- 肖静;潘宇;李晓红;姜霖;杨翔宇;吴岳恒;雷和平;余细勇;
目的探索心脏干细胞分泌的外泌体(exosome)对体外氧化应激所致心肌细胞凋亡的保护作用。方法磁珠分选出Sca-1~+CPCs进行培养,流式细胞术鉴定;分离CPCs分泌的exosome,并用Western blot进行表型鉴定和用Nanosight进行粒径分析;免疫荧光法及PKH26标记技术观察心肌细胞H9c2对exosome的摄取作用;通过H_2O_2处理诱导H9c2细胞凋亡,用Western blot检测对照组与CPC-exo处理组凋亡相关蛋白水平,观察exosome对心肌细胞凋亡的保护作用。结果 1磁珠分选出的细胞用免疫荧光检测发现Sca-1呈阳性表达,且纯度可达95%以上。2从Sca-1~+CPCs细胞培养上清中提取出的exosome其表面标记蛋白CD63呈阳性表达,Nanosight结果显示大部分粒子都处于(82.33±3.06)nm(n=3)。免疫荧光显示H9c2细胞中可见大量PKH26标记的exosome在胞质聚集。3Western blot结果显示,与对照组相比,CPC-exo处理组总的caspase-3表达不变,而激活型caspase-3表达水平明显降低(P<0.05)。结论 CPCs分泌的exosome可被H9C2细胞所摄取,可以保护心肌细胞由于氧化应激引起的凋亡。
2015年12期 v.31 1656-1660页 [查看摘要][在线阅读][下载 774K] [下载次数：781 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 肖静;潘宇;李晓红;姜霖;杨翔宇;吴岳恒;雷和平;余细勇;
目的探索心脏干细胞分泌的外泌体(exosome)对体外氧化应激所致心肌细胞凋亡的保护作用。方法磁珠分选出Sca-1~+CPCs进行培养,流式细胞术鉴定;分离CPCs分泌的exosome,并用Western blot进行表型鉴定和用Nanosight进行粒径分析;免疫荧光法及PKH26标记技术观察心肌细胞H9c2对exosome的摄取作用;通过H_2O_2处理诱导H9c2细胞凋亡,用Western blot检测对照组与CPC-exo处理组凋亡相关蛋白水平,观察exosome对心肌细胞凋亡的保护作用。结果 1磁珠分选出的细胞用免疫荧光检测发现Sca-1呈阳性表达,且纯度可达95%以上。2从Sca-1~+CPCs细胞培养上清中提取出的exosome其表面标记蛋白CD63呈阳性表达,Nanosight结果显示大部分粒子都处于(82.33±3.06)nm(n=3)。免疫荧光显示H9c2细胞中可见大量PKH26标记的exosome在胞质聚集。3Western blot结果显示,与对照组相比,CPC-exo处理组总的caspase-3表达不变,而激活型caspase-3表达水平明显降低(P<0.05)。结论 CPCs分泌的exosome可被H9C2细胞所摄取,可以保护心肌细胞由于氧化应激引起的凋亡。
2015年12期 v.31 1656-1660页 [查看摘要][在线阅读][下载 774K] [下载次数：781 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 许淑红;尹茂山;吴玉林;
目的探讨氧糖剥夺并复氧培养后星形胶质细胞水肿及其水通道蛋白4(AQP4)表达的变化以及吡拉格雷(TSF)对其表达变化的影响。方法体外培养原代星形胶质细胞,建立氧糖剥夺/复氧细胞水肿模型,并随机分为正常组、氧糖剥夺/复氧损伤(OGD/Reox)组、奥扎格雷钠(Ozagrel)阳性对照组和TSF治疗组,在氧糖剥夺/复氧损伤后6、12、24和48 h 4个时间点测定细胞体积变化,乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、MTT法检测细胞损伤及存活情况,Western blot法检测各组细胞膜AQP4蛋白的表达水平,RT-PCR法检测各组细胞AQP4 m RNA的转录水平。结果星形胶质细胞经缺氧再复氧处理,随着复氧时间的延长细胞损害加重(P<0.05,P<0.01);TSF治疗组的细胞体积明显低于OGD/Reox损伤组(P<0.05);给予TSF治疗后细胞在氧糖剥夺/复氧后的LDH漏出率较OGD/Reox损伤组明显降低(P<0.05);TSF治疗组与单纯氧糖剥夺/复氧相比较MTT检测细胞活力明显升高(P<0.05);给予TSF治疗组,AQP4表达明显降低(P<0.05);与Ozagrel相比较差异无显著性。Western blot及RT-PCR检测蛋白及m RNA的表达水平,给予TSF治疗组的AQP4蛋白及m RNA表达均明显降低(P<0.05)。结论TSF治疗能明显减轻体外氧糖剥夺/复氧损伤引起的星形胶质细胞水肿,可能是通过降低氧糖剥夺后AQP4的表达水平而实现。
2015年12期 v.31 1661-1667页 [查看摘要][在线阅读][下载 809K] [下载次数：260 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 许淑红;尹茂山;吴玉林;
目的探讨氧糖剥夺并复氧培养后星形胶质细胞水肿及其水通道蛋白4(AQP4)表达的变化以及吡拉格雷(TSF)对其表达变化的影响。方法体外培养原代星形胶质细胞,建立氧糖剥夺/复氧细胞水肿模型,并随机分为正常组、氧糖剥夺/复氧损伤(OGD/Reox)组、奥扎格雷钠(Ozagrel)阳性对照组和TSF治疗组,在氧糖剥夺/复氧损伤后6、12、24和48 h 4个时间点测定细胞体积变化,乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、MTT法检测细胞损伤及存活情况,Western blot法检测各组细胞膜AQP4蛋白的表达水平,RT-PCR法检测各组细胞AQP4 m RNA的转录水平。结果星形胶质细胞经缺氧再复氧处理,随着复氧时间的延长细胞损害加重(P<0.05,P<0.01);TSF治疗组的细胞体积明显低于OGD/Reox损伤组(P<0.05);给予TSF治疗后细胞在氧糖剥夺/复氧后的LDH漏出率较OGD/Reox损伤组明显降低(P<0.05);TSF治疗组与单纯氧糖剥夺/复氧相比较MTT检测细胞活力明显升高(P<0.05);给予TSF治疗组,AQP4表达明显降低(P<0.05);与Ozagrel相比较差异无显著性。Western blot及RT-PCR检测蛋白及m RNA的表达水平,给予TSF治疗组的AQP4蛋白及m RNA表达均明显降低(P<0.05)。结论TSF治疗能明显减轻体外氧糖剥夺/复氧损伤引起的星形胶质细胞水肿,可能是通过降低氧糖剥夺后AQP4的表达水平而实现。
