- 李国停;钟瑞华;周洁芸;谢淑武;陈平;钱越英;朱焰;
目的探讨鬼臼毒素(podophyllotoxin,PPT)抑制SD大鼠附睾上皮细胞增殖作用,揭示其诱导凋亡的相关分子机制。方法体外培养大鼠原代附睾上皮细胞,CCK-8法检测鬼臼毒素作用24、48、72 h后对细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞内部结构变化;Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率;原位末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡形态;RT-PCR技术研究TNF-αmRNA的变化;ELISA法检测鬼臼毒素对细胞培养上清液TNF-α水平的影响;Western blot法检测细胞色素C、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的表达水平。结果CCK-8结果显示,鬼臼毒素能明显抑制大鼠附睾上皮细胞增殖并诱导凋亡,并呈剂量及时间依赖性(P<0.05),24、48、72 h的半数抑制浓度(95%置信区间)分别为59.36(15.50~227.41)、0.37(0.080~1.70)、0.077(0.017~0.35)μmol·L~(-1);透射电镜下观察发现,鬼臼毒素引起附睾上皮细胞形态变圆,细胞核破碎,线粒体空泡化;RT-PCR和ELISA检测结果显示,鬼臼毒素能升高TNF-αmRNA水平及细胞培养上清中TNF-α的含量;Western blot结果显示,鬼臼毒素能明显增加细胞中细胞色素C、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白表达。结论鬼臼毒素可通过线粒体调控的内源性通路和TNF受体介导的外源性通路,诱导大鼠附睾上皮细胞发生凋亡。
2017年10期 v.33 1357-1363页 [查看摘要][在线阅读][下载 996K] [下载次数：227 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：2 ] - 李国停;钟瑞华;周洁芸;谢淑武;陈平;钱越英;朱焰;
目的探讨鬼臼毒素(podophyllotoxin,PPT)抑制SD大鼠附睾上皮细胞增殖作用,揭示其诱导凋亡的相关分子机制。方法体外培养大鼠原代附睾上皮细胞,CCK-8法检测鬼臼毒素作用24、48、72 h后对细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞内部结构变化;Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率;原位末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡形态;RT-PCR技术研究TNF-αmRNA的变化;ELISA法检测鬼臼毒素对细胞培养上清液TNF-α水平的影响;Western blot法检测细胞色素C、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的表达水平。结果CCK-8结果显示,鬼臼毒素能明显抑制大鼠附睾上皮细胞增殖并诱导凋亡,并呈剂量及时间依赖性(P<0.05),24、48、72 h的半数抑制浓度(95%置信区间)分别为59.36(15.50~227.41)、0.37(0.080~1.70)、0.077(0.017~0.35)μmol·L~(-1);透射电镜下观察发现,鬼臼毒素引起附睾上皮细胞形态变圆,细胞核破碎,线粒体空泡化;RT-PCR和ELISA检测结果显示,鬼臼毒素能升高TNF-αmRNA水平及细胞培养上清中TNF-α的含量;Western blot结果显示,鬼臼毒素能明显增加细胞中细胞色素C、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白表达。结论鬼臼毒素可通过线粒体调控的内源性通路和TNF受体介导的外源性通路,诱导大鼠附睾上皮细胞发生凋亡。
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目的建立脾气虚证大鼠模型,分析脾气虚证的代谢通路,探究内源性代谢产物变化与脾气虚证的关系。方法采用苦寒泻下、劳倦过度和饥饱失常复合因素方法建立并评价脾气虚证大鼠模型,检测其血清中肌酸磷酸激酶活性;对大鼠尿液进行~1H-NMR检测,以变化倍数(fold change,FC)>1.2,结合独立样本t检验(P<0.05)的统计学方法筛选脾气虚证模型组和对照组的差异代谢物,进行代谢通路分析与富集分析。结果脾气虚证模型建立成功;模型组的肌酸磷酸激酶活性低于对照组(P<0.05);从主成分分析(PCA)结果得出模型组和对照组的代谢产物得到明显区分;筛选出33种差异代谢物,主要参与的代谢通路涉及能量代谢、氨基酸代谢、核苷酸代谢,同时对肠道菌群存在干扰。结论脾气虚主要扰乱了大鼠的能量代谢通路(三羧酸循环、糖酵解、脂质氧化),抑制了供能作用,导致大鼠出现疲乏和体质量增长抑制的症状。
2017年10期 v.33 1363-1370页 [查看摘要][在线阅读][下载 1474K] [下载次数：643 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：31 ] |[阅读次数：1 ] - 罗良;陈嘉辉;王园园;张晓君;尹西拳;卢碧钰;李媛;郑海慧;谢智勇;廖琼峰;
目的建立脾气虚证大鼠模型,分析脾气虚证的代谢通路,探究内源性代谢产物变化与脾气虚证的关系。方法采用苦寒泻下、劳倦过度和饥饱失常复合因素方法建立并评价脾气虚证大鼠模型,检测其血清中肌酸磷酸激酶活性;对大鼠尿液进行~1H-NMR检测,以变化倍数(fold change,FC)>1.2,结合独立样本t检验(P<0.05)的统计学方法筛选脾气虚证模型组和对照组的差异代谢物,进行代谢通路分析与富集分析。结果脾气虚证模型建立成功;模型组的肌酸磷酸激酶活性低于对照组(P<0.05);从主成分分析(PCA)结果得出模型组和对照组的代谢产物得到明显区分;筛选出33种差异代谢物,主要参与的代谢通路涉及能量代谢、氨基酸代谢、核苷酸代谢,同时对肠道菌群存在干扰。结论脾气虚主要扰乱了大鼠的能量代谢通路(三羧酸循环、糖酵解、脂质氧化),抑制了供能作用,导致大鼠出现疲乏和体质量增长抑制的症状。
2017年10期 v.33 1363-1370页 [查看摘要][在线阅读][下载 1474K] [下载次数：643 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：31 ] |[阅读次数：1 ] - 于庆龙;张莹;王宏健;金爱;宛蕾;王旭东;
目的探讨17β-雌二醇(E2)对人乳腺癌细胞迁移活动的影响及其信号机制。方法以雌激素受体(ER)阳性MCF-7和ER阴性MDA-MB-468乳腺癌细胞为研究模型,E2处理诱导细胞迁移。采用划痕实验检测细胞迁移能力,小分子RNA(siRNA)转染模型细胞沉默纤连蛋白(FN)基因表达,Western blot法检测蛋白水平,钙蛋白酶(CANP)特异性抑制剂Calpeptin(Cal)预处理细胞干预胞内CANP活性。结果(1)E2(50 nmol·L~(-1))处理24 h可明显促进MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,迁移率分别增加(51.55±5.50)%(P<0.05)和(40.78±4.78)%(P<0.01);(2)E2明显上调MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞FN蛋白表达水平,分别为对照组的2.11倍(P<0.05)和1.86倍(P<0.01);(3)Cal(10μmol·L~(-1))可明显抑制E2诱导的MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,抑制率分别为(49.55±6.44)%(P<0.05)和(36.85±4.40)%(P<0.01);(4)Cal能明显抑制MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞FN蛋白表达上调,抑制率分别为(80.12±4.55)%和(78.84±5.70)%(P<0.01);(5)siRNA沉默FN能抑制E2诱导MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,抑制率分别为(40.65±5.80)%(P<0.01)和(40.88±6.02)%(P<0.05)。结论E2可促进ER阳性或阴性乳腺癌细胞的迁移,而CANP-FN信号通路可能参与介导E2的促细胞迁移效应。
