- 田继华;常思佳;郭海秀;冀贺;王艳红;
目的研究ERK通路抑制剂U0126对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,并探讨其调控机制。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB231,将细胞分组干预,MTT法检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡; Western blot检测细胞中p-ERK/ERK、cyclin D1、survivin及cleaved caspase-3蛋白表达。结果MTT结果显示,U0126干预24、48 h后,MCF-7、MDA-MB231细胞抑制率明显增加(P <0. 01); MCF-7、MDA-MB231细胞经U0126干预24 h后,检测细胞周期及细胞凋亡,G_0/G_1期细胞比例较对照组明显增加,S及G_2期细胞比例下降(P <0. 05);而干预组细胞凋亡率较未干预组明显增多(P <0. 01); U0126处理人乳腺癌细胞2 h后,可阻断ERK的磷酸化,减少cyclin D1的蛋白表达,抑制survivin而上调cleaved caspase-3的表达,与对照组相比差异有显著性(P <0. 01)。结论 U0126通过阻断MCF-7、MDA-MB231细胞中ERK信号通路,调控cyclin D1,将细胞周期阻断在G_0/G_1期,抑制survivin而增加cleaved caspase-3表达,增加细胞凋亡,继而使乳腺癌细胞MDA-MB231、MCF-7的增殖受到抑制。
2019年08期 v.35 1061-1066页 [查看摘要][在线阅读][下载 250K] [下载次数：357 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：14 ] |[阅读次数：1 ] - 田继华;常思佳;郭海秀;冀贺;王艳红;
目的研究ERK通路抑制剂U0126对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,并探讨其调控机制。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB231,将细胞分组干预,MTT法检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡; Western blot检测细胞中p-ERK/ERK、cyclin D1、survivin及cleaved caspase-3蛋白表达。结果MTT结果显示,U0126干预24、48 h后,MCF-7、MDA-MB231细胞抑制率明显增加(P <0. 01); MCF-7、MDA-MB231细胞经U0126干预24 h后,检测细胞周期及细胞凋亡,G_0/G_1期细胞比例较对照组明显增加,S及G_2期细胞比例下降(P <0. 05);而干预组细胞凋亡率较未干预组明显增多(P <0. 01); U0126处理人乳腺癌细胞2 h后,可阻断ERK的磷酸化,减少cyclin D1的蛋白表达,抑制survivin而上调cleaved caspase-3的表达,与对照组相比差异有显著性(P <0. 01)。结论 U0126通过阻断MCF-7、MDA-MB231细胞中ERK信号通路,调控cyclin D1,将细胞周期阻断在G_0/G_1期,抑制survivin而增加cleaved caspase-3表达,增加细胞凋亡,继而使乳腺癌细胞MDA-MB231、MCF-7的增殖受到抑制。
2019年08期 v.35 1061-1066页 [查看摘要][在线阅读][下载 250K] [下载次数：357 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：14 ] |[阅读次数：1 ] - 戴琪;黎思彤;陈健文;谭飞;郑志华;张志军;刘培庆;李民;
目的研究乌司他丁(ulinastatin,UTI)对术后肠梗阻(postoperative ileus,POI)模型SD大鼠的作用,以及对肠道屏障功能的影响。方法在SD大鼠腹腔手术前、手术后及围术期分3种剂量给予UTI。术后48 h伊文氏蓝经口灌胃,30 min后解剖检测胃肠推进率;用回肠末端HE和AB/PAS染色切片,观察小肠绒毛和统计杯状细胞数量; D-乳酸和内毒素试剂盒评估肠通透性;提取肠组织c DNA进行q PCR,检测炎症因子及肠道屏障相关的mRNA水平。结果 POI模型组SD大鼠胃肠推进率下降,小肠绒毛结构严重破坏,D-乳酸和内毒素水平及炎症因子mRNA水平升高,隐窝处杯状细胞数量增高,黏蛋白2(mucin 2,MUC2)、黏蛋白3(mucin 3,MUC3) mRNA水平上升,人防御素5 (human defensing 5,HD5) mRNA水平下降。UTI中剂量预处理能明显逆转上述情况。结论 UTI中剂量预处理有效降低POI大鼠肠道炎症水平,恢复部分肠道屏障功能,从而预防和治疗POI造成的胃肠推进率的下降。
2019年08期 v.35 1066-1072页 [查看摘要][在线阅读][下载 589K] [下载次数：418 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 戴琪;黎思彤;陈健文;谭飞;郑志华;张志军;刘培庆;李民;
目的研究乌司他丁(ulinastatin,UTI)对术后肠梗阻(postoperative ileus,POI)模型SD大鼠的作用,以及对肠道屏障功能的影响。方法在SD大鼠腹腔手术前、手术后及围术期分3种剂量给予UTI。术后48 h伊文氏蓝经口灌胃,30 min后解剖检测胃肠推进率;用回肠末端HE和AB/PAS染色切片,观察小肠绒毛和统计杯状细胞数量; D-乳酸和内毒素试剂盒评估肠通透性;提取肠组织c DNA进行q PCR,检测炎症因子及肠道屏障相关的mRNA水平。结果 POI模型组SD大鼠胃肠推进率下降,小肠绒毛结构严重破坏,D-乳酸和内毒素水平及炎症因子mRNA水平升高,隐窝处杯状细胞数量增高,黏蛋白2(mucin 2,MUC2)、黏蛋白3(mucin 3,MUC3) mRNA水平上升,人防御素5 (human defensing 5,HD5) mRNA水平下降。UTI中剂量预处理能明显逆转上述情况。结论 UTI中剂量预处理有效降低POI大鼠肠道炎症水平,恢复部分肠道屏障功能,从而预防和治疗POI造成的胃肠推进率的下降。
2019年08期 v.35 1066-1072页 [查看摘要][在线阅读][下载 589K] [下载次数：418 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 吴飞翔;陈俞翰;李邵琦;王举;林岩;王俊莹;张昊;于雪;赵雅君;
目的探讨增龄大鼠心脏多胺代谢与自噬的变化规律,以及精脒对衰老心脏自噬的影响。方法 Westen blot法检测3、6、12、24月龄大鼠心肌多胺合成与分解代谢限速酶ODC与SSAT表达,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ与p62的表达;检测3、24月龄及给予精脒6周的24月龄大鼠心肌ATG5、ATG7、p16表达。观察心肌自噬小体形成、计算细胞横截面积及细胞凋亡率、检测活性氧(ROS)产生。结果随年龄增加,心肌ODC与LC3-Ⅱ/Ⅰ表达降低,SSAT与p62表达增加。24月龄大鼠心肌p16表达增加,细胞横截面积增大,细胞凋亡及ROS产生增多,自噬小体减少,p62表达增加,LC3-Ⅱ/Ⅰ、ATG5和ATG7表达降低。精脒干预后能明显抑制衰老诱导的以上指标的改变。结论随着年龄增加,大鼠心肌多胺合成代谢下调,分解代谢上调,细胞自噬能力下降。外源性精脒可能通过诱导心肌细胞自噬延缓大鼠心脏老化。