2015年12期 v.31 1661-1667页 [查看摘要][在线阅读][下载 809K] [下载次数：260 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 牛子冉;徐晓娜;陈俞材;张惠芳;林溢煌;方莲花;杜冠华;
目的丹酚酸A是我国传统中药丹参中提取的主要水溶性成分之一,本研究探讨了丹酚酸A抗异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌缺血的作用及其机制。方法采用皮下注射异丙肾上腺素(isopropranol,ISO)8 mg·kg~(-1)致小鼠心肌缺血模型,从动物死亡率、心电图、心脏指数、血清心肌酶谱以及病理切片评价丹酚酸A对小鼠心肌的保护作用,并从抗氧化、炎症以及细胞凋亡通路探讨其作用机制。结果丹酚酸A能够剂量依赖性地增强心肌缺血小鼠的心脏功能,减少心肌损伤酶的漏出,改善缺血心肌的病理变化,具有明显的心肌保护作用。丹酚酸A能降低心肌炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)的水平,减少ISO损伤引起的心肌细胞凋亡,增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达,降低促凋亡蛋白Bax表达,并上调Akt的磷酸化水平。结论丹酚酸A具有明显的抗心肌缺血作用,其机制可能与稳定机体抗氧化系统,抑制炎症因子生成,以及调节凋亡蛋白表达及PI3K/Akt细胞凋亡信号通路有关。
2015年12期 v.31 1667-1674页 [查看摘要][在线阅读][下载 1453K] [下载次数：1367 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：55 ] |[阅读次数：1 ] - 牛子冉;徐晓娜;陈俞材;张惠芳;林溢煌;方莲花;杜冠华;
目的丹酚酸A是我国传统中药丹参中提取的主要水溶性成分之一,本研究探讨了丹酚酸A抗异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌缺血的作用及其机制。方法采用皮下注射异丙肾上腺素(isopropranol,ISO)8 mg·kg~(-1)致小鼠心肌缺血模型,从动物死亡率、心电图、心脏指数、血清心肌酶谱以及病理切片评价丹酚酸A对小鼠心肌的保护作用,并从抗氧化、炎症以及细胞凋亡通路探讨其作用机制。结果丹酚酸A能够剂量依赖性地增强心肌缺血小鼠的心脏功能,减少心肌损伤酶的漏出,改善缺血心肌的病理变化,具有明显的心肌保护作用。丹酚酸A能降低心肌炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)的水平,减少ISO损伤引起的心肌细胞凋亡,增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达,降低促凋亡蛋白Bax表达,并上调Akt的磷酸化水平。结论丹酚酸A具有明显的抗心肌缺血作用,其机制可能与稳定机体抗氧化系统,抑制炎症因子生成,以及调节凋亡蛋白表达及PI3K/Akt细胞凋亡信号通路有关。
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目的探讨GW0742对高糖损伤大鼠胸主动脉内皮的作用及可能机制。方法葡萄糖55 mmol·L~(-1)(high glucose,HG)孵育大鼠胸主动脉,以乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)诱导的内皮依赖性舒张作用为内皮功能完整性指标,HE染色观察血管形态结构变化,硝酸还原法测量血管内一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,利用q RT-PCR和Western blot方法检测血管中过氧化物酶增殖物激活受体β(peroxisome proliferator-activated receptorβ,PPARβ)、核转录因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)及内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)m RNA和蛋白表达。结果 HG条件下,ACh的内皮依赖性舒张作用明显减弱(P<0.01),内皮功能受损;血管内皮细胞和平滑肌细胞结构完整性也被破坏;同时,PPARβm RNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),而NF-κB p65的表达则升高(P<0.01),e NOS的表达下降(P<0.01),血管内NO含量亦减少(P<0.01);GW0742(0.01、0.1、1μmol·L~(~(-1)))能剂量依赖性地改善高糖损伤的ACh内皮依赖性舒张作用(P<0.01),减轻内皮细胞和平滑肌细胞的损伤,上调PPARβ表达,减少NF-κB p65的表达,增加e NOS表达和NO的浓度(P<0.01)。结论 GW0742对高糖损伤的大鼠胸主动脉内皮有保护作用,该作用可能与其激活PPARβ,下调NF-κB,改善e NOSNO系统有关。
2015年12期 v.31 1675-1681页 [查看摘要][在线阅读][下载 815K] [下载次数：158 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 薛莱;吴阳;黄波;李荣;蒋青松;
