胞活化和损伤的抑制作用。方法采用ox-LDL激活和损伤人微血管内皮细胞。损伤前加入ATV与内皮细胞孵育。细胞暴露于ox-LDL后,MTT法测定细胞活力,酶活性测定法检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力,ELISA检测上清中ICAM-1含量,Western blot检测细胞质内NF-κB p65的磷酸化水平,并采用双萤光素酶报告基因检测系统测定NF-κB的核内转录活性。结果 OxLDL能导致人微血管内皮细胞的活化和损伤。ATV的干预可有效减轻ox-LDL对细胞活力的抑制、减少LDH释放、下调ICAM-1分子的表达、减弱细胞质内NF-κB p65的磷酸化、抑制NF-κB核内转录活性的上调。结论 ATV能有效减轻ox-LDL导致的人微血管内皮细胞活化和损伤,其机制可能与抑制NF-κB的磷酸化和核内转录活性有关。
2014年05期 v.30 679-683页 [查看摘要][在线阅读][下载 314K] [下载次数：180 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 李敏;孙玲;李红玲;孙黔云;
目的研究阿托伐他汀(ATV)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)导致人微血管内皮细胞活化和损伤的抑制作用。方法采用ox-LDL激活和损伤人微血管内皮细胞。损伤前加入ATV与内皮细胞孵育。细胞暴露于ox-LDL后,MTT法测定细胞活力,酶活性测定法检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力,ELISA检测上清中ICAM-1含量,Western blot检测细胞质内NF-κB p65的磷酸化水平,并采用双萤光素酶报告基因检测系统测定NF-κB的核内转录活性。结果 OxLDL能导致人微血管内皮细胞的活化和损伤。ATV的干预可有效减轻ox-LDL对细胞活力的抑制、减少LDH释放、下调ICAM-1分子的表达、减弱细胞质内NF-κB p65的磷酸化、抑制NF-κB核内转录活性的上调。结论 ATV能有效减轻ox-LDL导致的人微血管内皮细胞活化和损伤,其机制可能与抑制NF-κB的磷酸化和核内转录活性有关。
2014年05期 v.30 679-683页 [查看摘要][在线阅读][下载 314K] [下载次数：180 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 黄邵洪;安军;李昀;张军航;荣健;
目的观察蛋白酶激活受体2(PAR2)活化对肺癌细胞株A549表皮生长因子受体(EGFR)表达及凋亡影响。方法在A549及EGFR基因沉默的A549细胞株培养液中加入类胰蛋白酶,用定量RT-PCR及Western blot法检测EGFR表达,观测细胞凋亡情况及与Bax/Bcl-xL表达水平。结果与类胰蛋白酶共培养48 h后,A549细胞EGFR表达明显增加。凋亡比例明显降低,而且这种降低呈现剂量浓度依赖性。细胞中Bax表达明显减少而Bcl-xL明显增加。EGFR基因沉默后,类胰蛋白酶对A549细胞凋亡的抑制作用被阻断,对Bax/Bcl-xL比率亦无影响。结论类胰蛋白酶能增加肺癌细胞株A549EGFR表达,减少其凋亡,明显减少Bax表达而增加Bcl-xL表达。
2014年05期 v.30 684-688页 [查看摘要][在线阅读][下载 261K] [下载次数：121 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 黄邵洪;安军;李昀;张军航;荣健;
目的观察蛋白酶激活受体2(PAR2)活化对肺癌细胞株A549表皮生长因子受体(EGFR)表达及凋亡影响。方法在A549及EGFR基因沉默的A549细胞株培养液中加入类胰蛋白酶,用定量RT-PCR及Western blot法检测EGFR表达,观测细胞凋亡情况及与Bax/Bcl-xL表达水平。结果与类胰蛋白酶共培养48 h后,A549细胞EGFR表达明显增加。凋亡比例明显降低,而且这种降低呈现剂量浓度依赖性。细胞中Bax表达明显减少而Bcl-xL明显增加。EGFR基因沉默后,类胰蛋白酶对A549细胞凋亡的抑制作用被阻断,对Bax/Bcl-xL比率亦无影响。结论类胰蛋白酶能增加肺癌细胞株A549EGFR表达,减少其凋亡,明显减少Bax表达而增加Bcl-xL表达。
2014年05期 v.30 684-688页 [查看摘要][在线阅读][下载 261K] [下载次数：121 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 何小喜;莫书荣;