2017年10期 v.33 1371-1376页 [查看摘要][在线阅读][下载 858K] [下载次数：189 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：1 ] - 于庆龙;张莹;王宏健;金爱;宛蕾;王旭东;
目的探讨17β-雌二醇(E2)对人乳腺癌细胞迁移活动的影响及其信号机制。方法以雌激素受体(ER)阳性MCF-7和ER阴性MDA-MB-468乳腺癌细胞为研究模型,E2处理诱导细胞迁移。采用划痕实验检测细胞迁移能力,小分子RNA(siRNA)转染模型细胞沉默纤连蛋白(FN)基因表达,Western blot法检测蛋白水平,钙蛋白酶(CANP)特异性抑制剂Calpeptin(Cal)预处理细胞干预胞内CANP活性。结果(1)E2(50 nmol·L~(-1))处理24 h可明显促进MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,迁移率分别增加(51.55±5.50)%(P<0.05)和(40.78±4.78)%(P<0.01);(2)E2明显上调MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞FN蛋白表达水平,分别为对照组的2.11倍(P<0.05)和1.86倍(P<0.01);(3)Cal(10μmol·L~(-1))可明显抑制E2诱导的MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,抑制率分别为(49.55±6.44)%(P<0.05)和(36.85±4.40)%(P<0.01);(4)Cal能明显抑制MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞FN蛋白表达上调,抑制率分别为(80.12±4.55)%和(78.84±5.70)%(P<0.01);(5)siRNA沉默FN能抑制E2诱导MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,抑制率分别为(40.65±5.80)%(P<0.01)和(40.88±6.02)%(P<0.05)。结论E2可促进ER阳性或阴性乳腺癌细胞的迁移,而CANP-FN信号通路可能参与介导E2的促细胞迁移效应。
2017年10期 v.33 1371-1376页 [查看摘要][在线阅读][下载 858K] [下载次数：189 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：1 ] - 韦立群;李婉婷;李通;徐成飞;唐双意;甘嘉亮;
目的研究金雀异黄酮(genistein)诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及其机制。方法 MTT法观察金雀异黄酮对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258染色观察金雀异黄酮对MDA-MB-231细胞核凋亡形态学的影响;qRT-PCR法观察金雀异黄酮干预MDAMB-231细胞36 h后,EGFR mRNA表达水平的变化;金雀异黄酮干预MDA-MB-231细胞36 h后,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3,EGFR、Akt、p-Akt蛋白的变化;Akt激活剂胰岛素(insulin)、金雀异黄酮单独及联合胰岛素干预乳腺癌MDA-MB-231细胞后,Western blot检测Akt和p-Akt蛋白表达量的变化。结果 MTT结果显示,金雀异黄酮呈时间浓度依赖性抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖;Hoechst 33258染色结果显示,金雀异黄酮干预乳腺癌MDAMB-231细胞36 h后细胞核呈现典型凋亡形态学改变;qRTPCR结果显示,经金雀异黄酮干预MDA-MB-231细胞36 h后,EGFR的mRNA表达水平明显下降(P<0.01);Western blot结果显示金雀异黄酮干预乳腺癌MDA-MB-231细胞36 h后,与对照组对比,Bcl-2、EGFR、Akt、p-Akt蛋白表达水平明显下调(P<0.01),Bax、caspase-3蛋白表达水平明显上调(P<0.01),Akt激活剂胰岛素可以明显激活p-Akt(P<0.01),金雀异黄酮可以明显下调被激活的p-Akt(P<0.01)。结论金雀异黄酮能抑制三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞生长并诱导其凋亡,其机制可能与抑制EGFR/PI3K/Akt信号通路有关。
2017年10期 v.33 1376-1381页 [查看摘要][在线阅读][下载 851K] [下载次数：701 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：49 ] |[阅读次数：1 ] - 韦立群;李婉婷;李通;徐成飞;唐双意;甘嘉亮;
目的研究金雀异黄酮(genistein)诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及其机制。方法 MTT法观察金雀异黄酮对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258染色观察金雀异黄酮对MDA-MB-231细胞核凋亡形态学的影响;qRT-PCR法观察金雀异黄酮干预MDAMB-231细胞36 h后,EGFR mRNA表达水平的变化;金雀异黄酮干预MDA-MB-231细胞36 h后,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3,EGFR、Akt、p-Akt蛋白的变化;Akt激活剂胰岛素(insulin)、金雀异黄酮单独及联合胰岛素干预乳腺癌MDA-MB-231细胞后,Western blot检测Akt和p-Akt蛋白表达量的变化。结果 MTT结果显示,金雀异黄酮呈时间浓度依赖性抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖;Hoechst 33258染色结果显示,金雀异黄酮干预乳腺癌MDAMB-231细胞36 h后细胞核呈现典型凋亡形态学改变;qRTPCR结果显示,经金雀异黄酮干预MDA-MB-231细胞36 h后,EGFR的mRNA表达水平明显下降(P<0.01);Western blot结果显示金雀异黄酮干预乳腺癌MDA-MB-231细胞36 h后,与对照组对比,Bcl-2、EGFR、Akt、p-Akt蛋白表达水平明显下调(P<0.01),Bax、caspase-3蛋白表达水平明显上调(P<0.01),Akt激活剂胰岛素可以明显激活p-Akt(P<0.01),金雀异黄酮可以明显下调被激活的p-Akt(P<0.01)。结论金雀异黄酮能抑制三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞生长并诱导其凋亡,其机制可能与抑制EGFR/PI3K/Akt信号通路有关。
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目的研究异槲皮苷对Hep G2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用。方法采用异槲皮苷(0、40、80、160、320μmol·L~(-1))作用于Hep G2细胞,MTT法检测异槲皮苷对Hep G2细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察24、48 h后,细胞形态及生长情况;流式细胞术检测异槲皮苷(0、40、80、160μmol·L~(-1))作用Hep G2细胞48 h后细胞周期情况;荧光定量PCR及Western blot检测异槲皮苷作用Hep G2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及相关蛋白的表达。结果MTT检测发现异槲皮苷对Hep G2细胞生长有明显抑制作用,且与异槲皮苷的浓度及作用时间呈正相关;不同浓度的异槲皮苷作用Hep G2细胞24、48 h后,倒置显微镜下观察发现随着浓度的增高及作用时间的延长,细胞生存数量逐渐减少,且细胞形态发生明显变化;流式细胞术检测发现随着异槲皮苷浓度的增高,细胞被阻滞在G1期的数量逐渐增加;荧光定量PCR及Western blot结果均表明,与空白组相比,异槲皮苷(80μmol·L~(-1))作用Hep G2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及其相关蛋白的表达均明显降低(P<0.05),差异有统计学意义。结论异槲皮苷有诱导Hep G2细胞凋亡的作用,其作用机制可能与对Raf/MEK/ERK信号通路中相关因子的干预有关。