目的探讨GW0742对高糖损伤大鼠胸主动脉内皮的作用及可能机制。方法葡萄糖55 mmol·L~(-1)(high glucose,HG)孵育大鼠胸主动脉,以乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)诱导的内皮依赖性舒张作用为内皮功能完整性指标,HE染色观察血管形态结构变化,硝酸还原法测量血管内一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,利用q RT-PCR和Western blot方法检测血管中过氧化物酶增殖物激活受体β(peroxisome proliferator-activated receptorβ,PPARβ)、核转录因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)及内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)m RNA和蛋白表达。结果 HG条件下,ACh的内皮依赖性舒张作用明显减弱(P<0.01),内皮功能受损;血管内皮细胞和平滑肌细胞结构完整性也被破坏;同时,PPARβm RNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),而NF-κB p65的表达则升高(P<0.01),e NOS的表达下降(P<0.01),血管内NO含量亦减少(P<0.01);GW0742(0.01、0.1、1μmol·L~(~(-1)))能剂量依赖性地改善高糖损伤的ACh内皮依赖性舒张作用(P<0.01),减轻内皮细胞和平滑肌细胞的损伤,上调PPARβ表达,减少NF-κB p65的表达,增加e NOS表达和NO的浓度(P<0.01)。结论 GW0742对高糖损伤的大鼠胸主动脉内皮有保护作用,该作用可能与其激活PPARβ,下调NF-κB,改善e NOSNO系统有关。
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目的探讨丹参素对糖皮质激素诱导骨丢失大鼠胫骨近端骨密度和骨微结构的影响。方法 60只7月龄SPF级♀SD大鼠按体质量随机分为6组,每组10只:空白对照组(生理盐水:5 mL·kg~(-1)·d~(-1))、糖皮质激素模型组(醋酸泼尼松:6 mg·kg~(-1)·d~(-1))、糖皮质激素+丹参素低剂量组(12.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))、糖皮质激素+丹参素中剂量组(25mg·kg~(-1)·d~(-1))、糖皮质激素+丹参素高剂量组(50 mg·kg~(-1)·d~(-1)),糖皮质激素+(阳性对照药)骨化三醇组(0.045μg·kg~(-1)·d~(-1))。采用醋酸泼尼松连续灌胃14周建立大鼠骨丢失模型,同时采用丹参素和骨化三醇灌胃给药进行干预。实验结束后,取左侧胫骨近端进行Micro-CT扫描并分别对皮质骨和松质骨进行三维重建,观察骨微结构并检测骨密度等相关参数。结果糖皮质激素可引起大鼠胫骨近端骨密度下降,骨微结构异常。给予中剂量丹参素和骨化三醇均可提高骨密度并改善骨微结构,且二者效果相当;高剂量丹参素对骨微结构有一定程度的改善,但对骨密度无明显改变;低剂量丹参素对骨密度和骨微结构均无明显改善。结论丹参素(25 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃给药可预防糖皮质激素引起的大鼠胫骨近端骨密度下降和骨微结构异常。
2015年12期 v.31 1681-1687页 [查看摘要][在线阅读][下载 1256K] [下载次数：431 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：1 ] - 陈景锋;罗世英;崔燎;
目的探讨丹参素对糖皮质激素诱导骨丢失大鼠胫骨近端骨密度和骨微结构的影响。方法 60只7月龄SPF级♀SD大鼠按体质量随机分为6组,每组10只:空白对照组(生理盐水:5 mL·kg~(-1)·d~(-1))、糖皮质激素模型组(醋酸泼尼松:6 mg·kg~(-1)·d~(-1))、糖皮质激素+丹参素低剂量组(12.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))、糖皮质激素+丹参素中剂量组(25mg·kg~(-1)·d~(-1))、糖皮质激素+丹参素高剂量组(50 mg·kg~(-1)·d~(-1)),糖皮质激素+(阳性对照药)骨化三醇组(0.045μg·kg~(-1)·d~(-1))。采用醋酸泼尼松连续灌胃14周建立大鼠骨丢失模型,同时采用丹参素和骨化三醇灌胃给药进行干预。实验结束后,取左侧胫骨近端进行Micro-CT扫描并分别对皮质骨和松质骨进行三维重建,观察骨微结构并检测骨密度等相关参数。结果糖皮质激素可引起大鼠胫骨近端骨密度下降,骨微结构异常。给予中剂量丹参素和骨化三醇均可提高骨密度并改善骨微结构,且二者效果相当;高剂量丹参素对骨微结构有一定程度的改善,但对骨密度无明显改变;低剂量丹参素对骨密度和骨微结构均无明显改善。结论丹参素(25 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃给药可预防糖皮质激素引起的大鼠胫骨近端骨密度下降和骨微结构异常。
2015年12期 v.31 1681-1687页 [查看摘要][在线阅读][下载 1256K] [下载次数：431 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：1 ] - 王杏;王超;宋光耀;费雯婕;刘小娜;张哲;马欢;