目的观察红景天苷体内抗肿瘤作用,初步探讨其可能机制。方法建立荷瘤小鼠模型,实验分为5组,即红景天苷低、中、高剂量组,NS组及苦参碱对照组;ip给药8 d,观察小鼠肿瘤生长情况及生存时间,测定抑瘤率、生命延长率、脾脏系数以及血清IL-2、IL-12水平等指标。结果红景天苷能明显改善荷瘤小鼠一般状况;红景天苷低、中、高3个剂量组均有抑瘤作用(P<0.01),抑瘤率分别为28.9%、43.3%、53.5%;红景天苷各剂量组均能延长小鼠的生存时间(P<0.01),生命延长率分别为37.54%、48.96%、52.85%;红景天苷各剂量组小鼠脾脏系数与血清IL-2、IL-12水平均明显高于NS组与苦参碱组。结论红景天苷具有明显的抗肿瘤作用,其机制可能与提高机体免疫功能有关。
2014年05期 v.30 688-691页 [查看摘要][在线阅读][下载 181K] [下载次数：638 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：28 ] |[阅读次数：1 ] - 何小喜;莫书荣;
目的观察红景天苷体内抗肿瘤作用,初步探讨其可能机制。方法建立荷瘤小鼠模型,实验分为5组,即红景天苷低、中、高剂量组,NS组及苦参碱对照组;ip给药8 d,观察小鼠肿瘤生长情况及生存时间,测定抑瘤率、生命延长率、脾脏系数以及血清IL-2、IL-12水平等指标。结果红景天苷能明显改善荷瘤小鼠一般状况;红景天苷低、中、高3个剂量组均有抑瘤作用(P<0.01),抑瘤率分别为28.9%、43.3%、53.5%;红景天苷各剂量组均能延长小鼠的生存时间(P<0.01),生命延长率分别为37.54%、48.96%、52.85%;红景天苷各剂量组小鼠脾脏系数与血清IL-2、IL-12水平均明显高于NS组与苦参碱组。结论红景天苷具有明显的抗肿瘤作用,其机制可能与提高机体免疫功能有关。
2014年05期 v.30 688-691页 [查看摘要][在线阅读][下载 181K] [下载次数：638 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：28 ] |[阅读次数：1 ] - 靳梦醒;闫海;程艳伟;桂丽;胡春松;张林杰;黄保军;
目的探讨辛伐他汀对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导的巨噬细胞内活性氧(ROS)的水平及IL-1β分泌的影响。方法将oxLDL 0、50、100、200 mg·L-1作用于巨噬细胞J774A.1后,采用油红O染色观察脂滴在巨噬细胞内的聚集情况;用辛伐他汀0.5、1.0μmol·L-1作用于oxLDL处理的巨噬细胞,流式细胞仪检测辛伐他汀作用前后细胞内ROS的水平;Western blot检测pro-caspase-1、cleaved caspase-1和成熟IL-1β的表达情况。结果油红O染色结果表明,oxLDL可导致巨噬细胞内明显的脂质聚集,并于100 mg·L-1作用剂量达到摄取脂质的饱和状态;流式细胞仪结果表明,oxLDL可以诱导脂质聚集巨噬细胞内ROS的水平增加,辛伐他汀作用后,ROS水平由(167±0.47)%下降到(139±0.97)%,并呈明显的剂量依赖;Western blot结果表明,辛伐他汀可抑制oxLDL诱导的caspase-1活化及IL-1β的分泌,辛伐他汀处理组与oxLDL实验组相比,cleaved caspase-1及成熟IL-1β的表达呈下降趋势,灰度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论在oxLDL诱导的巨噬细胞脂质聚集模型中,辛伐他汀可以抑制巨噬细胞内ROS的产生及caspase-1的活化,并减少IL-1β的分泌。
2014年05期 v.30 692-696页 [查看摘要][在线阅读][下载 310K] [下载次数：325 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 靳梦醒;闫海;程艳伟;桂丽;胡春松;张林杰;黄保军;
目的探讨辛伐他汀对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导的巨噬细胞内活性氧(ROS)的水平及IL-1β分泌的影响。方法将oxLDL 0、50、100、200 mg·L-1作用于巨噬细胞J774A.1后,采用油红O染色观察脂滴在巨噬细胞内的聚集情况;用辛伐他汀0.5、1.0μmol·L-1作用于oxLDL处理的巨噬细胞,流式细胞仪检测辛伐他汀作用前后细胞内ROS的水平;Western blot检测pro-caspase-1、cleaved caspase-1和成熟IL-1β的表达情况。结果油红O染色结果表明,oxLDL可导致巨噬细胞内明显的脂质聚集,并于100 mg·L-1作用剂量达到摄取脂质的饱和状态;流式细胞仪结果表明,oxLDL可以诱导脂质聚集巨噬细胞内ROS的水平增加,辛伐他汀作用后,ROS水平由(167±0.47)%下降到(139±0.97)%,并呈明显的剂量依赖;Western blot结果表明,辛伐他汀可抑制oxLDL诱导的caspase-1活化及IL-1β的分泌,辛伐他汀处理组与oxLDL实验组相比,cleaved caspase-1及成熟IL-1β的表达呈下降趋势,灰度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论在oxLDL诱导的巨噬细胞脂质聚集模型中,辛伐他汀可以抑制巨噬细胞内ROS的产生及caspase-1的活化,并减少IL-1β的分泌。