2019年08期 v.35 1073-1079页 [查看摘要][在线阅读][下载 374K] [下载次数：391 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：2 ] - 吴飞翔;陈俞翰;李邵琦;王举;林岩;王俊莹;张昊;于雪;赵雅君;
目的探讨增龄大鼠心脏多胺代谢与自噬的变化规律,以及精脒对衰老心脏自噬的影响。方法 Westen blot法检测3、6、12、24月龄大鼠心肌多胺合成与分解代谢限速酶ODC与SSAT表达,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ与p62的表达;检测3、24月龄及给予精脒6周的24月龄大鼠心肌ATG5、ATG7、p16表达。观察心肌自噬小体形成、计算细胞横截面积及细胞凋亡率、检测活性氧(ROS)产生。结果随年龄增加,心肌ODC与LC3-Ⅱ/Ⅰ表达降低,SSAT与p62表达增加。24月龄大鼠心肌p16表达增加,细胞横截面积增大,细胞凋亡及ROS产生增多,自噬小体减少,p62表达增加,LC3-Ⅱ/Ⅰ、ATG5和ATG7表达降低。精脒干预后能明显抑制衰老诱导的以上指标的改变。结论随着年龄增加,大鼠心肌多胺合成代谢下调,分解代谢上调,细胞自噬能力下降。外源性精脒可能通过诱导心肌细胞自噬延缓大鼠心脏老化。
2019年08期 v.35 1073-1079页 [查看摘要][在线阅读][下载 374K] [下载次数：391 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 胡露;李洪忠;万敬员;
目的探讨DERL1 (Der1-like domain family,member1)对人乳腺癌细胞ZR-75-1迁移和侵袭的影响及其相关机制。方法将DERL1过表达或干扰质粒转入人乳腺癌ZR-75-1细胞中,实时荧光定量PCR检测DERL1 mRNA的表达;划痕愈合实验和Transwell实验分别检测DERL1对ZR-75-1迁移和侵袭能力的影响;实时荧光定量PCR和细胞免疫荧光分别检测ZR-75-1中E-cadherin mRNA和蛋白的表达情况。结果DERL1过表达质粒转染48 h后,细胞中DERL1表达水平较对照组明显上升(P <0. 01),同时细胞的迁移和侵袭能力均明显增强(P <0. 05),细胞形态由鹅卵石形上皮样转化为纺锤形间质样,且细胞中E-cadherin mRNA和蛋白水平明显降低(P <0. 05); DERL1干扰组细胞转染48 h后,与对照组相比,DERL1表达水平明显降低(P <0. 01),同时细胞的迁移和侵袭能力明显减弱(P <0. 05),细胞形态由纺锤形间质样转变回鹅卵石形上皮样,且细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达量明显升高(P <0. 05)。结论DERL1可促进人乳腺癌细胞ZR-75-1的迁移和侵袭,可能与其下调E-cadherin水平,促进ZR-75-1的上皮间质转化有关。
2019年08期 v.35 1079-1083页 [查看摘要][在线阅读][下载 291K] [下载次数：263 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：1 ] - 胡露;李洪忠;万敬员;
目的探讨DERL1 (Der1-like domain family,member1)对人乳腺癌细胞ZR-75-1迁移和侵袭的影响及其相关机制。方法将DERL1过表达或干扰质粒转入人乳腺癌ZR-75-1细胞中,实时荧光定量PCR检测DERL1 mRNA的表达;划痕愈合实验和Transwell实验分别检测DERL1对ZR-75-1迁移和侵袭能力的影响;实时荧光定量PCR和细胞免疫荧光分别检测ZR-75-1中E-cadherin mRNA和蛋白的表达情况。结果DERL1过表达质粒转染48 h后,细胞中DERL1表达水平较对照组明显上升(P <0. 01),同时细胞的迁移和侵袭能力均明显增强(P <0. 05),细胞形态由鹅卵石形上皮样转化为纺锤形间质样,且细胞中E-cadherin mRNA和蛋白水平明显降低(P <0. 05); DERL1干扰组细胞转染48 h后,与对照组相比,DERL1表达水平明显降低(P <0. 01),同时细胞的迁移和侵袭能力明显减弱(P <0. 05),细胞形态由纺锤形间质样转变回鹅卵石形上皮样,且细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达量明显升高(P <0. 05)。结论DERL1可促进人乳腺癌细胞ZR-75-1的迁移和侵袭,可能与其下调E-cadherin水平,促进ZR-75-1的上皮间质转化有关。
2019年08期 v.35 1079-1083页 [查看摘要][在线阅读][下载 291K] [下载次数：263 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：1 ] - 房志锐;陈璐;李春晓;宋敏;张璐莎;Joel Wake Coffie;张丽媛;马璐璐;王虹;
目的研究芍药苷(paeoniflorin,PA)对糖尿病创面愈合作用及作用机制。方法采用糖尿病小鼠全层皮肤切除夹板模型,HE染色及Masson染色观察创面组织形态改变;免疫荧光法检测血管新生。PA干预人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)和小鼠成纤维细胞(fibroblast,FB),MTS、Brd U和划痕实验检测细胞增殖和迁移能力; Matrigel实验检测HUVECs成管能力,q PCR检测FB中CollagenⅢ、Fibronectin、α-SMA mRNA的变化;免疫荧光法观察α-SMA在FB中的表达部位及表达量的变化。结果与db/db模型组相比,PA组创面肉芽组织,胶原形成和新生毛细血管密度明显增加(P <0. 01)。PA对HUVECs增殖无影响,可明显促进HUVECs迁移和成管的能力(P <0. 05,P <0. 01)。PA可明显增加FB增殖和迁移的能力,明显增加CollagenⅢ、α-SMA mRNA的表达(P <0. 05,P <0. 01),对Fibronectin mRNA的表达无影响,同时可增加α-SMA的荧光强度。结论芍药苷可能通过促进细胞外基质生成和血管新生,促进糖尿病创面愈合。
2019年08期 v.35 1084-1091页 [查看摘要][在线阅读][下载 561K] [下载次数：654 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：35 ] |[阅读次数：1 ] - 房志锐;陈璐;李春晓;宋敏;张璐莎;Joel Wake Coffie;张丽媛;马璐璐;王虹;
目的研究芍药苷(paeoniflorin,PA)对糖尿病创面愈合作用及作用机制。方法采用糖尿病小鼠全层皮肤切除夹板模型,HE染色及Masson染色观察创面组织形态改变;免疫荧光法检测血管新生。PA干预人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)和小鼠成纤维细胞(fibroblast,FB),MTS、Brd U和划痕实验检测细胞增殖和迁移能力; Matrigel实验检测HUVECs成管能力,q PCR检测FB中CollagenⅢ、Fibronectin、α-SMA mRNA的变化;免疫荧光法观察α-SMA在FB中的表达部位及表达量的变化。结果与db/db模型组相比,PA组创面肉芽组织,胶原形成和新生毛细血管密度明显增加(P <0. 01)。PA对HUVECs增殖无影响,可明显促进HUVECs迁移和成管的能力(P <0. 05,P <0. 01)。PA可明显增加FB增殖和迁移的能力,明显增加CollagenⅢ、α-SMA mRNA的表达(P <0. 05,P <0. 01),对Fibronectin mRNA的表达无影响,同时可增加α-SMA的荧光强度。结论芍药苷可能通过促进细胞外基质生成和血管新生,促进糖尿病创面愈合。