目的探讨氧化苦参碱对高脂诱导胰岛素抵抗Apo E~(-/-)小鼠肝脂代谢相关基因的影响。方法 17只♂C57BL/6J小鼠作为对照组,给予正常饮食;68只♂Apo E~(-/-)小鼠,给予高脂饮食,饲养16周后,将小鼠分为模型组、氧化苦参碱低、中、高剂量组。给药8周,测定小鼠体重和一般生化指标。荧光定量PCR和Western blot方法检测肝组织LPL、FAT/CD36、CPT1、UCP2、SREBP-1c、FAS、ACC m RNA和蛋白表达水平。结果氧化苦参碱能不同程度的降低体重、FBG、TC、TG、FFA、FINS、HOMA-IR,升高GIR,改善胰岛素的抵抗。同时降低了LPL、FAT/CD36、UCP2、SREBP-1c、FAS、ACC m RNA和蛋白的表达水平,升高了CPT1表达水平。结论氧化苦参碱能够通过脂转运、氧化、合成3个环节较全面的调节肝脂质代谢,改善高脂诱导的Apo E~(-/-)小鼠的胰岛素抵抗。
2015年12期 v.31 1688-1692页 [查看摘要][在线阅读][下载 699K] [下载次数：411 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：21 ] |[阅读次数：1 ] - 王杏;王超;宋光耀;费雯婕;刘小娜;张哲;马欢;
目的探讨氧化苦参碱对高脂诱导胰岛素抵抗Apo E~(-/-)小鼠肝脂代谢相关基因的影响。方法 17只♂C57BL/6J小鼠作为对照组,给予正常饮食;68只♂Apo E~(-/-)小鼠,给予高脂饮食,饲养16周后,将小鼠分为模型组、氧化苦参碱低、中、高剂量组。给药8周,测定小鼠体重和一般生化指标。荧光定量PCR和Western blot方法检测肝组织LPL、FAT/CD36、CPT1、UCP2、SREBP-1c、FAS、ACC m RNA和蛋白表达水平。结果氧化苦参碱能不同程度的降低体重、FBG、TC、TG、FFA、FINS、HOMA-IR,升高GIR,改善胰岛素的抵抗。同时降低了LPL、FAT/CD36、UCP2、SREBP-1c、FAS、ACC m RNA和蛋白的表达水平,升高了CPT1表达水平。结论氧化苦参碱能够通过脂转运、氧化、合成3个环节较全面的调节肝脂质代谢,改善高脂诱导的Apo E~(-/-)小鼠的胰岛素抵抗。
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目的建立佐剂型关节炎大鼠滑膜成纤维细胞(AAFLS)原代培养方法及其特性分析,探讨AA-FLS作为RA体外研究细胞模型的可行性。方法采用热杀死结核分枝杆菌H37Ra(Mtb)免疫SD大鼠,建立佐剂型关节炎大鼠模型,取大鼠双侧膝关节滑膜组织进行原代细胞培养,显微镜下观察细胞形态;免疫细胞化学方法鉴定细胞;CCK-8法检测细胞增殖活性;ELISA方法测定细胞上清中TNF-α和IL-1β水平;Hochest 33258法检测细胞凋亡状态;Western bolt方法检测AA FLS细胞线粒体凋亡通路重要调控蛋白Bcl-2和Bax及Pro-caspase-3和Cleave-caspase-3水平的表达。结果胶原酶法分离获得的滑膜成纤维细胞经传代纯化,呈梭形的细胞占0.95以上,免疫细胞化学鉴定显示滑膜成纤维细胞vimentin表达呈阳性,CD68表达为阴性;AA模型大鼠滑膜成纤维细胞增殖活性较正常大鼠滑膜成纤维细胞增殖活性明显提高,细胞凋亡率降低;在培养的细胞上清中TNF-α和IL-1β水平明显升高;线粒体凋亡通路调控蛋白Bcl-2水平明显升高,而Bax蛋白表达水平明显降低,同时AA-FLS细胞中pro-caspase-3表达量增加。结论 AA-FLS具有增殖活跃、凋亡抑制和分泌高水平促炎性细胞因子的生物特性,可作为体外筛选抗RA药物的细胞模型。
2015年12期 v.31 1693-1698页 [查看摘要][在线阅读][下载 793K] [下载次数：652 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：2 ] - 高皖皎;邓秋狄;白殊同;佟丽;
目的建立佐剂型关节炎大鼠滑膜成纤维细胞(AAFLS)原代培养方法及其特性分析,探讨AA-FLS作为RA体外研究细胞模型的可行性。方法采用热杀死结核分枝杆菌H37Ra(Mtb)免疫SD大鼠,建立佐剂型关节炎大鼠模型,取大鼠双侧膝关节滑膜组织进行原代细胞培养,显微镜下观察细胞形态;免疫细胞化学方法鉴定细胞;CCK-8法检测细胞增殖活性;ELISA方法测定细胞上清中TNF-α和IL-1β水平;Hochest 33258法检测细胞凋亡状态;Western bolt方法检测AA FLS细胞线粒体凋亡通路重要调控蛋白Bcl-2和Bax及Pro-caspase-3和Cleave-caspase-3水平的表达。结果胶原酶法分离获得的滑膜成纤维细胞经传代纯化,呈梭形的细胞占0.95以上,免疫细胞化学鉴定显示滑膜成纤维细胞vimentin表达呈阳性,CD68表达为阴性;AA模型大鼠滑膜成纤维细胞增殖活性较正常大鼠滑膜成纤维细胞增殖活性明显提高,细胞凋亡率降低;在培养的细胞上清中TNF-α和IL-1β水平明显升高;线粒体凋亡通路调控蛋白Bcl-2水平明显升高,而Bax蛋白表达水平明显降低,同时AA-FLS细胞中pro-caspase-3表达量增加。结论 AA-FLS具有增殖活跃、凋亡抑制和分泌高水平促炎性细胞因子的生物特性,可作为体外筛选抗RA药物的细胞模型。
2015年12期 v.31 1693-1698页 [查看摘要][在线阅读][下载 793K] [下载次数：652 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 高贵珍;汪俊博;姜芳;李光坤;刘小阳;薛宏宇;
目的本实验通过检测硫酸化茯苓多糖(SP)对MPTP诱导的帕金森小鼠中抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT)活性、抗超氧阴离子活力、MDA及过氧化氢含量,探讨SP对帕金森小鼠中脑和脑皮层神经元细胞的保护作用。方法将ICR小鼠随机分为对照组、MPTP组和SP治疗组(SP 50、100、150mg·kg~(~(-1))),腹腔注射给药,取中脑和脑皮层匀浆,利用酶标仪检测小鼠中脑和脑皮层中SOD、GSH-Px、CAT活性、抗超氧阴离子活力、MDA及过氧化氢含量。结果 SP治疗组小鼠中脑和脑皮层3种抗氧化酶活性有不同程度的增强、抗超氧阴离子活力升高、MDA及过氧化氢含量不同程度下降。结论 SP对MPTP诱导的帕金森小鼠中脑和脑皮层神经元细胞有一定的保护作用。