2014年05期 v.30 692-696页 [查看摘要][在线阅读][下载 310K] [下载次数：325 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 张季;严春临;侯勇;王树;张丹参;薛贵平;董晓华;
目的研究大黄酚对铅中毒小鼠免疫功能的保护作用。方法采用连续8 d腹腔注射7 mg·kg-1醋酸铅造成铅中毒小鼠模型,大黄酚治疗14 d后检测脾脏和胸腺指数、白细胞计数、巨噬细胞吞噬功能、T、B淋巴细胞增殖能力,自然杀伤细胞(NK)活性。以酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定铅中毒小鼠血清中细胞因子含量。结果连续8 d腹腔注射7 mg·kg-1醋酸铅造成铅中毒小鼠免疫能力下降,大黄酚可明显提高铅中毒小鼠的免疫能力,主要表现为连续腹腔注射大黄酚14 d治疗后,可不同程度改善铅中毒小鼠生长速度,明显提高铅中毒小鼠脏器指数和白细胞计数(P<0.05或P<0.01);大黄酚治疗组(1.0、10.0 mg·kg-1)可明显提高铅中毒小鼠B脾淋巴细胞增殖能力和T脾淋巴细胞增殖能力(P<0.01),大黄酚治疗组(1.0、10.0 mg·kg-1)可明显提高铅中毒巨噬细胞吞噬能力和NK细胞杀伤力(P<0.01),与溶媒组相比铅中毒模型组小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10含量均明显降低(P<0.01);与模型组相比,大黄酚治疗组(1.0,10.0 mg·kg-1)小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10均明显升高(P<0.01);与模型组相比,大黄酚治疗组(0.1 mg·kg-1)小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4含量未见明显变化(P>0.05),仅IL-10含量明显升高(P<0.05)。结论大黄酚可提高铅中毒小鼠免疫功能。
2014年05期 v.30 696-700页 [查看摘要][在线阅读][下载 157K] [下载次数：709 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：35 ] |[阅读次数：1 ] - 张季;严春临;侯勇;王树;张丹参;薛贵平;董晓华;
目的研究大黄酚对铅中毒小鼠免疫功能的保护作用。方法采用连续8 d腹腔注射7 mg·kg-1醋酸铅造成铅中毒小鼠模型,大黄酚治疗14 d后检测脾脏和胸腺指数、白细胞计数、巨噬细胞吞噬功能、T、B淋巴细胞增殖能力,自然杀伤细胞(NK)活性。以酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定铅中毒小鼠血清中细胞因子含量。结果连续8 d腹腔注射7 mg·kg-1醋酸铅造成铅中毒小鼠免疫能力下降,大黄酚可明显提高铅中毒小鼠的免疫能力,主要表现为连续腹腔注射大黄酚14 d治疗后,可不同程度改善铅中毒小鼠生长速度,明显提高铅中毒小鼠脏器指数和白细胞计数(P<0.05或P<0.01);大黄酚治疗组(1.0、10.0 mg·kg-1)可明显提高铅中毒小鼠B脾淋巴细胞增殖能力和T脾淋巴细胞增殖能力(P<0.01),大黄酚治疗组(1.0、10.0 mg·kg-1)可明显提高铅中毒巨噬细胞吞噬能力和NK细胞杀伤力(P<0.01),与溶媒组相比铅中毒模型组小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10含量均明显降低(P<0.01);与模型组相比,大黄酚治疗组(1.0,10.0 mg·kg-1)小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10均明显升高(P<0.01);与模型组相比,大黄酚治疗组(0.1 mg·kg-1)小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4含量未见明显变化(P>0.05),仅IL-10含量明显升高(P<0.05)。结论大黄酚可提高铅中毒小鼠免疫功能。
2014年05期 v.30 696-700页 [查看摘要][在线阅读][下载 157K] [下载次数：709 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：35 ] |[阅读次数：2 ] - 葛燕梅;叶艳;张林杰;