2019年08期 v.35 1084-1091页 [查看摘要][在线阅读][下载 561K] [下载次数：654 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：35 ] |[阅读次数：1 ] - 郭珮;李静;冉建华;陈地龙;何菲;吕晓婷;石雪萍;李海星;
目的研究注射用核糖核酸Ⅱ诱导人急性骨髓白血病细胞系KG1a细胞凋亡与PI3K/Akt信号通路和活性氧(ROS)的关系。方法流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞内的ROS水平;免疫印迹法(Western blot)检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt、p-MDM2、p21和周期相关蛋白cyclin D1、CDK4的表达;加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)后,检测p-PI3K、p-Akt和p53蛋白表达变化。结果 FCM结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ可将KG1a细胞阻滞在G0/G1期,且ROS介导了细胞周期的阻滞; FCM检测ROS结果显示,KG1a细胞内ROS水平均随药物浓度增加而升高; Western blot结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ下调pPI3K、p-Akt、p-MDM2和cyclin D1、CDK4的表达,上调p21的表达;与仅用注射用核糖核酸Ⅱ相比,经NAC预处理后再使用注射用核糖核酸Ⅱ,明显上调了磷酸化PI3K和Akt的表达,下调了p53的表达。结论注射用核糖核酸Ⅱ通过ROS介导的PI3K/Akt信号通路,诱导人急性骨髓白血病细胞系KG1a细胞凋亡。
2019年08期 v.35 1092-1098页 [查看摘要][在线阅读][下载 330K] [下载次数：291 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：2 ] - 郭珮;李静;冉建华;陈地龙;何菲;吕晓婷;石雪萍;李海星;
目的研究注射用核糖核酸Ⅱ诱导人急性骨髓白血病细胞系KG1a细胞凋亡与PI3K/Akt信号通路和活性氧(ROS)的关系。方法流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞内的ROS水平;免疫印迹法(Western blot)检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt、p-MDM2、p21和周期相关蛋白cyclin D1、CDK4的表达;加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)后,检测p-PI3K、p-Akt和p53蛋白表达变化。结果 FCM结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ可将KG1a细胞阻滞在G0/G1期,且ROS介导了细胞周期的阻滞; FCM检测ROS结果显示,KG1a细胞内ROS水平均随药物浓度增加而升高; Western blot结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ下调pPI3K、p-Akt、p-MDM2和cyclin D1、CDK4的表达,上调p21的表达;与仅用注射用核糖核酸Ⅱ相比,经NAC预处理后再使用注射用核糖核酸Ⅱ,明显上调了磷酸化PI3K和Akt的表达,下调了p53的表达。结论注射用核糖核酸Ⅱ通过ROS介导的PI3K/Akt信号通路,诱导人急性骨髓白血病细胞系KG1a细胞凋亡。
2019年08期 v.35 1092-1098页 [查看摘要][在线阅读][下载 330K] [下载次数：291 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：1 ] - 汤兆奇;王克生;徐宏彬;
目的探讨没药甾酮增强替莫唑胺抗人脑胶质瘤细胞增殖的作用及机制。方法分别用CCK-8、Hoechst 33342染色和流式细胞术、Western blot检测没药甾酮、替莫唑胺单药及联合对人脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡、PI3K/Akt通路活性,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达影响。结果与替莫唑胺(1～400μmol·L~(-1))单药组相比,没药甾酮(30μmol·L~(-1))联合替莫唑胺(1～400μmol·L~(-1))明显增强对人脑胶质瘤U251细胞的抗增殖作用;与替莫唑胺(400μmol·L~(-1))单药组相比,没药甾酮(30μmol·L~(-1))联合替莫唑胺(400μmol·L~(-1))明显增强对人脑胶质瘤U251细胞的凋亡诱导作用(P <0. 01);与替莫唑胺(400μmol·L~(-1))单药组相比,没药甾酮(30μmol·L~(-1))联合替莫唑胺(400μmol·L~(-1))明显下调PI3K、p-PI3K p110、p-Akt(Ser473)和Bcl-2的表达。结论没药甾酮可通过下调PI3K/Akt通路,增强替莫唑胺对人脑胶质瘤细胞U251的增殖抑制作用。
2019年08期 v.35 1098-1103页 [查看摘要][在线阅读][下载 355K] [下载次数：383 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：16 ] |[阅读次数：1 ] - 汤兆奇;王克生;徐宏彬;
目的探讨没药甾酮增强替莫唑胺抗人脑胶质瘤细胞增殖的作用及机制。方法分别用CCK-8、Hoechst 33342染色和流式细胞术、Western blot检测没药甾酮、替莫唑胺单药及联合对人脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡、PI3K/Akt通路活性,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达影响。结果与替莫唑胺(1～400μmol·L~(-1))单药组相比,没药甾酮(30μmol·L~(-1))联合替莫唑胺(1～400μmol·L~(-1))明显增强对人脑胶质瘤U251细胞的抗增殖作用;与替莫唑胺(400μmol·L~(-1))单药组相比,没药甾酮(30μmol·L~(-1))联合替莫唑胺(400μmol·L~(-1))明显增强对人脑胶质瘤U251细胞的凋亡诱导作用(P <0. 01);与替莫唑胺(400μmol·L~(-1))单药组相比,没药甾酮(30μmol·L~(-1))联合替莫唑胺(400μmol·L~(-1))明显下调PI3K、p-PI3K p110、p-Akt(Ser473)和Bcl-2的表达。结论没药甾酮可通过下调PI3K/Akt通路,增强替莫唑胺对人脑胶质瘤细胞U251的增殖抑制作用。
2019年08期 v.35 1098-1103页 [查看摘要][在线阅读][下载 355K] [下载次数：383 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：16 ] |[阅读次数：2 ] - 邱晓霞;李逸朗;梁关凤;张贵平;罗健东;袁文常;侯宁;