2017年10期 v.33 1382-1387页 [查看摘要][在线阅读][下载 962K] [下载次数：474 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：1 ] - 蒋国君;刘天旭;黄桂红;巫亭;陶丽群;朱钊铭;
目的研究异槲皮苷对Hep G2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用。方法采用异槲皮苷(0、40、80、160、320μmol·L~(-1))作用于Hep G2细胞,MTT法检测异槲皮苷对Hep G2细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察24、48 h后,细胞形态及生长情况;流式细胞术检测异槲皮苷(0、40、80、160μmol·L~(-1))作用Hep G2细胞48 h后细胞周期情况;荧光定量PCR及Western blot检测异槲皮苷作用Hep G2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及相关蛋白的表达。结果MTT检测发现异槲皮苷对Hep G2细胞生长有明显抑制作用,且与异槲皮苷的浓度及作用时间呈正相关;不同浓度的异槲皮苷作用Hep G2细胞24、48 h后,倒置显微镜下观察发现随着浓度的增高及作用时间的延长,细胞生存数量逐渐减少,且细胞形态发生明显变化;流式细胞术检测发现随着异槲皮苷浓度的增高,细胞被阻滞在G1期的数量逐渐增加;荧光定量PCR及Western blot结果均表明,与空白组相比,异槲皮苷(80μmol·L~(-1))作用Hep G2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及其相关蛋白的表达均明显降低(P<0.05),差异有统计学意义。结论异槲皮苷有诱导Hep G2细胞凋亡的作用,其作用机制可能与对Raf/MEK/ERK信号通路中相关因子的干预有关。
2017年10期 v.33 1382-1387页 [查看摘要][在线阅读][下载 962K] [下载次数：474 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：1 ] - 闵凤;贾贤杰;时红杰;胡静;胡志远;高琴;于影;
目的探讨Rho激酶在远距缺血后处理(remote ischemic postconditioning,RIPost C)中的作用及其可能的作用机制。方法 30只♂SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血/再灌注组(I/R)、远距缺血后处理组(RIPost C)、缺血/再灌注+Rho激酶阻断剂法舒地尔组(I/R+Fas),远距缺血后处理+Rho激酶激动剂溶血磷脂酸组(RIPost C+LPA),每组6只。全程监测动脉血压和Ⅱ导联心电图,实验结束后测定血浆肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性变化,HE染色观察心肌组织形态学变化,TTC染色法评价心肌梗死面积,Western blot测定磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)蛋白表达。结果与Sham组相比,其余各组MAP、HR均下降,ST段增高;与I/R组相比,RIPost C和I/R+Fas组MAP、HR升高,ST段降低,心肌组织病理形态有明显改善,炎性细胞浸润减轻,心肌梗死面积降低,CK、LDH释放减少,p-MLC表达降低;与RIPost C组相比,RIPost C+LPA组减弱了RIPost C的作用,抑制了上述指标的恢复。结论 Rho激酶信号通路可能参与了远距缺血后处理抗心肌缺血/再灌注损伤的作用。
2017年10期 v.33 1387-1392页 [查看摘要][在线阅读][下载 879K] [下载次数：174 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 闵凤;贾贤杰;时红杰;胡静;胡志远;高琴;于影;
目的探讨Rho激酶在远距缺血后处理(remote ischemic postconditioning,RIPost C)中的作用及其可能的作用机制。方法 30只♂SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血/再灌注组(I/R)、远距缺血后处理组(RIPost C)、缺血/再灌注+Rho激酶阻断剂法舒地尔组(I/R+Fas),远距缺血后处理+Rho激酶激动剂溶血磷脂酸组(RIPost C+LPA),每组6只。全程监测动脉血压和Ⅱ导联心电图,实验结束后测定血浆肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性变化,HE染色观察心肌组织形态学变化,TTC染色法评价心肌梗死面积,Western blot测定磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)蛋白表达。结果与Sham组相比,其余各组MAP、HR均下降,ST段增高;与I/R组相比,RIPost C和I/R+Fas组MAP、HR升高,ST段降低,心肌组织病理形态有明显改善,炎性细胞浸润减轻,心肌梗死面积降低,CK、LDH释放减少,p-MLC表达降低;与RIPost C组相比,RIPost C+LPA组减弱了RIPost C的作用,抑制了上述指标的恢复。结论 Rho激酶信号通路可能参与了远距缺血后处理抗心肌缺血/再灌注损伤的作用。
2017年10期 v.33 1387-1392页 [查看摘要][在线阅读][下载 879K] [下载次数：174 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 漆启华;李晨;肖强;邓亮;张遂辉;乐旸;董谢平;
目的观察吡咯烷二硫代氨基甲酯(PDTC)对大鼠颈椎动力失衡模型颈椎间盘组织形态及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响,探讨PDTC抑制颈椎间盘退变作用及其机制。方法 54只SD大鼠随机分为3组,切断大鼠颈后部浅、深肌群构建颈椎间盘退变动物模型。PDTC给药组(A组):造模术后腹腔每日注射PDTC溶液。模型组(B组):造模术后腹腔每日注射生理盐水。假手术组(C组):手术切开大鼠颈后部皮肤后立即缝合并每日腹腔注射生理盐水。术后10、12、16周分批处死动物,获取C5/6椎间盘组织,光镜下观察椎间盘形态改变,qPCR检测椎间盘组织中TNF-αmRNA、MMP-9 mRNA表达;Western blot检测椎间盘组织中TNF-α、MMP-9蛋白表达变化。结果 PDTC给药组(A组)椎间盘结构破坏减轻,纤维环结构排列有序。模型组(B组)TNF-α、MMP-9基因表达量随实验时间的延长而增多,早期增速较快,后期逐渐缓慢,在12周达高峰,而蛋白表达量在术后10周即达到较高水平,与12周、16周时间点比较无明显差异(P>0.05)。各时间点PDTC给药组TNF-αmRNA、MMP-9 mRNA及蛋白表达量较模型组(B组)明显降低(P<0.01),但明显高于假手术组(P<0.01)。结论 TNF-α、MMP-9是参与大鼠颈椎间盘退变过程的重要炎性因子,TNF-α、MMP-9可能通过NF-κB信号通路参与大鼠颈椎间盘退变,PDTC有望成为颈椎间盘退变的防治药物。
2017年10期 v.33 1393-1398页 [查看摘要][在线阅读][下载 869K] [下载次数：134 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 漆启华;李晨;肖强;邓亮;张遂辉;乐旸;董谢平;