2015年12期 v.31 1699-1704页 [查看摘要][在线阅读][下载 870K] [下载次数：579 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：26 ] |[阅读次数：1 ] - 高贵珍;汪俊博;姜芳;李光坤;刘小阳;薛宏宇;
目的本实验通过检测硫酸化茯苓多糖(SP)对MPTP诱导的帕金森小鼠中抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT)活性、抗超氧阴离子活力、MDA及过氧化氢含量,探讨SP对帕金森小鼠中脑和脑皮层神经元细胞的保护作用。方法将ICR小鼠随机分为对照组、MPTP组和SP治疗组(SP 50、100、150mg·kg~(~(-1))),腹腔注射给药,取中脑和脑皮层匀浆,利用酶标仪检测小鼠中脑和脑皮层中SOD、GSH-Px、CAT活性、抗超氧阴离子活力、MDA及过氧化氢含量。结果 SP治疗组小鼠中脑和脑皮层3种抗氧化酶活性有不同程度的增强、抗超氧阴离子活力升高、MDA及过氧化氢含量不同程度下降。结论 SP对MPTP诱导的帕金森小鼠中脑和脑皮层神经元细胞有一定的保护作用。
2015年12期 v.31 1699-1704页 [查看摘要][在线阅读][下载 870K] [下载次数：579 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：26 ] |[阅读次数：1 ] - 周密;邱峰;张渊;王家玉;秧茂盛;
目的研究美洛昔康(meloxicam,Mel)对人结直肠癌LoVo细胞增殖和迁移能力的抑制作用及其对抑癌基因PTEN表达水平的影响。方法以人结肠癌细胞株LoVo为试验对象,通过集落形成试验分析Mel对LoVo细胞增殖的影响,Western blot检测Mel对PCNA蛋白和PTEN蛋白表达水平的影响;细胞迁移试验分析Mel对LoVo细胞活性的影响;RT-PCR检测Mel对LoVo细胞中PTEN m RNA表达水平的影响;使用重组腺病毒作为干预手段,Annexin-V试验验证Mel是否通过PTEN发挥抑癌作用。结果与对照组相比,Mel能明显抑制LoVo细胞的集落形成能力,能抑制LoVo细胞的细胞核增殖抗原PCNA的蛋白表达水平,80μmol·L~(-1)Mel干预48 h,可将LoVo细胞中PCNA的蛋白表达水平抑制到61.57%±2.81%(T=7.086,P=0.019);Mel能上调LoVo细胞内抑癌基因PTEN的m RNA表达水平,80μmol·L~(-1)Mel干预48 h后PTEN的m RNA表达水平上调至160.43%±4.71%(T=24.244,P=0.002);Mel能上调LoVo细胞内PTEN的蛋白表达水平,80μmol·L~(-1)Mel干预48 h后PTEN的蛋白表达水平上调至152.63%±3.33%(T=27.359,P=0.001);Annexin-V试验结果说明Mel的对LoVo细胞的抑制作用可能与上调PTEN基因表达有关。结论Mel能抑制LoV o细胞的增殖和迁移,其机制可能与上调PTEN的表达水平有关。
2015年12期 v.31 1704-1709页 [查看摘要][在线阅读][下载 1394K] [下载次数：155 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：1 ] - 周密;邱峰;张渊;王家玉;秧茂盛;
目的研究美洛昔康(meloxicam,Mel)对人结直肠癌LoVo细胞增殖和迁移能力的抑制作用及其对抑癌基因PTEN表达水平的影响。方法以人结肠癌细胞株LoVo为试验对象,通过集落形成试验分析Mel对LoVo细胞增殖的影响,Western blot检测Mel对PCNA蛋白和PTEN蛋白表达水平的影响;细胞迁移试验分析Mel对LoVo细胞活性的影响;RT-PCR检测Mel对LoVo细胞中PTEN m RNA表达水平的影响;使用重组腺病毒作为干预手段,Annexin-V试验验证Mel是否通过PTEN发挥抑癌作用。结果与对照组相比,Mel能明显抑制LoVo细胞的集落形成能力,能抑制LoVo细胞的细胞核增殖抗原PCNA的蛋白表达水平,80μmol·L~(-1)Mel干预48 h,可将LoVo细胞中PCNA的蛋白表达水平抑制到61.57%±2.81%(T=7.086,P=0.019);Mel能上调LoVo细胞内抑癌基因PTEN的m RNA表达水平,80μmol·L~(-1)Mel干预48 h后PTEN的m RNA表达水平上调至160.43%±4.71%(T=24.244,P=0.002);Mel能上调LoVo细胞内PTEN的蛋白表达水平,80μmol·L~(-1)Mel干预48 h后PTEN的蛋白表达水平上调至152.63%±3.33%(T=27.359,P=0.001);Annexin-V试验结果说明Mel的对LoVo细胞的抑制作用可能与上调PTEN基因表达有关。结论Mel能抑制LoV o细胞的增殖和迁移,其机制可能与上调PTEN的表达水平有关。
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目的观察金银花水提物(Lonicerae Japonicae Flos aqueous extract,FL)对糖尿病视网膜病(diabetic retinopathy,DR)的改善作用及其机制。方法采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射制备C57小鼠糖尿病模型,给药2个月后形成了DR早期病程阶段即非增殖性糖尿病视网膜(non-proliferative DR,NPDR)。使用伊文氏蓝实验检测血-视网膜屏障(blood-retinal barrier,BRB)的渗漏情况;运用Western blot实验检测相关蛋白的表达;酶联免疫实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中炎性因子的表达。结果伊文氏蓝实验发现FL可以剂量依赖性的抑制STZ诱导糖尿病小鼠中发生的BRB渗漏。