目的探讨SHIP2(SH2 domain containing inositol 5-phosphatase 2)基因转染人胃癌细胞BGC-823后对紫杉醇敏感性的影响。方法流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡率。应用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测各组细胞蛋白表达情况。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)分析mRNA的变化水平。将pCMV6-SHIP2质粒在脂质体介导下转染人胃癌BGC-823细胞,同时以转染空载体和未转染细胞作为对照组。将GV112-Puromycin空载体和GV112-Puromycin-Bim(Bcl-2 interacting mediator of cell death)慢病毒颗粒分别感染BGC-823细胞,建立稳定细胞株,再将pCMV6-SHIP2质粒分别转染空载体和稳定干扰Bim表达细胞株。结果与SGC-7901细胞相比,BGC-823细胞对紫杉醇诱导的凋亡相对不敏感,0.3μmol·L-1紫杉醇诱导BGC-823 48 h后细胞凋亡率仅为(25.6±1.6)%,在紫杉醇作用不同时间点Bim蛋白和mRNA表达均无明显变化;与对照组相比,转染SHIP2基因能明显增加Bim的表达,紫杉醇作用48 h后,细胞凋亡率上升到(50.8±0.9)%;GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的BGC-823细胞,Bim的表达明显被抑制,在GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的稳定BGC-823细胞中转入pCMV6-SHIP2,紫杉醇作用48 h后,凋亡率为(27.6±1.6)%。结论转染外源性SHIP2基因能有效提高BGC-823细胞内Bim的表达,诱导BGC-823细胞凋亡,明显增加BGC-823细胞对紫杉醇的敏感性。
2014年05期 v.30 701-706页 [查看摘要][在线阅读][下载 294K] [下载次数：172 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 葛燕梅;叶艳;张林杰;
目的探讨SHIP2(SH2 domain containing inositol 5-phosphatase 2)基因转染人胃癌细胞BGC-823后对紫杉醇敏感性的影响。方法流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡率。应用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测各组细胞蛋白表达情况。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)分析mRNA的变化水平。将pCMV6-SHIP2质粒在脂质体介导下转染人胃癌BGC-823细胞,同时以转染空载体和未转染细胞作为对照组。将GV112-Puromycin空载体和GV112-Puromycin-Bim(Bcl-2 interacting mediator of cell death)慢病毒颗粒分别感染BGC-823细胞,建立稳定细胞株,再将pCMV6-SHIP2质粒分别转染空载体和稳定干扰Bim表达细胞株。结果与SGC-7901细胞相比,BGC-823细胞对紫杉醇诱导的凋亡相对不敏感,0.3μmol·L-1紫杉醇诱导BGC-823 48 h后细胞凋亡率仅为(25.6±1.6)%,在紫杉醇作用不同时间点Bim蛋白和mRNA表达均无明显变化;与对照组相比,转染SHIP2基因能明显增加Bim的表达,紫杉醇作用48 h后,细胞凋亡率上升到(50.8±0.9)%;GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的BGC-823细胞,Bim的表达明显被抑制,在GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的稳定BGC-823细胞中转入pCMV6-SHIP2,紫杉醇作用48 h后,凋亡率为(27.6±1.6)%。结论转染外源性SHIP2基因能有效提高BGC-823细胞内Bim的表达,诱导BGC-823细胞凋亡,明显增加BGC-823细胞对紫杉醇的敏感性。
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目的探讨POR基因多态性与华法林维持剂量的相关性。方法共纳入185例中国汉族人工心脏机械瓣膜置换术患者,采用Sequenom MassARRAYSystem检测VKORC1及POR相关SNPs,采用PCR-RFLP法检测CYP2C9*3基因型。采用ANOVA或t检验考察目的 SNPs与患者华法林维持剂量的关系。结果在CYP2C9*1*1携带者中,POR rs17685 T等位基因携带者(TT型和CT型)华法林维持剂量明显高于CC型携带者(3.50±1.07)mg·d-1vs(3.14±0.94)mg·d-1,P=0.03。在CYP2C9*1*1及VKORC1 rs9934438 GA/GG携带者中,POR rs17685 T等位基因携带者(TT型和CT型)的华法林维持剂量明显高于CC型携带者(4.76±0.90)mg·d-1vs(4.08±1.03)mg·d-1,P=0.04。未发现POR rs2868177与华法林维持剂量存在相关性。结论在中国汉族人工心脏机械瓣膜置换术患者中,POR rs17685 T突变与华法林剂量上调相关,该基因型检测将有助于指导华法林的临床合理应用。