目的探讨Wnt/β-catenin/TCF7L2信号通路在1型糖尿病小鼠心肌病中的作用。方法利用7～8周龄♂C57BL/6小鼠腹腔注射链脲佐菌素,建立1型糖尿病模型,糖尿病小鼠成模4周后,随机分为糖尿病组、β-catenin通路抑制剂i CRT14(2. 5、5 mg·kg~(-1))组。连续腹腔给药8周后,HE染色检测心脏细胞形态;免疫组化及Western blot检测β-catenin、TCF7L2蛋白表达;荧光定量PCR检测β-catenin、Tcf7l2、Nppa、c-Myc mRNA表达。结果糖尿病组心肌细胞排列相对紊乱、细胞核大小不规则; Western blot和免疫组化结果显示,糖尿病组小鼠心脏β-catenin、TCF7L2表达升高,心肌细胞核内β-catenin、TCF7L2表达明显增多; q PCR显示,β-catenin/TCF7L2通路下游基因c-Myc、心肌肥大基因Nppa表达上调。i CRT14组小鼠心肌细胞排列相对规则,形态趋于正常;β-catenin、TCF7L2蛋白表达降低,核内表达减少;肥大基因Nppa、下游基因c-Myc mRNA表达明显减低。结论 Wnt/β-catenin/TCF7L2通路活化在糖尿病心肌病发生、发展中发挥重要作用,β-catenin抑制剂能明显减缓1型糖尿病小鼠心肌病的进程。
2019年08期 v.35 1104-1109页 [查看摘要][在线阅读][下载 350K] [下载次数：690 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：23 ] |[阅读次数：2 ] - 邱晓霞;李逸朗;梁关凤;张贵平;罗健东;袁文常;侯宁;
目的探讨Wnt/β-catenin/TCF7L2信号通路在1型糖尿病小鼠心肌病中的作用。方法利用7～8周龄♂C57BL/6小鼠腹腔注射链脲佐菌素,建立1型糖尿病模型,糖尿病小鼠成模4周后,随机分为糖尿病组、β-catenin通路抑制剂i CRT14(2. 5、5 mg·kg~(-1))组。连续腹腔给药8周后,HE染色检测心脏细胞形态;免疫组化及Western blot检测β-catenin、TCF7L2蛋白表达;荧光定量PCR检测β-catenin、Tcf7l2、Nppa、c-Myc mRNA表达。结果糖尿病组心肌细胞排列相对紊乱、细胞核大小不规则; Western blot和免疫组化结果显示,糖尿病组小鼠心脏β-catenin、TCF7L2表达升高,心肌细胞核内β-catenin、TCF7L2表达明显增多; q PCR显示,β-catenin/TCF7L2通路下游基因c-Myc、心肌肥大基因Nppa表达上调。i CRT14组小鼠心肌细胞排列相对规则,形态趋于正常;β-catenin、TCF7L2蛋白表达降低,核内表达减少;肥大基因Nppa、下游基因c-Myc mRNA表达明显减低。结论 Wnt/β-catenin/TCF7L2通路活化在糖尿病心肌病发生、发展中发挥重要作用,β-catenin抑制剂能明显减缓1型糖尿病小鼠心肌病的进程。
2019年08期 v.35 1104-1109页 [查看摘要][在线阅读][下载 350K] [下载次数：690 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：23 ] |[阅读次数：1 ] - 陈彦洁;柳传毅;吕满霞;方琼彤;吴新荣;
目的探究鱼藤素是否能够阻滞细胞周期和细胞迁移,抑制非小细胞肺癌细胞的增殖。方法鱼藤素(1. 5625、3. 125、6. 25、12. 5、25、50μmol·L~(-1))处理H1299细胞不同时间后,CCK-8法检测细胞存活率,划痕实验测定划痕宽度及愈合率;鱼藤素(1. 5、3、6μmol·L~(-1))处理24 h,PI单染测定细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染检测凋亡率,q PCR检测药物处理后的H1299细胞中CDK4、CDK6和CCND1的基因表达情况。结果鱼藤素能够降低H1299细胞的存活率,作用24、48、72 h的IC50值分别为(5. 47±0. 97)、(4. 01±0. 45)、(2. 86±0. 19)μmol·L~(-1),并抑制细胞的迁移与愈合能力。PI单染流式细胞术检测到其能阻滞细胞周期,使细胞阻滞在G0/G1期,流式双染实验测得其可诱导细胞的凋亡,q PCR发现鱼藤素可下调CDK4、CDK6和CCND1的基因表达。结论鱼藤素可抑制H1299细胞的增殖,抑制细胞的运动迁移能力,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,且鱼藤素可通过下调细胞周期调控系统中的CDK4、CDK6、CCND1基因表达来调控细胞周期,达到抗肿瘤作用。
2019年08期 v.35 1109-1114页 [查看摘要][在线阅读][下载 388K] [下载次数：507 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：23 ] |[阅读次数：1 ] - 陈彦洁;柳传毅;吕满霞;方琼彤;吴新荣;
目的探究鱼藤素是否能够阻滞细胞周期和细胞迁移,抑制非小细胞肺癌细胞的增殖。方法鱼藤素(1. 5625、3. 125、6. 25、12. 5、25、50μmol·L~(-1))处理H1299细胞不同时间后,CCK-8法检测细胞存活率,划痕实验测定划痕宽度及愈合率;鱼藤素(1. 5、3、6μmol·L~(-1))处理24 h,PI单染测定细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染检测凋亡率,q PCR检测药物处理后的H1299细胞中CDK4、CDK6和CCND1的基因表达情况。结果鱼藤素能够降低H1299细胞的存活率,作用24、48、72 h的IC50值分别为(5. 47±0. 97)、(4. 01±0. 45)、(2. 86±0. 19)μmol·L~(-1),并抑制细胞的迁移与愈合能力。PI单染流式细胞术检测到其能阻滞细胞周期,使细胞阻滞在G0/G1期,流式双染实验测得其可诱导细胞的凋亡,q PCR发现鱼藤素可下调CDK4、CDK6和CCND1的基因表达。结论鱼藤素可抑制H1299细胞的增殖,抑制细胞的运动迁移能力,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,且鱼藤素可通过下调细胞周期调控系统中的CDK4、CDK6、CCND1基因表达来调控细胞周期,达到抗肿瘤作用。
2019年08期 v.35 1109-1114页 [查看摘要][在线阅读][下载 388K] [下载次数：507 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：23 ] |[阅读次数：1 ] - 赵林波;隋念含;蒙国懿;洪仕君;李利华;邢豫明;赵永娜;
目的通过建立大鼠甲基苯丙胺(METH)依赖条件位置偏爱模型(CPP),研究脑纹状体内G蛋白信号调节因子4(RGS4)过表达引起的代谢型谷氨酸受体5(m GluR5)信号传导通路相关蛋白表达变化,以及对大鼠CPP行为的影响。方法将大鼠随机分为正常组、生理盐水(NS)组、METH组、Ad5-RGS4-EGFP组、Ad5-EGFP组。正常组不做处理,其余各组脑纹状体分别立体定位注射磷酸盐缓冲液(PBS)、PBS、过表达腺病毒载体Ad5-RGS4-EGFP和阴性对照腺病毒载体Ad5-EGFP,分析各组大鼠CPP行为,Western blot检测脑纹状体内RGS4、m GluR5、Gαq、PLCβ1等蛋白的表达。结果Ad5-RGS4-EGFP组CPP差值低于METH组和Ad5-EGFP组(P <0. 05),高于NS组(P <0. 05)。Ad5-RGS4-EGFP组RGS4蛋白表达均不同程度高于其余4组(P <0. 05,P <0. 01),m GluR5、Gαq表达低于METH组和Ad5-EGFP组(P<0. 05),略高于正常组和NS组(P> 0. 05),PLCβ1表达略有变化,但差异无显著性。结论纹状体内RGS4过表达可明显缓解METH成瘾性大鼠CPP行为,机制可能与RGS4过表达后,负性调控m GluR5介导的Gαq及PLCβ1信号传导通路相关。