Western blot结果显示FL可以抑制STZ诱导糖尿病小鼠视网膜组织中核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65亚单位的转核激活,FL还可以抑制视网膜组织中kappa B抑制剂(inhibitor ofκB,IκB)、抑制性κB激酶(inhibitor of nuclear factorκB kinase,IKK)、p65的磷酸化激活。进一步研究发现FL可以抑制STZ诱导糖尿病小鼠视网膜组织中升高的小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)的表达,提示FL可以抑制神经小胶质细胞的活化。ELISA实验结果发现FL能降低STZ诱导糖尿病小鼠血清中升高的炎性细胞因子如白介素(interleukin,IL)-6,-1β。结论 FL可能通过抑制神经小胶质细胞的活化,抑制NF-κB介导的炎性信号通路,缓解视网膜的炎性损伤和BRB的渗漏,从而发挥改善DR的药效活性。
2015年12期 v.31 1710-1714页 [查看摘要][在线阅读][下载 798K] [下载次数：642 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 周玲玉;余增洋;帕丽达·阿不力孜;季莉莉;
目的观察金银花水提物(Lonicerae Japonicae Flos aqueous extract,FL)对糖尿病视网膜病(diabetic retinopathy,DR)的改善作用及其机制。方法采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射制备C57小鼠糖尿病模型,给药2个月后形成了DR早期病程阶段即非增殖性糖尿病视网膜(non-proliferative DR,NPDR)。使用伊文氏蓝实验检测血-视网膜屏障(blood-retinal barrier,BRB)的渗漏情况;运用Western blot实验检测相关蛋白的表达;酶联免疫实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中炎性因子的表达。结果伊文氏蓝实验发现FL可以剂量依赖性的抑制STZ诱导糖尿病小鼠中发生的BRB渗漏。Western blot结果显示FL可以抑制STZ诱导糖尿病小鼠视网膜组织中核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65亚单位的转核激活,FL还可以抑制视网膜组织中kappa B抑制剂(inhibitor ofκB,IκB)、抑制性κB激酶(inhibitor of nuclear factorκB kinase,IKK)、p65的磷酸化激活。进一步研究发现FL可以抑制STZ诱导糖尿病小鼠视网膜组织中升高的小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)的表达,提示FL可以抑制神经小胶质细胞的活化。ELISA实验结果发现FL能降低STZ诱导糖尿病小鼠血清中升高的炎性细胞因子如白介素(interleukin,IL)-6,-1β。结论 FL可能通过抑制神经小胶质细胞的活化,抑制NF-κB介导的炎性信号通路,缓解视网膜的炎性损伤和BRB的渗漏,从而发挥改善DR的药效活性。
2015年12期 v.31 1710-1714页 [查看摘要][在线阅读][下载 798K] [下载次数：642 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 陈再兴;王星;祝妍;王琳;王岩;聂宏光;孟繁浩;
目的对葎草中主要黄酮类成分进行提取分离,并对其结构进行鉴定;探讨葎草中黄酮类单体成分对小鼠肺水清除率(AFC)的影响。方法葎草乙醇提取后,除色素,柱分离得单体成分,利用光谱法对其结构进行鉴定;通过气管给药后,酶标仪测定肺内吸出液的小牛血清白蛋白浓度的方法,计算木犀草苷(LGL)和大波斯菊苷(AGL)影响下的小鼠在体AFC。结果葎草中的主要成分为木犀草苷和大波斯菊苷;二者均能促进AFC。结论葎草中的主要成分均可降低肺内的积水。
2015年12期 v.31 1715-1718页 [查看摘要][在线阅读][下载 802K] [下载次数：276 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 陈再兴;王星;祝妍;王琳;王岩;聂宏光;孟繁浩;
目的对葎草中主要黄酮类成分进行提取分离,并对其结构进行鉴定;探讨葎草中黄酮类单体成分对小鼠肺水清除率(AFC)的影响。方法葎草乙醇提取后,除色素,柱分离得单体成分,利用光谱法对其结构进行鉴定;通过气管给药后,酶标仪测定肺内吸出液的小牛血清白蛋白浓度的方法,计算木犀草苷(LGL)和大波斯菊苷(AGL)影响下的小鼠在体AFC。结果葎草中的主要成分为木犀草苷和大波斯菊苷;二者均能促进AFC。结论葎草中的主要成分均可降低肺内的积水。
2015年12期 v.31 1715-1718页 [查看摘要][在线阅读][下载 802K] [下载次数：276 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 杜娟;张逢源;许红霞;王娅娜;朱佳佳;顿铃露;余建强;
目的研究氧化苦参碱(OMT)对神经病理性疼痛小鼠的镇痛作用及其机制。方法采用坐骨神经结扎模型(CCI)机械缩足反射法观察OMT的镇痛作用,并分析其镇痛作用与Ca MKII受体的关系。结果 1给小鼠腹腔注射160、80 mg·kg~(-1)OMT可明显延长小鼠的机械缩足反射期(P<0.05)。2给小鼠腹腔注射160、80、40 mg·kg~(-1)OMT可明显降低小鼠的冷缩足反射次数(P<0.05)。3 OMT能够跟CaMKⅡ拮抗剂KN-93和AIP发挥协同作用。4模型组小鼠的pCaMKⅡ蛋白表达较假手术组明显升高(P<0.01);与模型组比较,OMT(160 mg·kg~(~(-1)))组可明显降低p CaMKⅡ蛋白的表达(P<0.01)。结论 OMT对神经病理性疼痛具有镇痛作用,其镇痛作用可能与CaMKⅡ有关。