目的观察吡咯烷二硫代氨基甲酯(PDTC)对大鼠颈椎动力失衡模型颈椎间盘组织形态及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响,探讨PDTC抑制颈椎间盘退变作用及其机制。方法 54只SD大鼠随机分为3组,切断大鼠颈后部浅、深肌群构建颈椎间盘退变动物模型。PDTC给药组(A组):造模术后腹腔每日注射PDTC溶液。模型组(B组):造模术后腹腔每日注射生理盐水。假手术组(C组):手术切开大鼠颈后部皮肤后立即缝合并每日腹腔注射生理盐水。术后10、12、16周分批处死动物,获取C5/6椎间盘组织,光镜下观察椎间盘形态改变,qPCR检测椎间盘组织中TNF-αmRNA、MMP-9 mRNA表达;Western blot检测椎间盘组织中TNF-α、MMP-9蛋白表达变化。结果 PDTC给药组(A组)椎间盘结构破坏减轻,纤维环结构排列有序。模型组(B组)TNF-α、MMP-9基因表达量随实验时间的延长而增多,早期增速较快,后期逐渐缓慢,在12周达高峰,而蛋白表达量在术后10周即达到较高水平,与12周、16周时间点比较无明显差异(P>0.05)。各时间点PDTC给药组TNF-αmRNA、MMP-9 mRNA及蛋白表达量较模型组(B组)明显降低(P<0.01),但明显高于假手术组(P<0.01)。结论 TNF-α、MMP-9是参与大鼠颈椎间盘退变过程的重要炎性因子,TNF-α、MMP-9可能通过NF-κB信号通路参与大鼠颈椎间盘退变,PDTC有望成为颈椎间盘退变的防治药物。
2017年10期 v.33 1393-1398页 [查看摘要][在线阅读][下载 869K] [下载次数：134 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：2 ] - 富莹雪;陈玉萍;卞文青;许惠琴;戴国英;沈红胜;甘啸阳;王威;
目的探讨梓醇对晚期糖基化终末产物(AGEs)刺激肾系膜细胞介导巨噬细胞极化的影响。方法将巨噬细胞(RAW264.7)置于Transwell上层小室,肾系膜细胞(MMCs)于下层孔板进行体外共培养,设置模型组、0-BSA对照组、梓醇组(0.1、1.0、10.0μmol·L~(-1)),另设氨基胍组(1.0μmol·L~(-1))作为阳性对照。加入各药物预孵下层系膜细胞1 h后,用AGEs(100 mg·L~(-1))刺激,继续孵育23 h,采用ELISA法检测系膜细胞上清液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的分泌水平;Western blot法检测巨噬细胞M1型标记蛋白i NOS、CD16/32、TNF-α、COX-2和M2型标记蛋白CD206、Arg-1的表达水平;流式细胞仪检测巨噬细胞i NOS与CD206蛋白表达百分率。结果 AGEs可提高系膜细胞MCP-1的分泌水平(P<0.01),上调巨噬细胞i NOS、TNF-α、CD16/32、COX-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),下调CD206和Arg-1蛋白表达;而梓醇(0.1、1.0、10.0μmol·L~(-1))预孵能降低系膜细胞MCP-1的分泌水平(P<0.01),下调i NOS、TNF-α、CD16/32、COX-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),上调CD206和Arg-1蛋白表达(P<0.05),并呈浓度依赖性。结论梓醇可通过调控AGEs刺激系膜细胞分泌MCP-1的水平,抑制巨噬细胞的M1型极化,并促进其向M2型极化,减轻炎症反应,缓解糖尿病肾损伤。
2017年10期 v.33 1399-1404页 [查看摘要][在线阅读][下载 984K] [下载次数：376 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：11 ] |[阅读次数：1 ] - 富莹雪;陈玉萍;卞文青;许惠琴;戴国英;沈红胜;甘啸阳;王威;
目的探讨梓醇对晚期糖基化终末产物(AGEs)刺激肾系膜细胞介导巨噬细胞极化的影响。方法将巨噬细胞(RAW264.7)置于Transwell上层小室,肾系膜细胞(MMCs)于下层孔板进行体外共培养,设置模型组、0-BSA对照组、梓醇组(0.1、1.0、10.0μmol·L~(-1)),另设氨基胍组(1.0μmol·L~(-1))作为阳性对照。加入各药物预孵下层系膜细胞1 h后,用AGEs(100 mg·L~(-1))刺激,继续孵育23 h,采用ELISA法检测系膜细胞上清液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的分泌水平;Western blot法检测巨噬细胞M1型标记蛋白i NOS、CD16/32、TNF-α、COX-2和M2型标记蛋白CD206、Arg-1的表达水平;流式细胞仪检测巨噬细胞i NOS与CD206蛋白表达百分率。结果 AGEs可提高系膜细胞MCP-1的分泌水平(P<0.01),上调巨噬细胞i NOS、TNF-α、CD16/32、COX-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),下调CD206和Arg-1蛋白表达;而梓醇(0.1、1.0、10.0μmol·L~(-1))预孵能降低系膜细胞MCP-1的分泌水平(P<0.01),下调i NOS、TNF-α、CD16/32、COX-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),上调CD206和Arg-1蛋白表达(P<0.05),并呈浓度依赖性。结论梓醇可通过调控AGEs刺激系膜细胞分泌MCP-1的水平,抑制巨噬细胞的M1型极化,并促进其向M2型极化,减轻炎症反应,缓解糖尿病肾损伤。
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目的研究miR-218对新藤黄酸抑制人宫颈癌He La细胞增殖作用的影响及其可能的分子机制。方法人宫颈癌He La细胞转染过表达真核表达载体pmiR-218,real-time PCR检测He La细胞miR-218的表达。将He La细胞分为空白对照组、新藤黄酸组、pmiR-218组、质粒对照组、新藤黄酸联合pmiR-218组。MTT法检测各组细胞增殖;流式细胞仪检测各组细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax、E-cadherin表达;real-time PCR检测Bcl-2、Bax和E-cadherin的mRNA表达水平。结果 miR-218真核表达载体pmiR-218转染He La细胞后,细胞内miR-218表达水平明显增加(P<0.05)。miR-218可提高He La细胞对新藤黄酸的敏感性,高表达miR-218能促进新藤黄酸对He La细胞的增殖抑制作用,促进细胞凋亡,下调新藤黄酸对He La细胞Bcl-2/Bax蛋白的表达水平。结论 miR-218可提高He La细胞对新藤黄酸的敏感性,miR-218能增强新藤黄酸对He La细胞增殖抑制作用,并促进He La细胞凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2/Bax的表达有关。
2017年10期 v.33 1405-1409页 [查看摘要][在线阅读][下载 648K] [下载次数：201 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：2 ] - 石玉荣;刘健;陈素莲;杨滢;
目的研究miR-218对新藤黄酸抑制人宫颈癌He La细胞增殖作用的影响及其可能的分子机制。方法人宫颈癌He La细胞转染过表达真核表达载体pmiR-218,real-time PCR检测He La细胞miR-218的表达。将He La细胞分为空白对照组、新藤黄酸组、pmiR-218组、质粒对照组、新藤黄酸联合pmiR-218组。MTT法检测各组细胞增殖;流式细胞仪检测各组细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax、E-cadherin表达;real-time PCR检测Bcl-2、Bax和E-cadherin的mRNA表达水平。结果 miR-218真核表达载体pmiR-218转染He La细胞后,细胞内miR-218表达水平明显增加(P<0.05)。miR-218可提高He La细胞对新藤黄酸的敏感性,高表达miR-218能促进新藤黄酸对He La细胞的增殖抑制作用,促进细胞凋亡,下调新藤黄酸对He La细胞Bcl-2/Bax蛋白的表达水平。结论 miR-218可提高He La细胞对新藤黄酸的敏感性,miR-218能增强新藤黄酸对He La细胞增殖抑制作用,并促进He La细胞凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2/Bax的表达有关。