2014年05期 v.30 706-710页 [查看摘要][在线阅读][下载 228K] [下载次数：366 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：1 ] - 胡蓉;许哲;赵立子;李嘉丽;王雪丁;郑绮姗;张希;黄民;
目的探讨POR基因多态性与华法林维持剂量的相关性。方法共纳入185例中国汉族人工心脏机械瓣膜置换术患者,采用Sequenom MassARRAYSystem检测VKORC1及POR相关SNPs,采用PCR-RFLP法检测CYP2C9*3基因型。采用ANOVA或t检验考察目的 SNPs与患者华法林维持剂量的关系。结果在CYP2C9*1*1携带者中,POR rs17685 T等位基因携带者(TT型和CT型)华法林维持剂量明显高于CC型携带者(3.50±1.07)mg·d-1vs(3.14±0.94)mg·d-1,P=0.03。在CYP2C9*1*1及VKORC1 rs9934438 GA/GG携带者中,POR rs17685 T等位基因携带者(TT型和CT型)的华法林维持剂量明显高于CC型携带者(4.76±0.90)mg·d-1vs(4.08±1.03)mg·d-1,P=0.04。未发现POR rs2868177与华法林维持剂量存在相关性。结论在中国汉族人工心脏机械瓣膜置换术患者中,POR rs17685 T突变与华法林剂量上调相关,该基因型检测将有助于指导华法林的临床合理应用。
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目的建立测定大鼠血浆中野黄芩素及其代谢产物葡萄糖醛酸结合物浓度的UPLC-MS/MS法,并讨论两者在大鼠体内的药代动力学过程。方法色谱采用Waters BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,质谱采用多反应监测(MRM)进行正离子检测野黄芩素。大鼠静脉给予野黄芩素,测定给药后不同时间的野黄芩素的血药浓度;采用酶解方式间接测定野黄芩素葡萄糖醛酸结合物的血药浓度,以DAS 2.0软件获得药动学参数。结果野黄芩素在0.116~28.2 mg·L-1呈良好线性相关,提取回收率为80.5%~90.0%,精密度、准确度、稳定性良好。药代动力学研究结果表明静脉给予野黄芩素后其原型及其葡萄糖醛酸结合物药代动力学过程均符合二室模型。结论本研究所建立的方法具有灵敏度高,重现性好,操作简便等特点,可用于同时测定野黄芩素及其葡萄糖醛酸结合物在体内的浓度,便于原型药物及其代谢物产物的药动学研究。
2014年05期 v.30 711-715页 [查看摘要][在线阅读][下载 252K] [下载次数：471 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：1 ] - 刘跃;黄勇;董永喜;王永林;郑林;
目的建立测定大鼠血浆中野黄芩素及其代谢产物葡萄糖醛酸结合物浓度的UPLC-MS/MS法,并讨论两者在大鼠体内的药代动力学过程。方法色谱采用Waters BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,质谱采用多反应监测(MRM)进行正离子检测野黄芩素。大鼠静脉给予野黄芩素,测定给药后不同时间的野黄芩素的血药浓度;采用酶解方式间接测定野黄芩素葡萄糖醛酸结合物的血药浓度,以DAS 2.0软件获得药动学参数。结果野黄芩素在0.116~28.2 mg·L-1呈良好线性相关,提取回收率为80.5%~90.0%,精密度、准确度、稳定性良好。药代动力学研究结果表明静脉给予野黄芩素后其原型及其葡萄糖醛酸结合物药代动力学过程均符合二室模型。结论本研究所建立的方法具有灵敏度高,重现性好,操作简便等特点,可用于同时测定野黄芩素及其葡萄糖醛酸结合物在体内的浓度,便于原型药物及其代谢物产物的药动学研究。
2014年05期 v.30 711-715页 [查看摘要][在线阅读][下载 252K] [下载次数：471 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：2 ] - 刘文君;徐学清;