2019年08期 v.35 1115-1120页 [查看摘要][在线阅读][下载 199K] [下载次数：228 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 赵林波;隋念含;蒙国懿;洪仕君;李利华;邢豫明;赵永娜;
目的通过建立大鼠甲基苯丙胺(METH)依赖条件位置偏爱模型(CPP),研究脑纹状体内G蛋白信号调节因子4(RGS4)过表达引起的代谢型谷氨酸受体5(m GluR5)信号传导通路相关蛋白表达变化,以及对大鼠CPP行为的影响。方法将大鼠随机分为正常组、生理盐水(NS)组、METH组、Ad5-RGS4-EGFP组、Ad5-EGFP组。正常组不做处理,其余各组脑纹状体分别立体定位注射磷酸盐缓冲液(PBS)、PBS、过表达腺病毒载体Ad5-RGS4-EGFP和阴性对照腺病毒载体Ad5-EGFP,分析各组大鼠CPP行为,Western blot检测脑纹状体内RGS4、m GluR5、Gαq、PLCβ1等蛋白的表达。结果Ad5-RGS4-EGFP组CPP差值低于METH组和Ad5-EGFP组(P <0. 05),高于NS组(P <0. 05)。Ad5-RGS4-EGFP组RGS4蛋白表达均不同程度高于其余4组(P <0. 05,P <0. 01),m GluR5、Gαq表达低于METH组和Ad5-EGFP组(P<0. 05),略高于正常组和NS组(P> 0. 05),PLCβ1表达略有变化,但差异无显著性。结论纹状体内RGS4过表达可明显缓解METH成瘾性大鼠CPP行为,机制可能与RGS4过表达后,负性调控m GluR5介导的Gαq及PLCβ1信号传导通路相关。
2019年08期 v.35 1115-1120页 [查看摘要][在线阅读][下载 199K] [下载次数：228 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 王石;周大臣;崔笑;张彬;侯辉;耿小平;
目的研究EIF4A1的表达与肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的相关性,以及七叶皂苷钠抑制肝癌细胞系增殖的潜在机制。方法应用免疫组化检测80例HCC患者的肿瘤标本中EIF4A1的表达水平,并结合临床指标和随访信息分析其相关性; Annexin V-FITC/PI双染标记法检测七叶皂苷钠对肝癌细胞Hep G2及人肝细胞L02两种细胞系凋亡的影响; Transwell迁移实验检测七叶皂苷钠对两种细胞系迁移能力的影响; Western blot、q PCR、细胞免疫荧光检测七叶皂苷钠处理两种细胞系后EIF4A1的表达变化。结果肝癌组织中EIF4A1表达量明显增高,且EIF4A1的表达与患者的肿瘤分化程度、肿瘤直径及生存期存在相关性。七叶皂苷钠(40μmol·L~(-1))可明显促进肝癌细胞系凋亡,并抑制其迁移能力,但对于正常肝细胞系无影响。七叶皂苷钠抑制肝癌细胞系生长增殖的同时,下调肝癌细胞系EIF4A1的表达。结论 EIF4A1的表达与HCC的发展呈相关性,七叶皂苷钠可能通过影响EIF4A1的表达,抑制肝癌细胞系的生长增殖。
2019年08期 v.35 1120-1125页 [查看摘要][在线阅读][下载 375K] [下载次数：289 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：15 ] |[阅读次数：1 ] - 王石;周大臣;崔笑;张彬;侯辉;耿小平;
目的研究EIF4A1的表达与肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的相关性,以及七叶皂苷钠抑制肝癌细胞系增殖的潜在机制。方法应用免疫组化检测80例HCC患者的肿瘤标本中EIF4A1的表达水平,并结合临床指标和随访信息分析其相关性; Annexin V-FITC/PI双染标记法检测七叶皂苷钠对肝癌细胞Hep G2及人肝细胞L02两种细胞系凋亡的影响; Transwell迁移实验检测七叶皂苷钠对两种细胞系迁移能力的影响; Western blot、q PCR、细胞免疫荧光检测七叶皂苷钠处理两种细胞系后EIF4A1的表达变化。结果肝癌组织中EIF4A1表达量明显增高,且EIF4A1的表达与患者的肿瘤分化程度、肿瘤直径及生存期存在相关性。七叶皂苷钠(40μmol·L~(-1))可明显促进肝癌细胞系凋亡,并抑制其迁移能力,但对于正常肝细胞系无影响。七叶皂苷钠抑制肝癌细胞系生长增殖的同时,下调肝癌细胞系EIF4A1的表达。结论 EIF4A1的表达与HCC的发展呈相关性,七叶皂苷钠可能通过影响EIF4A1的表达,抑制肝癌细胞系的生长增殖。
2019年08期 v.35 1120-1125页 [查看摘要][在线阅读][下载 375K] [下载次数：289 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：15 ] |[阅读次数：1 ] - 张紫文;李晨晨;潘瑞乐;孙乐;杨润梅;陈爱兵;高南南;
目的应用非标记定量(label-free)蛋白质组学技术,探究粗壮女贞总苷(LRTPG)的调脂机制。方法从高脂血症模型组和LRTPG给药组金黄地鼠肝脏中提取总蛋白,进行label-free蛋白质组学研究。结果蛋白质组学研究共鉴定出2 231个蛋白质,模型组与LRTPG组共549个差异表达蛋白,其中93种蛋白上调,59种蛋白下调,397种蛋白只在模型组或者给药组中有定量值。GO分析表明,这些差异表达蛋白主要参与代谢、转运、氧化还原、磷酸化、信号转导、脂质代谢等生物学过程。KEGG通路分析表明,这些蛋白集中于氧化磷酸化、非酒精性脂肪肝病、PI3K-Akt、c AMP、c GMPPKG等多条信号通路。一些差异蛋白与脂质代谢密切相关,包括CD36、PK、HSS、GCK、Apo A I、Acly、FABP5等。结论LRTPG调脂作用可能与CD36、PK、HSS、GCK、Apo A I、Acly、FABP5有关。
2019年08期 v.35 1126-1133页 [查看摘要][在线阅读][下载 362K] [下载次数：559 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：11 ] |[阅读次数：1 ] - 张紫文;李晨晨;潘瑞乐;孙乐;杨润梅;陈爱兵;高南南;
目的应用非标记定量(label-free)蛋白质组学技术,探究粗壮女贞总苷(LRTPG)的调脂机制。方法从高脂血症模型组和LRTPG给药组金黄地鼠肝脏中提取总蛋白,进行label-free蛋白质组学研究。结果蛋白质组学研究共鉴定出2 231个蛋白质,模型组与LRTPG组共549个差异表达蛋白,其中93种蛋白上调,59种蛋白下调,397种蛋白只在模型组或者给药组中有定量值。GO分析表明,这些差异表达蛋白主要参与代谢、转运、氧化还原、磷酸化、信号转导、脂质代谢等生物学过程。KEGG通路分析表明,这些蛋白集中于氧化磷酸化、非酒精性脂肪肝病、PI3K-Akt、c AMP、c GMPPKG等多条信号通路。一些差异蛋白与脂质代谢密切相关,包括CD36、PK、HSS、GCK、Apo A I、Acly、FABP5等。结论LRTPG调脂作用可能与CD36、PK、HSS、GCK、Apo A I、Acly、FABP5有关。