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目的探讨腺苷酸环化酶抑制剂(SQ22536)和激动剂(Forskolin)在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的作用。方法 ICR小鼠随机分为生理盐水组(N组)、模型组(L组)、地塞米松组(D组)、SQ22536组(SQ组)和Forskolin组(F组),气道内滴入LPS制备ALI模型。6 h后观察肺组织病理改变,测定肺泡灌洗液(BALF)中白细胞、中性粒细胞和白蛋白含量,检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL~(-1)β)、白介素-6(IL-6)和c AMP含量。结果 Forskolin可明显改善肺组织病理变化,降低BALF中白细胞、中性粒细胞和蛋白含量,MPO活性和TNF-α含量明显降低,c AMP含量升高;SQ22536与M组相比差异均无显著性。结论 Forskolin对ALI的保护机制可能与升高c AMP水平、抑制中性粒细胞黏附和趋化及降低TNF-α等相关炎症因子含量有关。
2017年10期 v.33 1410-1414页 [查看摘要][在线阅读][下载 423K] [下载次数：316 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：14 ] |[阅读次数：1 ] - 汪雪峰;陈锋;宋顺德;章哲文;汤慧芳;
目的探讨腺苷酸环化酶抑制剂(SQ22536)和激动剂(Forskolin)在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的作用。方法 ICR小鼠随机分为生理盐水组(N组)、模型组(L组)、地塞米松组(D组)、SQ22536组(SQ组)和Forskolin组(F组),气道内滴入LPS制备ALI模型。6 h后观察肺组织病理改变,测定肺泡灌洗液(BALF)中白细胞、中性粒细胞和白蛋白含量,检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL~(-1)β)、白介素-6(IL-6)和c AMP含量。结果 Forskolin可明显改善肺组织病理变化,降低BALF中白细胞、中性粒细胞和蛋白含量,MPO活性和TNF-α含量明显降低,c AMP含量升高;SQ22536与M组相比差异均无显著性。结论 Forskolin对ALI的保护机制可能与升高c AMP水平、抑制中性粒细胞黏附和趋化及降低TNF-α等相关炎症因子含量有关。
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目的评估桑黄素和乙酰化白藜芦醇对大鼠体内沙奎那韦(P-gp作用底物)药物代谢动力学的影响。方法将SD大鼠分为4组,每组5只,即对照组、实验Ⅰ和Ⅱ组、阳性对照组,分别灌胃给予30 mg·kg-1沙奎那韦;30 mg·kg-1沙奎那韦联用40 mg·kg-1桑黄素;30 mg·kg-1沙奎那韦联用40 mg·kg-1乙酰化白藜芦醇和30 mg·kg-1沙奎那韦联用40 mg·kg-1维拉帕米。采用HPLC-MS/MS方法测定给药后不同时间沙奎那韦的血药浓度,计算药动学参数。结果 4组大鼠体内主要药动学参数分别为:AUC0-t:381.53μg·h·L~(-1),185.53μg·h·L~(-1),360.43μg·h·L~(-1),529.95μg·h·L~(-1);AUC0-∞:409.48μg·h·L~(-1),228.52μg·h·L~(-1),446.67μg·h·L~(-1),552.41μg·h·L~(-1);Cmax:110.80μg·L~(-1),86.44μg·L~(-1),139.84μg·L~(-1),423.60μg·L~(-1);Tmax:0.25 h,0.25 h,0.25 h,0.50 h;T1/2:5.72 h,5.94 h,6.78h,3.78 h;MRT0-∞:10.30 h,9.61 h,12.30 h,4.89 h;CL/F:7.59 m L·kg-1·h-1,13.88 m L·kg-1·h-1,7.28 m L·kg-1·h-1,5.52 m L·kg-1·h-1。结论沙奎那韦的药时曲线存在多峰现象;桑黄素可明显降低沙奎那韦的口服生物利用度并对其药动学参数产生影响,而乙酰化白藜芦醇对沙奎那韦的口服生物利用度和药动学参数没有明显影响。
2017年10期 v.33 1414-1420页 [查看摘要][在线阅读][下载 853K] [下载次数：336 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 张敬茹;于小桐;孙宁;李佳朋;秦一;顾健;赵立波;
目的评估桑黄素和乙酰化白藜芦醇对大鼠体内沙奎那韦(P-gp作用底物)药物代谢动力学的影响。方法将SD大鼠分为4组,每组5只,即对照组、实验Ⅰ和Ⅱ组、阳性对照组,分别灌胃给予30 mg·kg-1沙奎那韦;30 mg·kg-1沙奎那韦联用40 mg·kg-1桑黄素;30 mg·kg-1沙奎那韦联用40 mg·kg-1乙酰化白藜芦醇和30 mg·kg-1沙奎那韦联用40 mg·kg-1维拉帕米。采用HPLC-MS/MS方法测定给药后不同时间沙奎那韦的血药浓度,计算药动学参数。结果 4组大鼠体内主要药动学参数分别为:AUC0-t:381.53μg·h·L~(-1),185.53μg·h·L~(-1),360.43μg·h·L~(-1),529.95μg·h·L~(-1);AUC0-∞:409.48μg·h·L~(-1),228.52μg·h·L~(-1),446.67μg·h·L~(-1),552.41μg·h·L~(-1);Cmax:110.80μg·L~(-1),86.44μg·L~(-1),139.84μg·L~(-1),423.60μg·L~(-1);Tmax:0.25 h,0.25 h,0.25 h,0.50 h;T1/2:5.72 h,5.94 h,6.78h,3.78 h;MRT0-∞:10.30 h,9.61 h,12.30 h,4.89 h;CL/F:7.59 m L·kg-1·h-1,13.88 m L·kg-1·h-1,7.28 m L·kg-1·h-1,5.52 m L·kg-1·h-1。结论沙奎那韦的药时曲线存在多峰现象;桑黄素可明显降低沙奎那韦的口服生物利用度并对其药动学参数产生影响,而乙酰化白藜芦醇对沙奎那韦的口服生物利用度和药动学参数没有明显影响。
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目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)调控p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平,调节乳腺癌MCF-7细胞周期的分子机制。方法采用实时定量PCR、Western blot和DNA-Ch IP方法测定SAHA对乳腺癌MCF-7细胞周期调控系统的影响;应用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)技术探究SAHA调控p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平的情况。结果 SAHA明显影响乳腺癌细胞周期相关调控因子的表达;在针对p21~(WAF1/CIP1)基因功能的筛查中发现,SAHA可明显诱导p21~(WAF1/CIP1)mRNA和蛋白的表达,并且可调节p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平。结论 SAHA通过影响p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化程度调节乳腺癌MCF-7细胞周期的进程。
2017年10期 v.33 1421-1425页 [查看摘要][在线阅读][下载 643K] [下载次数：302 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：19 ] |[阅读次数：1 ] - 周慧;周伟强;