2015年12期 v.31 1719-1724页 [查看摘要][在线阅读][下载 638K] [下载次数：276 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 杜娟;张逢源;许红霞;王娅娜;朱佳佳;顿铃露;余建强;
目的研究氧化苦参碱(OMT)对神经病理性疼痛小鼠的镇痛作用及其机制。方法采用坐骨神经结扎模型(CCI)机械缩足反射法观察OMT的镇痛作用,并分析其镇痛作用与Ca MKII受体的关系。结果 1给小鼠腹腔注射160、80 mg·kg~(-1)OMT可明显延长小鼠的机械缩足反射期(P<0.05)。2给小鼠腹腔注射160、80、40 mg·kg~(-1)OMT可明显降低小鼠的冷缩足反射次数(P<0.05)。3 OMT能够跟CaMKⅡ拮抗剂KN-93和AIP发挥协同作用。4模型组小鼠的pCaMKⅡ蛋白表达较假手术组明显升高(P<0.01);与模型组比较,OMT(160 mg·kg~(~(-1)))组可明显降低p CaMKⅡ蛋白的表达(P<0.01)。结论 OMT对神经病理性疼痛具有镇痛作用,其镇痛作用可能与CaMKⅡ有关。
2015年12期 v.31 1719-1724页 [查看摘要][在线阅读][下载 638K] [下载次数：276 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 刘丹丹;曹纲;张琦;叶夷露;韩立凯;葛卫红;
目的探讨三叶青总黄酮(RTFs)对老年小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及可能机制。方法采用老年C57BL/6J小鼠支气管滴注脂多糖(LPS)诱导ALI模型,三叶青黄酮灌胃给药3 d。取支气管肺泡灌洗液(BALF),瑞氏-吉姆萨染色计算白细胞数,ELISA检测炎症因子水平;ELISA和Western blot分析肺组织MAPKs、NF-κB蛋白表达,Trans AM检测核蛋白NF-κB活性。结果支气管滴注LPS成功诱导ALI模型,三叶青黄酮可明显减少BALF中白细胞和中性粒细胞数(P<0.01),降低IL-1β、IL-6、IL-12p40、TNF-α和s TNF-R1的分泌水平(P<0.01),改善肺组织病理损伤。三叶青黄酮明显抑制肺组织p38MAPK、NF-κB的磷酸化及NF-κB的DNA结合活性(P<0.01)。结论三叶青黄酮抑制p38MAPK、NF-κB炎症通路,保护LPS诱导的老年小鼠ALI。
2015年12期 v.31 1725-1730页 [查看摘要][在线阅读][下载 1206K] [下载次数：978 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：49 ] |[阅读次数：1 ] - 刘丹丹;曹纲;张琦;叶夷露;韩立凯;葛卫红;
目的探讨三叶青总黄酮(RTFs)对老年小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及可能机制。方法采用老年C57BL/6J小鼠支气管滴注脂多糖(LPS)诱导ALI模型,三叶青黄酮灌胃给药3 d。取支气管肺泡灌洗液(BALF),瑞氏-吉姆萨染色计算白细胞数,ELISA检测炎症因子水平;ELISA和Western blot分析肺组织MAPKs、NF-κB蛋白表达,Trans AM检测核蛋白NF-κB活性。结果支气管滴注LPS成功诱导ALI模型,三叶青黄酮可明显减少BALF中白细胞和中性粒细胞数(P<0.01),降低IL-1β、IL-6、IL-12p40、TNF-α和s TNF-R1的分泌水平(P<0.01),改善肺组织病理损伤。三叶青黄酮明显抑制肺组织p38MAPK、NF-κB的磷酸化及NF-κB的DNA结合活性(P<0.01)。结论三叶青黄酮抑制p38MAPK、NF-κB炎症通路,保护LPS诱导的老年小鼠ALI。
2015年12期 v.31 1725-1730页 [查看摘要][在线阅读][下载 1206K] [下载次数：978 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：49 ] |[阅读次数：1 ] - 禤霏霏;黄建春;唐静芝;黄婉苏;黄仁彬;
目的探讨玉郎伞查尔酮(YLSC)调控PI3K/Akt信号通路抗心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制。方法 40只♂SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、YLSC组、YLSC+PI3K抑制剂wortmannin组(YLSC+WM组)、PI3K抑制剂wortmannin组(WM组),每组8只。除假手术组外,其它各组大鼠均结扎冠状动脉左前降支制备心肌缺血模型,缺血30 min,再灌注120 min。实验结束后,采用比色法测定大鼠血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)及一氧化氮(NO)水平,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,Western blot法检测心肌组织中总Akt(t-Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达,FQ-PCR法分析内皮型一氧化氮合酶(eN OS)、凋亡因子caspase-3及自噬相关基因Beclin1的表达量变化。结果与I/R组比较,YLSC组CK-MB、LDH以及TNF-α血清含量明显降低,NO水平升高,Beclin1、caspase-3及LC3-Ⅱ的表达量均明显下降,同时Akt的磷酸化水平与eN OS mR NA表达增加,上述各项指标差异具有统计学意义(P<0.05),而上述变化能够被PI3K/Akt信号通路的特异性阻断剂wortmannin所阻断,且其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 YLSC通过激活PI3K/Akt信号通路抑制缺血/再灌注所致的心肌细胞凋亡和过度自噬,从而发挥对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。