2019年08期 v.35 1126-1133页 [查看摘要][在线阅读][下载 362K] [下载次数：559 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：11 ] |[阅读次数：1 ] - 阿米拉·阿不拉提;张楠楠;古丽拜克热木·热合曼;范雪梅;毛新民;姚蓝;
目的研究马里苷介导AMPK信号通路,延缓糖尿病肾病(DN)氧化应激、炎症损伤,抑制纤维蛋白表达的作用。方法高糖软脂酸诱导大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)建立体外DN模型,将细胞分为:正常对照组(NG)、模型组(葡萄糖100 mmol·L~(-1)+软脂酸250μmol·L~(-1),HG+PA)、马里苷不同剂量组(25、50、100、200μmol·L~(-1))。采用MTS法检测马里苷对HBZY-1细胞增殖的影响,从中筛选最适给药浓度; Western blot法检测各组细胞中NOX4、MCP-1、TGF-β1、FN、α-SMA、CollagenⅥ,以及AMPK蛋白家族中AMPKγ1、p-AMPKα的表达水平。结果马里苷抑制高糖软脂酸诱导的HBZY-1细胞增殖;下调模型细胞中NOX4、TGF-β1、MCP-1、α-SMA、FN及CollagenⅥ的表达;上调p-AMPKα及AMPKγ1的表达。结论马里苷可能通过活化AMPKγ1,激活AMPK信号通路,抑制HBZY-1细胞氧化应激、炎症反应与纤维化蛋白的表达,延缓DN肾脏损伤。
2019年08期 v.35 1133-1137页 [查看摘要][在线阅读][下载 204K] [下载次数：525 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：1 ] - 阿米拉·阿不拉提;张楠楠;古丽拜克热木·热合曼;范雪梅;毛新民;姚蓝;
目的研究马里苷介导AMPK信号通路,延缓糖尿病肾病(DN)氧化应激、炎症损伤,抑制纤维蛋白表达的作用。方法高糖软脂酸诱导大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)建立体外DN模型,将细胞分为:正常对照组(NG)、模型组(葡萄糖100 mmol·L~(-1)+软脂酸250μmol·L~(-1),HG+PA)、马里苷不同剂量组(25、50、100、200μmol·L~(-1))。采用MTS法检测马里苷对HBZY-1细胞增殖的影响,从中筛选最适给药浓度; Western blot法检测各组细胞中NOX4、MCP-1、TGF-β1、FN、α-SMA、CollagenⅥ,以及AMPK蛋白家族中AMPKγ1、p-AMPKα的表达水平。结果马里苷抑制高糖软脂酸诱导的HBZY-1细胞增殖;下调模型细胞中NOX4、TGF-β1、MCP-1、α-SMA、FN及CollagenⅥ的表达;上调p-AMPKα及AMPKγ1的表达。结论马里苷可能通过活化AMPKγ1,激活AMPK信号通路,抑制HBZY-1细胞氧化应激、炎症反应与纤维化蛋白的表达,延缓DN肾脏损伤。
2019年08期 v.35 1133-1137页 [查看摘要][在线阅读][下载 204K] [下载次数：525 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：1 ] - 李福书;朱茄慧;胡莹;廖云鹏;李沁;周娅;孙文娟;何百成;
目的探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导干细胞骨向分化与Wnt11的关系及可能的分子机制。方法通过q PCR、组织化学染色及Western blot等方法,检测成骨分化相关标志物,以及BMP/Smad和p38 MAPK信号的变化;利用荧光素酶报告质粒,检测BMP/Smad信号的活性改变。结果BMP9增加C3H10T1/2细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性、钙盐沉积、骨桥素(OPN)和Wnt11表达。Wnt11在C3H10T1/2、MEFs、MC3T3-E1和C2C12细胞中均有表达。在C3H10T1/2细胞中,Wnt11增强BMP9促进ALP活性、钙盐沉积、Runx-2和OPN表达的作用,以及BMP9对BMP/Smad报告质粒转录活性和Smad1/5/8磷酸化的促进作用;Wnt11还增强BMP9诱导p38 MAPK磷酸化的作用;抑制p38 MAPK则减弱BMP9诱导ALP活性、钙盐沉积及OPN表达的作用,但该效应能被Wnt11部分逆转。结论 BMP9在MSCs中能上调Wnt11表达。Wnt11能促进BMP9的骨向分化诱导作用,该作用可能与其增加BMP/Smad和p38 MAPK信号的活性有关。
2019年08期 v.35 1138-1144页 [查看摘要][在线阅读][下载 453K] [下载次数：200 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 李福书;朱茄慧;胡莹;廖云鹏;李沁;周娅;孙文娟;何百成;
目的探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导干细胞骨向分化与Wnt11的关系及可能的分子机制。方法通过q PCR、组织化学染色及Western blot等方法,检测成骨分化相关标志物,以及BMP/Smad和p38 MAPK信号的变化;利用荧光素酶报告质粒,检测BMP/Smad信号的活性改变。结果BMP9增加C3H10T1/2细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性、钙盐沉积、骨桥素(OPN)和Wnt11表达。Wnt11在C3H10T1/2、MEFs、MC3T3-E1和C2C12细胞中均有表达。在C3H10T1/2细胞中,Wnt11增强BMP9促进ALP活性、钙盐沉积、Runx-2和OPN表达的作用,以及BMP9对BMP/Smad报告质粒转录活性和Smad1/5/8磷酸化的促进作用;Wnt11还增强BMP9诱导p38 MAPK磷酸化的作用;抑制p38 MAPK则减弱BMP9诱导ALP活性、钙盐沉积及OPN表达的作用,但该效应能被Wnt11部分逆转。结论 BMP9在MSCs中能上调Wnt11表达。Wnt11能促进BMP9的骨向分化诱导作用,该作用可能与其增加BMP/Smad和p38 MAPK信号的活性有关。
2019年08期 v.35 1138-1144页 [查看摘要][在线阅读][下载 453K] [下载次数：200 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 杨泽霖;黄鑫;刘俊杰;唐宇恒;洪海棉;南丽红;洪桂祝;赖文芳;
目的探讨红景天苷对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞的抗炎作用及其机制。方法建立LPS诱导BV2小胶质细胞损伤模型。经不同浓度的红景天苷作用后,q PCR法检测细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA的表达; Western blot法检测Akt、p-Akt、核蛋白NF-κB p50的蛋白表达。PI3K抑制剂LY294002作用30 min,再经红景天苷作用后,检测Akt、p-Akt、核蛋白NF-κB p50、IL-6、IL-1β、TNF-α等指标。结果与模型组比较,红景天苷能够抑制BV2小胶质细胞IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA的表达,促进p-Akt蛋白表达,抑制核蛋白NF-κB p50;经LY294002作用后,红景天苷对pAkt、核蛋白NF-κB p50、IL-6、IL-1β等作用不明显。结论红景天苷能够抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应,主要是通过激活PI3K/Akt信号通路,促进Akt的磷酸化,抑制NF-κB p50核转录,进而抑制细胞因子。