目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)调控p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平,调节乳腺癌MCF-7细胞周期的分子机制。方法采用实时定量PCR、Western blot和DNA-Ch IP方法测定SAHA对乳腺癌MCF-7细胞周期调控系统的影响;应用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)技术探究SAHA调控p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平的情况。结果 SAHA明显影响乳腺癌细胞周期相关调控因子的表达;在针对p21~(WAF1/CIP1)基因功能的筛查中发现,SAHA可明显诱导p21~(WAF1/CIP1)mRNA和蛋白的表达,并且可调节p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平。结论 SAHA通过影响p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化程度调节乳腺癌MCF-7细胞周期的进程。
2017年10期 v.33 1421-1425页 [查看摘要][在线阅读][下载 643K] [下载次数：302 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：19 ] |[阅读次数：1 ] - 田飞;刘春娜;刘新宇;陈秋元;丁宇豪;
目的研究神经内分泌生物活性肽优洛可定(urocortin,UCN)对丘脑底核(subthalamic nucleus,STN)神经元放电及STN中多巴胺(dopamine,DA)能、谷氨酸(glutamic acid,GLU)能神经传递的影响,研究UCN在STN中是否与GLU及DA存在汇聚作用,探讨UCN在帕金森疾病(Parkinson’s disease,PD)发生中可能发挥的作用。方法取40只SD大鼠,采用神经电生理实验方法中的微电泳技术,在微电泳UCN过程中,观察STN神经元放电的波形及频率变化,同时,微电泳Astressin(AST)及蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)抑制剂,观察促皮质素释放因子2型受体(corticotropin releasing factor 2 receptor,CRF-2R)是否参与UCN对STN神经元放电的影响。另外,在微电泳DA和GLU过程中,给予UCN及AST,观察STN神经元放电的变化,明确是否存在DA能及GLU能与UCN的交汇作用。结果微电泳UCN过程中,82%(27/33)STN神经元频率减慢。STN平均放电频率由(3.65±0.27)Hz减少到(2.05±0.33)Hz,微电泳UCN前、后STN放电频率明显降低(P<0.01)。另外,UCN抑制作用可被AST明显拮抗(P<0.01),UCN抑制作用也可被PKA阻断剂部分阻断。在微电泳抑制性神经递质DA和兴奋性GLU过程中,UCN能进一步协同DA的抑制效应,并明显拮抗GLU的兴奋作用(P<0.01)。结论 UCN与DA能及GLU能在STN神经元中存在汇聚作用,UCN可能是通过与CRF-2R结合,进而通过PKA信号通路,影响DA能、GLU能神经递质活动,抑制STN神经元放电。
2017年10期 v.33 1425-1430页 [查看摘要][在线阅读][下载 546K] [下载次数：73 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 田飞;刘春娜;刘新宇;陈秋元;丁宇豪;
目的研究神经内分泌生物活性肽优洛可定(urocortin,UCN)对丘脑底核(subthalamic nucleus,STN)神经元放电及STN中多巴胺(dopamine,DA)能、谷氨酸(glutamic acid,GLU)能神经传递的影响,研究UCN在STN中是否与GLU及DA存在汇聚作用,探讨UCN在帕金森疾病(Parkinson’s disease,PD)发生中可能发挥的作用。方法取40只SD大鼠,采用神经电生理实验方法中的微电泳技术,在微电泳UCN过程中,观察STN神经元放电的波形及频率变化,同时,微电泳Astressin(AST)及蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)抑制剂,观察促皮质素释放因子2型受体(corticotropin releasing factor 2 receptor,CRF-2R)是否参与UCN对STN神经元放电的影响。另外,在微电泳DA和GLU过程中,给予UCN及AST,观察STN神经元放电的变化,明确是否存在DA能及GLU能与UCN的交汇作用。结果微电泳UCN过程中,82%(27/33)STN神经元频率减慢。STN平均放电频率由(3.65±0.27)Hz减少到(2.05±0.33)Hz,微电泳UCN前、后STN放电频率明显降低(P<0.01)。另外,UCN抑制作用可被AST明显拮抗(P<0.01),UCN抑制作用也可被PKA阻断剂部分阻断。在微电泳抑制性神经递质DA和兴奋性GLU过程中,UCN能进一步协同DA的抑制效应,并明显拮抗GLU的兴奋作用(P<0.01)。结论 UCN与DA能及GLU能在STN神经元中存在汇聚作用,UCN可能是通过与CRF-2R结合,进而通过PKA信号通路,影响DA能、GLU能神经递质活动,抑制STN神经元放电。
2017年10期 v.33 1425-1430页 [查看摘要][在线阅读][下载 546K] [下载次数：73 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 李敏;路青瑜;李亚男;孙黔云;
目的研究补体旁路激活导致的微血管内皮细胞纤溶凝血功能的变化以及吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)和白藜芦醇(Res)的干预作用。方法采用眼镜蛇毒因子激活血清补体旁路途径。将补体旁路活化的血清作用于人微血管内皮细胞(HMEC),检测多个时间点细胞培养上清的水解发色底物活性变化和对凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)的影响,并制备细胞悬液,检测细胞表面的抗凝血功能变化情况。采用PDTC、Res对上述变化指标进行干预研究。结果 HMEC经补体旁路活化产物刺激后,细胞培养上清的发色底物酶解活性明显上调;细胞培养上清导致正常血浆的APTT明显缩短,同时,对PT也有缩短的作用;经补体旁路活化产物刺激HMEC后制备的各时间点细胞悬液对正常血浆的APTT有明显的缩短作用,6 h刺激组的细胞悬液也表现出缩短PT的作用。PDTC和Res未能抑制发色水解活性的上调,但Res对APTT的缩短有明显的干预作用,而PDTC能在一定程度上抑制PT的缩短。结论补体旁路活化产物会导致HMEC纤溶凝血功能的失调,而PDTC和Res有一定的干预作用。
2017年10期 v.33 1430-1435页 [查看摘要][在线阅读][下载 772K] [下载次数：180 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 李敏;路青瑜;李亚男;孙黔云;
目的研究补体旁路激活导致的微血管内皮细胞纤溶凝血功能的变化以及吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)和白藜芦醇(Res)的干预作用。方法采用眼镜蛇毒因子激活血清补体旁路途径。将补体旁路活化的血清作用于人微血管内皮细胞(HMEC),检测多个时间点细胞培养上清的水解发色底物活性变化和对凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)的影响,并制备细胞悬液,检测细胞表面的抗凝血功能变化情况。采用PDTC、Res对上述变化指标进行干预研究。结果 HMEC经补体旁路活化产物刺激后,细胞培养上清的发色底物酶解活性明显上调;细胞培养上清导致正常血浆的APTT明显缩短,同时,对PT也有缩短的作用;经补体旁路活化产物刺激HMEC后制备的各时间点细胞悬液对正常血浆的APTT有明显的缩短作用,6 h刺激组的细胞悬液也表现出缩短PT的作用。PDTC和Res未能抑制发色水解活性的上调,但Res对APTT的缩短有明显的干预作用,而PDTC能在一定程度上抑制PT的缩短。结论补体旁路活化产物会导致HMEC纤溶凝血功能的失调,而PDTC和Res有一定的干预作用。