目的研究大胡蜂肥大细胞脱粒肽12a对血管生成的影响。方法利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验体内观察不同浓度的12a对血管形成的影响;采用MTT法和小管形成实验体外观察不同浓度的12a对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和血管形成的影响。结果 0.1和1μg 12a能明显抑制0.2μg重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)诱导的10 d龄鸡胚的绒毛尿囊膜血管生成,导致不同程度的CAM血管大范围明显褪色,密度减少,结构模糊,分支多处断开,生长抑制率分别为60.2%和90.3%;1 mg·L-1和10 mg·L-112a对HUVEC的增殖和血管形成分别有55.4%、39.3%和51.6%、26.7%的抑制率;结论大胡蜂肥大细胞脱粒肽12a能明显抑制新生血管的生成。
2014年05期 v.30 715-718页 [查看摘要][在线阅读][下载 208K] [下载次数：234 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：1 ] - 刘文君;徐学清;
目的研究大胡蜂肥大细胞脱粒肽12a对血管生成的影响。方法利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验体内观察不同浓度的12a对血管形成的影响;采用MTT法和小管形成实验体外观察不同浓度的12a对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和血管形成的影响。结果 0.1和1μg 12a能明显抑制0.2μg重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)诱导的10 d龄鸡胚的绒毛尿囊膜血管生成,导致不同程度的CAM血管大范围明显褪色,密度减少,结构模糊,分支多处断开,生长抑制率分别为60.2%和90.3%;1 mg·L-1和10 mg·L-112a对HUVEC的增殖和血管形成分别有55.4%、39.3%和51.6%、26.7%的抑制率;结论大胡蜂肥大细胞脱粒肽12a能明显抑制新生血管的生成。
2014年05期 v.30 715-718页 [查看摘要][在线阅读][下载 208K] [下载次数：234 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：1 ] - 李彩丽;陈静;王蓓;王菲菲;田宝莹;谢蓓;范临兰;魏虎来;
目的研究自噬在As2O3诱导的Raji细胞死亡中的作用及机制。方法透射电镜和MDC荧光染色观察细胞自噬形态,MTT法测定细胞增殖活性;流式细胞术(FCM)及FITC-Annexin-V/PI染色检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测细胞LC3-Ⅰ/Ⅱ表达及转换;RT-PCR检测细胞bcl-2 mRNA和p53 mRNA的表达水平。结果 As2O3明显抑制Raji细胞增殖,诱导其细胞周期G2/M阻滞和凋亡,抑制bcl-2基因和增强p53基因表达。同时,As2O3可同步诱发Raji细胞的自噬活性。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制As2O3诱导的自噬活性,上调bcl-2基因和下调p53基因表达,抑制As2O3对Raji细胞的杀伤效应、降低Raji细胞对As2O3的敏感性。而自噬诱导剂雷帕霉素(Rapa)的作用则与3-MA的效应正好相反。结论细胞凋亡和自噬性细胞死亡共存于As2O3诱导的Raji淋巴瘤细胞死亡中,Bcl-2和p53可能起着关键的调控作用。
2014年05期 v.30 719-724页 [查看摘要][在线阅读][下载 407K] [下载次数：407 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：18 ] |[阅读次数：1 ] - 李彩丽;陈静;王蓓;王菲菲;田宝莹;谢蓓;范临兰;魏虎来;
目的研究自噬在As2O3诱导的Raji细胞死亡中的作用及机制。方法透射电镜和MDC荧光染色观察细胞自噬形态,MTT法测定细胞增殖活性;流式细胞术(FCM)及FITC-Annexin-V/PI染色检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测细胞LC3-Ⅰ/Ⅱ表达及转换;RT-PCR检测细胞bcl-2 mRNA和p53 mRNA的表达水平。结果 As2O3明显抑制Raji细胞增殖,诱导其细胞周期G2/M阻滞和凋亡,抑制bcl-2基因和增强p53基因表达。同时,As2O3可同步诱发Raji细胞的自噬活性。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制As2O3诱导的自噬活性,上调bcl-2基因和下调p53基因表达,抑制As2O3对Raji细胞的杀伤效应、降低Raji细胞对As2O3的敏感性。而自噬诱导剂雷帕霉素(Rapa)的作用则与3-MA的效应正好相反。结论细胞凋亡和自噬性细胞死亡共存于As2O3诱导的Raji淋巴瘤细胞死亡中,Bcl-2和p53可能起着关键的调控作用。
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