2019年08期 v.35 1145-1149页 [查看摘要][在线阅读][下载 219K] [下载次数：1899 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：38 ] |[阅读次数：1 ] - 杨泽霖;黄鑫;刘俊杰;唐宇恒;洪海棉;南丽红;洪桂祝;赖文芳;
目的探讨红景天苷对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞的抗炎作用及其机制。方法建立LPS诱导BV2小胶质细胞损伤模型。经不同浓度的红景天苷作用后,q PCR法检测细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA的表达; Western blot法检测Akt、p-Akt、核蛋白NF-κB p50的蛋白表达。PI3K抑制剂LY294002作用30 min,再经红景天苷作用后,检测Akt、p-Akt、核蛋白NF-κB p50、IL-6、IL-1β、TNF-α等指标。结果与模型组比较,红景天苷能够抑制BV2小胶质细胞IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA的表达,促进p-Akt蛋白表达,抑制核蛋白NF-κB p50;经LY294002作用后,红景天苷对pAkt、核蛋白NF-κB p50、IL-6、IL-1β等作用不明显。结论红景天苷能够抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应,主要是通过激活PI3K/Akt信号通路,促进Akt的磷酸化,抑制NF-κB p50核转录,进而抑制细胞因子。
2019年08期 v.35 1145-1149页 [查看摘要][在线阅读][下载 219K] [下载次数：1899 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：38 ] |[阅读次数：1 ] - 王重阳;姜京植;李俊峰;朱莲花;金珊;金哲虎;徐畅;延光海;
目的探究隐丹参酮对哮喘小鼠气道重塑模型的治疗作用,以及其机制是否与TWEAK/Fn14和TGF-β1/Smads信号通路相关。方法选取♀BALB/c小鼠40只,分为5组(每组8只),分别为control组、OVA模型组、隐丹参酮低、高剂量组(20、40 mg·kg~(-1))、地塞米松阳性对照组(1 mg·kg-1)。HE及PAS染色法观察小鼠肺组织的炎症情况及杯状细胞变化; Diff-Quick染色法对小鼠BALF中各类细胞计数; ELISA法检测小鼠BALF中炎性及促炎细胞因子的含量; Western blot检测肺组织TWEAK、Fn14、TGF-β1、Smad2/3、Smad4表达;免疫组化法检测小鼠肺组织中TWEAK、TGF-β1的表达水平。结果隐丹参酮能减少OVA诱导的炎症细胞渗出及杯状细胞增生;隐丹参酮抑制哮喘小鼠BALF中总细胞及EOS、NEU、LYM的生成,并降低促炎细胞因子的水平; Western blot结果显示,隐丹参酮抑制TWEAK、Fn14、TGF-β1、Smad2/3、Smad4的蛋白表达;免疫组化结果显示,隐丹参酮可减少肺组织中TWEAK、TGF-β1蛋白表达。结论隐丹参酮通过TWEAK/Fn14和TGF-β1/Smads信号通路改善OVA诱导的小鼠气道炎症。
2019年08期 v.35 1149-1154页 [查看摘要][在线阅读][下载 503K] [下载次数：744 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：34 ] |[阅读次数：2 ] - 王重阳;姜京植;李俊峰;朱莲花;金珊;金哲虎;徐畅;延光海;
目的探究隐丹参酮对哮喘小鼠气道重塑模型的治疗作用,以及其机制是否与TWEAK/Fn14和TGF-β1/Smads信号通路相关。方法选取♀BALB/c小鼠40只,分为5组(每组8只),分别为control组、OVA模型组、隐丹参酮低、高剂量组(20、40 mg·kg~(-1))、地塞米松阳性对照组(1 mg·kg-1)。HE及PAS染色法观察小鼠肺组织的炎症情况及杯状细胞变化; Diff-Quick染色法对小鼠BALF中各类细胞计数; ELISA法检测小鼠BALF中炎性及促炎细胞因子的含量; Western blot检测肺组织TWEAK、Fn14、TGF-β1、Smad2/3、Smad4表达;免疫组化法检测小鼠肺组织中TWEAK、TGF-β1的表达水平。结果隐丹参酮能减少OVA诱导的炎症细胞渗出及杯状细胞增生;隐丹参酮抑制哮喘小鼠BALF中总细胞及EOS、NEU、LYM的生成,并降低促炎细胞因子的水平; Western blot结果显示,隐丹参酮抑制TWEAK、Fn14、TGF-β1、Smad2/3、Smad4的蛋白表达;免疫组化结果显示,隐丹参酮可减少肺组织中TWEAK、TGF-β1蛋白表达。结论隐丹参酮通过TWEAK/Fn14和TGF-β1/Smads信号通路改善OVA诱导的小鼠气道炎症。
2019年08期 v.35 1149-1154页 [查看摘要][在线阅读][下载 503K] [下载次数：744 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：34 ] |[阅读次数：1 ] - 孙礼宾;朱月琴;潘学胜;王亚男;陈莹瑛;陈运;刘敬浩;叶莹;胡成穆;黄艳;
目的探讨酸敏感离子通道-1a(ASIC1a)在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺组织中的表达及可能的作用。方法 SPF级♂SD大鼠32只,随机分为正常组、ALI组、阿米洛利组和阳性药物组。对动脉血进行血气分析,观察肺组织病理学,肺组织称重后计算湿干重比,ELISA检测血清中TNF-α的表达,q PCR和Western blot检测肺组织中ASIC1a的表达。结果与正常组相比,模型组肺组织损伤明显;肺组织湿干重比明显升高; TNF-α的表达水平明显升高(P <0. 01)。阿米洛利组及阳性药物组肺组织损伤明显减轻;肺组织湿干重比较模型组明显下降,TNF-α的表达水平明显降低(P <0. 01)。免疫组化、q PCR和Western blot结果显示,与正常组相比,模型组ASIC1a的表达量明显升高(P <0. 01),阿米洛利组与模型组相比,ASIC1a的表达量明显减少(P <0. 01)。结论在脂多糖诱导的ALI大鼠肺组织中ASIC1a的表达增加,其可能参与ALI的发生、发展。
2019年08期 v.35 1155-1159页 [查看摘要][在线阅读][下载 301K] [下载次数：266 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：1 ] - 孙礼宾;朱月琴;潘学胜;王亚男;陈莹瑛;陈运;刘敬浩;叶莹;胡成穆;黄艳;