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目的观察单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)与急性肺栓塞(pulmonary thromboembolism,PTE)后肺动脉高压形成的关系;探讨中药单体白藜芦醇调控急性PTE后肺动脉高压及其对MCP-1表达的影响及机制。方法采用自体血栓回输法复制Sprague-Dawley大鼠急性PTE模型;将大鼠随机分成5组(正常组、溶剂组、急性PTE组、抗体Cl142组、白藜芦醇组),每组观察1、4、8 h3个时点;急性PTE模型复制前1 h,分别对MCP-1中和抗体C1142组及白藜芦醇组进行药物预处理;在1、4、8 h时间点检测各组肺动脉平均压力(mean pulmonary artery pressure,MPAP)和MCP-1 mRNA及蛋白表达情况。结果 (1)在相同时点,急性PTE组MPAP和MCP-1 mRNA、蛋白表达均较溶剂对照组明显升高(P<0.05);(2)在相同时点,白藜芦醇组MPAP和MCP-1 mRNA、蛋白表达较急性PTE组明显降低(P<0.05);(3)在相同时点,抗体C1142组MCP-1 mRNA、蛋白表达较急性PTE组明显降低(P<0.05)。结论急性PTE后MCP-1的大量表达参与急性PTE后肺动脉高压的形成,白藜芦醇可通过下调MCP-1表达,降低急性PTE后肺动脉压力。
2017年10期 v.33 1436-1441页 [查看摘要][在线阅读][下载 1047K] [下载次数：243 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：18 ] |[阅读次数：1 ] - 陈淳;林建伟;李国平;任卓超;李亚清;严建平;王良兴;
目的观察单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)与急性肺栓塞(pulmonary thromboembolism,PTE)后肺动脉高压形成的关系;探讨中药单体白藜芦醇调控急性PTE后肺动脉高压及其对MCP-1表达的影响及机制。方法采用自体血栓回输法复制Sprague-Dawley大鼠急性PTE模型;将大鼠随机分成5组(正常组、溶剂组、急性PTE组、抗体Cl142组、白藜芦醇组),每组观察1、4、8 h3个时点;急性PTE模型复制前1 h,分别对MCP-1中和抗体C1142组及白藜芦醇组进行药物预处理;在1、4、8 h时间点检测各组肺动脉平均压力(mean pulmonary artery pressure,MPAP)和MCP-1 mRNA及蛋白表达情况。结果 (1)在相同时点,急性PTE组MPAP和MCP-1 mRNA、蛋白表达均较溶剂对照组明显升高(P<0.05);(2)在相同时点,白藜芦醇组MPAP和MCP-1 mRNA、蛋白表达较急性PTE组明显降低(P<0.05);(3)在相同时点,抗体C1142组MCP-1 mRNA、蛋白表达较急性PTE组明显降低(P<0.05)。结论急性PTE后MCP-1的大量表达参与急性PTE后肺动脉高压的形成,白藜芦醇可通过下调MCP-1表达,降低急性PTE后肺动脉压力。
2017年10期 v.33 1436-1441页 [查看摘要][在线阅读][下载 1047K] [下载次数：243 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：18 ] |[阅读次数：1 ] - 侯晓敏;秦小江;
目的研究槲皮素对糖尿病大鼠CA损伤的改善作用及该作用与Kv1.5的关系。方法 30只♂SD大鼠,随机分为3组:空白对照组、糖尿病组、"糖尿病+槲皮素"组。通过大鼠冠脉流量(coronary flow,CF)测定,观察槲皮素对糖尿病所致CF变化的影响;利用冠状动脉(coronary artery,CA)张力测定,观察槲皮素对糖尿病所致CA张力变化的影响;应用膜片钳记录CA血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)电压依赖性钾通道(voltage gated potassium channel,Kv)电流及测定CA VSMC Kv1.5 mRNA表达水平,探讨槲皮素改善糖尿病所致CA损伤的机制。结果糖尿病组CF较空白组明显下降,糖尿病大鼠饮食中补充槲皮素,可使得其CF有所增加;膳食补充槲皮素可减弱糖尿病大鼠CA对KCl的收缩反应(P<0.05);与糖尿病组相比,"糖尿病+槲皮素"组CA对Kv阻断剂4-AP的收缩幅度明显降低;糖尿病组大鼠CA VSMC Kv电流较空白组明显降低(P<0.05),膳食补充槲皮素可减小其降低幅度;RT-PCR结果表明,Kv1.5 mRNA相对表达量空白组最高,"糖尿病+槲皮素"组次之,糖尿病组最少。结论槲皮素对糖尿病CA损伤有保护作用,该作用与激活Kv1.5存在一定相关性。
2017年10期 v.33 1442-1445页 [查看摘要][在线阅读][下载 314K] [下载次数：160 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 侯晓敏;秦小江;
目的研究槲皮素对糖尿病大鼠CA损伤的改善作用及该作用与Kv1.5的关系。方法 30只♂SD大鼠,随机分为3组:空白对照组、糖尿病组、"糖尿病+槲皮素"组。通过大鼠冠脉流量(coronary flow,CF)测定,观察槲皮素对糖尿病所致CF变化的影响;利用冠状动脉(coronary artery,CA)张力测定,观察槲皮素对糖尿病所致CA张力变化的影响;应用膜片钳记录CA血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)电压依赖性钾通道(voltage gated potassium channel,Kv)电流及测定CA VSMC Kv1.5 mRNA表达水平,探讨槲皮素改善糖尿病所致CA损伤的机制。结果糖尿病组CF较空白组明显下降,糖尿病大鼠饮食中补充槲皮素,可使得其CF有所增加;膳食补充槲皮素可减弱糖尿病大鼠CA对KCl的收缩反应(P<0.05);与糖尿病组相比,"糖尿病+槲皮素"组CA对Kv阻断剂4-AP的收缩幅度明显降低;糖尿病组大鼠CA VSMC Kv电流较空白组明显降低(P<0.05),膳食补充槲皮素可减小其降低幅度;RT-PCR结果表明,Kv1.5 mRNA相对表达量空白组最高,"糖尿病+槲皮素"组次之,糖尿病组最少。结论槲皮素对糖尿病CA损伤有保护作用,该作用与激活Kv1.5存在一定相关性。
2017年10期 v.33 1442-1445页 [查看摘要][在线阅读][下载 314K] [下载次数：160 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 马如风;王丽丽;左加成;朱如愿;刘海霞;柳辰玥;李琳;陈贝贝;赵丹丹;莫芳芳;牛建昭;高思华;张东伟;
目的探讨姜黄素对高脂诱导的C57BL/6J小鼠骨结构和骨质量的影响及其与组织蛋白酶K(cathepsin K)表达的相关性。方法用姜黄素(50 mg·kg~(-1))干预高脂饲料诱导的C57BL/6J小鼠骨质疏松模型12周后,取小鼠股骨和胫骨,分别用HE染色、茜素红染色和番红O/固绿染色观察骨组织微结构变化、骨代谢以及骨发育情况;用免疫组化法和Western blot法检测小鼠骨组织中组织蛋白酶K蛋白的表达。结果病理形态学结果显示,姜黄素能明显改善高脂诱导的C57BL/6J小鼠的骨组织微结构,促进软骨发育和改善骨钙化程度;骨生物力学结果表明,姜黄素能明显提高高脂诱导C57BL/6J小鼠的骨强度;免疫组化和Western blot检测结果显示,姜黄素能够明显抑制小鼠骨组织中的组织蛋白酶K表达。结论姜黄素能提高高脂诱导C57BL/6J小鼠的骨强度,改善骨微结构,其发挥骨保护作用机制之一可能与抑制组织蛋白酶K的表达相关。
2017年10期 v.33 1446-1451页 [查看摘要][在线阅读][下载 1524K] [下载次数：345 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：14 ] |[阅读次数：1 ] - 马如风;王丽丽;左加成;朱如愿;刘海霞;柳辰玥;李琳;陈贝贝;赵丹丹;莫芳芳;牛建昭;高思华;张东伟;
目的探讨姜黄素对高脂诱导的C57BL/6J小鼠骨结构和骨质量的影响及其与组织蛋白酶K(cathepsin K)表达的相关性。方法用姜黄素(50 mg·kg~(-1))干预高脂饲料诱导的C57BL/6J小鼠骨质疏松模型12周后,取小鼠股骨和胫骨,分别用HE染色、茜素红染色和番红O/固绿染色观察骨组织微结构变化、骨代谢以及骨发育情况;用免疫组化法和Western blot法检测小鼠骨组织中组织蛋白酶K蛋白的表达。结果病理形态学结果显示,姜黄素能明显改善高脂诱导的C57BL/6J小鼠的骨组织微结构,促进软骨发育和改善骨钙化程度;骨生物力学结果表明,姜黄素能明显提高高脂诱导C57BL/6J小鼠的骨强度;免疫组化和Western blot检测结果显示,姜黄素能够明显抑制小鼠骨组织中的组织蛋白酶K表达。结论姜黄素能提高高脂诱导C57BL/6J小鼠的骨强度,改善骨微结构,其发挥骨保护作用机制之一可能与抑制组织蛋白酶K的表达相关。