目的探讨酸敏感离子通道-1a(ASIC1a)在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺组织中的表达及可能的作用。方法 SPF级♂SD大鼠32只,随机分为正常组、ALI组、阿米洛利组和阳性药物组。对动脉血进行血气分析,观察肺组织病理学,肺组织称重后计算湿干重比,ELISA检测血清中TNF-α的表达,q PCR和Western blot检测肺组织中ASIC1a的表达。结果与正常组相比,模型组肺组织损伤明显;肺组织湿干重比明显升高; TNF-α的表达水平明显升高(P <0. 01)。阿米洛利组及阳性药物组肺组织损伤明显减轻;肺组织湿干重比较模型组明显下降,TNF-α的表达水平明显降低(P <0. 01)。免疫组化、q PCR和Western blot结果显示,与正常组相比,模型组ASIC1a的表达量明显升高(P <0. 01),阿米洛利组与模型组相比,ASIC1a的表达量明显减少(P <0. 01)。结论在脂多糖诱导的ALI大鼠肺组织中ASIC1a的表达增加,其可能参与ALI的发生、发展。
2019年08期 v.35 1155-1159页 [查看摘要][在线阅读][下载 301K] [下载次数：266 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：1 ] - 王涛;林琴;刘凤婷;李晓霞;薛永志;
目的探讨在免疫性肝损伤过程中,炎性细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)对药物代谢酶细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)的调控作用及其机制。方法采用尾静脉注射BCG(125 mg·kg-1)制备免疫性肝损伤大鼠模型。HPLC法检测CYP2E1的探针药物氯唑沙宗在大鼠体内的血药浓度经时变化,反映其代谢活力;采用ELISA法检测大鼠肝组织IL-1β、TNF-α的变化;采用Western blot检测CYP2E1蛋白表达。结果大鼠尾静脉注射BCG 14 d后,可引起肝实质及汇管区周围有大量单核细胞及淋巴细胞浸润,形成大小不等且弥漫性分布的大量肉芽肿团块,IL-1β、TNF-α高表达(P <0. 01),CYP2E1代谢活力和蛋白表达明显降低(P <0. 05)。CYP2E1蛋白含量与IL-1β(r=0. 222,P=0. 027)呈负相关。采用PDTC钝化核转录因子κB(NF-κB)活化,可抑制肝组织中IL-1β、TNF-α高表达,减缓CYP2E1代谢活力和蛋白表达的下调。结论 NF-κB可能通过调控炎性细胞因子IL-1β、TNF-α,参与CYP2E1的调控。
2019年08期 v.35 1160-1164页 [查看摘要][在线阅读][下载 306K] [下载次数：608 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 王涛;林琴;刘凤婷;李晓霞;薛永志;
目的探讨在免疫性肝损伤过程中,炎性细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)对药物代谢酶细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)的调控作用及其机制。方法采用尾静脉注射BCG(125 mg·kg-1)制备免疫性肝损伤大鼠模型。HPLC法检测CYP2E1的探针药物氯唑沙宗在大鼠体内的血药浓度经时变化,反映其代谢活力;采用ELISA法检测大鼠肝组织IL-1β、TNF-α的变化;采用Western blot检测CYP2E1蛋白表达。结果大鼠尾静脉注射BCG 14 d后,可引起肝实质及汇管区周围有大量单核细胞及淋巴细胞浸润,形成大小不等且弥漫性分布的大量肉芽肿团块,IL-1β、TNF-α高表达(P <0. 01),CYP2E1代谢活力和蛋白表达明显降低(P <0. 05)。CYP2E1蛋白含量与IL-1β(r=0. 222,P=0. 027)呈负相关。采用PDTC钝化核转录因子κB(NF-κB)活化,可抑制肝组织中IL-1β、TNF-α高表达,减缓CYP2E1代谢活力和蛋白表达的下调。结论 NF-κB可能通过调控炎性细胞因子IL-1β、TNF-α,参与CYP2E1的调控。
2019年08期 v.35 1160-1164页 [查看摘要][在线阅读][下载 306K] [下载次数：608 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 孙洁;孔界男;刘超;林贞花;任香善;
目的探究NVP-BEZ235对肝癌细胞Hep G2增殖和迁移的影响及其机制。方法 NVP-BEZ235 (0、25、50、100、250、500 nmol·L-1)处理Hep G2细胞48 h后,采用MTT法检测细胞的活性;通过形态学观察和Hoechst 33342染色法,检测NVP-BEZ235对Hep G2细胞增殖、凋亡的影响;采用划痕实验、Transwell迁移实验,检测NVP-BEZ235对Hep G2细胞迁移能力的影响;免疫印迹法检测PI3K/Akt/m TOR信号通路、上皮-间质转化(EMT)以及Six1/Ezrin信号轴等标志物的表达情况;采用免疫荧光实验检测EMT相关标志物的表达情况。结果 NVP-BEZ235可明显抑制HepG2细胞的增殖,且呈浓度依赖性;NVP-BEZ235可诱导HepG2细胞发生凋亡;NVP-BEZ235可抑制HepG2细胞的迁移能力。在NVP-BEZ235的作用下,p-Akt~(Ser473)、p-S6~(Thr389)、p-4E-BP1~(Thr37/46)的表达下调,上皮标志物E-cacdherin表达上调,间质标志物Vimentin、Snail表达下调,Six1和p-Ezrin~(Tyr353)表达下调。结论NVP-BEZ235可有效抑制HepG2细胞的增殖和迁移,其机制可能与NVP-BEZ235降低p-Akt~(Ser473)、p-S6~(Thr389)、p-4EBP1~(Thr37/46)的表达,抑制Six1/Ezrin信号轴及逆转EMT的进程有关。
2019年08期 v.35 1164-1171页 [查看摘要][在线阅读][下载 614K] [下载次数：297 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 孙洁;孔界男;刘超;林贞花;任香善;
目的探究NVP-BEZ235对肝癌细胞Hep G2增殖和迁移的影响及其机制。方法 NVP-BEZ235 (0、25、50、100、250、500 nmol·L-1)处理Hep G2细胞48 h后,采用MTT法检测细胞的活性;通过形态学观察和Hoechst 33342染色法,检测NVP-BEZ235对Hep G2细胞增殖、凋亡的影响;采用划痕实验、Transwell迁移实验,检测NVP-BEZ235对Hep G2细胞迁移能力的影响;免疫印迹法检测PI3K/Akt/m TOR信号通路、上皮-间质转化(EMT)以及Six1/Ezrin信号轴等标志物的表达情况;采用免疫荧光实验检测EMT相关标志物的表达情况。结果 NVP-BEZ235可明显抑制HepG2细胞的增殖,且呈浓度依赖性;NVP-BEZ235可诱导HepG2细胞发生凋亡;NVP-BEZ235可抑制HepG2细胞的迁移能力。在NVP-BEZ235的作用下,p-Akt~(Ser473)、p-S6~(Thr389)、p-4E-BP1~(Thr37/46)的表达下调,上皮标志物E-cacdherin表达上调,间质标志物Vimentin、Snail表达下调,Six1和p-Ezrin~(Tyr353)表达下调。结论NVP-BEZ235可有效抑制HepG2细胞的增殖和迁移,其机制可能与NVP-BEZ235降低p-Akt~(Ser473)、p-S6~(Thr389)、p-4EBP1~(Thr37/46)的表达,抑制Six1/Ezrin信号轴及逆转EMT的进程有关。
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