2017年10期 v.33 1446-1451页 [查看摘要][在线阅读][下载 1524K] [下载次数：345 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：14 ] |[阅读次数：1 ] - 袁保红;黄萍;邓鑫梦;王柯英;戴良成;尹辉;
目的研究黄芪甲苷(astragaloside,AS-Ⅳ)在盲肠末端结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)诱导脓毒症小鼠中的免疫保护作用。方法将C57BL/6小鼠随机分成假手术组、CLP组、CLP+AS-Ⅳ组。造模术前2 d,CLP+AS-Ⅳ组灌胃给予AS-Ⅳ(10 mg·kg~(-1)),对照组给予等量生理盐水。建立小鼠CLP诱导的脓毒血症模型,在6、24 h分别取血液、腹腔液和组织器官进行细菌总数测定;采用Percoll密度梯度分离纯化外周血中性粒细胞,用Transwell法检测小鼠中性粒细胞的趋化功能;与E.coli混合培养检测中性粒细胞的杀菌功能。结果 AS-Ⅳ预处理的脓毒症小鼠存活率明显上升,腹腔液中性粒细胞数目明显增加;AS-Ⅳ处理后小鼠腹腔液、血液及肝、肺、肾等脏器中细菌负荷量明显降低;AS-Ⅳ预处理的中性粒细胞趋化和杀菌功能增强。结论黄芪甲苷对CLP诱导脓毒症小鼠具有免疫保护作用,其机制与上调中性粒细胞趋化因子受体CXCR2表达,增加中性粒细胞抗菌功能相关。
2017年10期 v.33 1452-1456页 [查看摘要][在线阅读][下载 1016K] [下载次数：352 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：2 ] - 袁保红;黄萍;邓鑫梦;王柯英;戴良成;尹辉;
目的研究黄芪甲苷(astragaloside,AS-Ⅳ)在盲肠末端结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)诱导脓毒症小鼠中的免疫保护作用。方法将C57BL/6小鼠随机分成假手术组、CLP组、CLP+AS-Ⅳ组。造模术前2 d,CLP+AS-Ⅳ组灌胃给予AS-Ⅳ(10 mg·kg~(-1)),对照组给予等量生理盐水。建立小鼠CLP诱导的脓毒血症模型,在6、24 h分别取血液、腹腔液和组织器官进行细菌总数测定;采用Percoll密度梯度分离纯化外周血中性粒细胞,用Transwell法检测小鼠中性粒细胞的趋化功能;与E.coli混合培养检测中性粒细胞的杀菌功能。结果 AS-Ⅳ预处理的脓毒症小鼠存活率明显上升,腹腔液中性粒细胞数目明显增加;AS-Ⅳ处理后小鼠腹腔液、血液及肝、肺、肾等脏器中细菌负荷量明显降低;AS-Ⅳ预处理的中性粒细胞趋化和杀菌功能增强。结论黄芪甲苷对CLP诱导脓毒症小鼠具有免疫保护作用,其机制与上调中性粒细胞趋化因子受体CXCR2表达,增加中性粒细胞抗菌功能相关。
2017年10期 v.33 1452-1456页 [查看摘要][在线阅读][下载 1016K] [下载次数：352 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：1 ] - 何欢;张泽宇;刘丹;廖章萍;尹东;何明;
目的探讨e NOS及ADMA/DDAHⅡ介导的铁过载对HUVECs细胞线粒体的损伤作用。方法常规培养HUVECs细胞,随机分为正常对照(Ctrl)组、右旋糖酐铁(Iron)组、L-精氨酸(L-Arg)组。48 h后,MTT法检测细胞存活率;HPLC法检测ADMA含量及DDAHⅡ活性;Western blot法检测e NOS表达;比色法检测培养液LDH活性、NO含量、细胞MDA含量以及m PTP开放;流式细胞仪检测心肌细胞ROS含量、线粒体膜电位及细胞凋亡。结果 Iron处理48 h后,HUVECs细胞存活率明显降低,培养液ADMA及LDH活性升高,NO含量减少;细胞e NOS表达下调、DDAHⅡ活性降低;MDA含量与ROS生成明显增加,线粒体膜电位减小,m PTP大量开放,细胞凋亡增加;ADMA生理性对抗剂L-Arg则可明显减弱Iron的上述损伤作用。结论 e NOS参与铁过载诱导的HUVECs细胞线粒体损伤,ADMA/DDAHⅡ机制也可能发挥了作用。
2017年10期 v.33 1457-1461页 [查看摘要][在线阅读][下载 494K] [下载次数：337 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：1 ] - 何欢;张泽宇;刘丹;廖章萍;尹东;何明;
目的探讨e NOS及ADMA/DDAHⅡ介导的铁过载对HUVECs细胞线粒体的损伤作用。方法常规培养HUVECs细胞,随机分为正常对照(Ctrl)组、右旋糖酐铁(Iron)组、L-精氨酸(L-Arg)组。48 h后,MTT法检测细胞存活率;HPLC法检测ADMA含量及DDAHⅡ活性;Western blot法检测e NOS表达;比色法检测培养液LDH活性、NO含量、细胞MDA含量以及m PTP开放;流式细胞仪检测心肌细胞ROS含量、线粒体膜电位及细胞凋亡。结果 Iron处理48 h后,HUVECs细胞存活率明显降低,培养液ADMA及LDH活性升高,NO含量减少;细胞e NOS表达下调、DDAHⅡ活性降低;MDA含量与ROS生成明显增加,线粒体膜电位减小,m PTP大量开放,细胞凋亡增加;ADMA生理性对抗剂L-Arg则可明显减弱Iron的上述损伤作用。结论 e NOS参与铁过载诱导的HUVECs细胞线粒体损伤,ADMA/DDAHⅡ机制也可能发挥了作用。
2017年10期 v.33 1457-1461页 [查看摘要][在线阅读][下载 494K] [下载次数：337 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：1 ] - 吴可;赵文丽;李月影;邱长雨;施海静;张咏梅;
目的探讨Nrf2-ARE信号通路在左乙拉西坦抗癫痫中的作用,以及应用左乙拉西坦对认知功能的影响。方法成年♂SD大鼠36只,250~300 g,随机分为生理盐水对照(control)组、戊四唑(1,5-pentamethylene-1H-tetrazole,PTZ)癫痫模型组、左乙拉西坦(levetiracetam,LEV)对照组以及左乙拉西坦治疗组,每组9只。以Morris水迷宫测试大鼠的空间学习记忆能力;用免疫印迹法测定海马组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量。结果与癫痫模型组相比,给予左乙拉西坦治疗的癫痫大鼠在Morris水迷宫测试中潜伏期明显缩短(P<0.05),海马Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达均明显增高(P<0.01)。结论左乙拉西坦能够改善癫痫大鼠的认知功能,其机制可能通过Nrf2-ARE通路,使HO-1、NQO1蛋白表达增多,起到抗癫痫的作用。
2017年10期 v.33 1462-1466页 [查看摘要][在线阅读][下载 444K] [下载次数：221 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：1 ] - 吴可;赵文丽;李月影;邱长雨;施海静;张咏梅;
目的探讨Nrf2-ARE信号通路在左乙拉西坦抗癫痫中的作用,以及应用左乙拉西坦对认知功能的影响。方法成年♂SD大鼠36只,250~300 g,随机分为生理盐水对照(control)组、戊四唑(1,5-pentamethylene-1H-tetrazole,PTZ)癫痫模型组、左乙拉西坦(levetiracetam,LEV)对照组以及左乙拉西坦治疗组,每组9只。以Morris水迷宫测试大鼠的空间学习记忆能力;用免疫印迹法测定海马组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量。结果与癫痫模型组相比,给予左乙拉西坦治疗的癫痫大鼠在Morris水迷宫测试中潜伏期明显缩短(P<0.05),海马Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达均明显增高(P<0.01)。结论左乙拉西坦能够改善癫痫大鼠的认知功能,其机制可能通过Nrf2-ARE通路,使HO-1、NQO1蛋白表达增多,起到抗癫痫的作用。
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