2015年12期 v.31 1730-1735页 [查看摘要][在线阅读][下载 209K] [下载次数：712 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：31 ] |[阅读次数：2 ] - 禤霏霏;黄建春;唐静芝;黄婉苏;黄仁彬;
目的探讨玉郎伞查尔酮(YLSC)调控PI3K/Akt信号通路抗心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制。方法 40只♂SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、YLSC组、YLSC+PI3K抑制剂wortmannin组(YLSC+WM组)、PI3K抑制剂wortmannin组(WM组),每组8只。除假手术组外,其它各组大鼠均结扎冠状动脉左前降支制备心肌缺血模型,缺血30 min,再灌注120 min。实验结束后,采用比色法测定大鼠血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)及一氧化氮(NO)水平,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,Western blot法检测心肌组织中总Akt(t-Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达,FQ-PCR法分析内皮型一氧化氮合酶(eN OS)、凋亡因子caspase-3及自噬相关基因Beclin1的表达量变化。结果与I/R组比较,YLSC组CK-MB、LDH以及TNF-α血清含量明显降低,NO水平升高,Beclin1、caspase-3及LC3-Ⅱ的表达量均明显下降,同时Akt的磷酸化水平与eN OS mR NA表达增加,上述各项指标差异具有统计学意义(P<0.05),而上述变化能够被PI3K/Akt信号通路的特异性阻断剂wortmannin所阻断,且其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 YLSC通过激活PI3K/Akt信号通路抑制缺血/再灌注所致的心肌细胞凋亡和过度自噬,从而发挥对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。
2015年12期 v.31 1730-1735页 [查看摘要][在线阅读][下载 209K] [下载次数：712 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：31 ] |[阅读次数：2 ] - 王秀;李见春;张竞竞;赵素容;刘浩;
目的探讨西妥昔联合阿霉素对三阴乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖和凋亡的影响。方法 MTT法检测药物对细胞活性的影响;碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色法测定药物对细胞凋亡率的影响;JC-1染色法测定线粒体膜电位的变化;Western blot测定细胞内葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP-78)、Bcl-2及Caspase-3的表达水平。结果 MTT结果显示,西妥昔对MDA-MB-231细胞的抑制作用随浓度增加而增强,但作用时间对细胞的抑制作用影响较小。阿霉素对MDA-MB-231细胞的抑制作用具有浓度与时间依赖性。西妥昔与阿霉素合用能明显增强对MDA-MB-231细胞株的抑制作用,合用组12、24、48 h的细胞存活率与西妥昔组、阿霉素组相比,差异均具有显著性(P<0.05或P<0.01)。PI结果显示:单用西妥昔、阿霉素均可诱导MDA-MB-231的凋亡。联合用药可明显提高细胞的凋亡率,合用24 h的凋亡率达到了(43.86±3.62)%,与西妥昔组(11.0±2.32)%、阿霉素组(17.1±1.37)%相比,差异具有显著性(P<0.01)。JC-1染色结果显示西妥昔、阿霉素单用及联合应用均可降低线粒体膜电位,合用组降低更明显。Western blot显示西妥昔可下调Bcl-2、GRP-78的表达,激活Caspase-3。阿霉素对Bcl-2及Caspase-3表达无影响,可增加GRP-78的表达。合用组的GRP-78、Bcl-2表达明显降低,Caspase-3的激活明显增加。结论西妥昔与阿霉素合用可增强对三阴乳腺癌细胞株MDA-MB-231的抑制作用,增加细胞凋亡,其机制可能是西妥昔通过下调内质网应激水平,去除内质网应激对细胞的保护作用,进而减少Bcl-2表达,降低线粒体膜电位,激活线粒体凋亡通路,促进细胞的凋亡。
2015年12期 v.31 1735-1740页 [查看摘要][在线阅读][下载 1295K] [下载次数：280 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 王秀;李见春;张竞竞;赵素容;刘浩;
目的探讨西妥昔联合阿霉素对三阴乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖和凋亡的影响。方法 MTT法检测药物对细胞活性的影响;碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色法测定药物对细胞凋亡率的影响;JC-1染色法测定线粒体膜电位的变化;Western blot测定细胞内葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP-78)、Bcl-2及Caspase-3的表达水平。结果 MTT结果显示,西妥昔对MDA-MB-231细胞的抑制作用随浓度增加而增强,但作用时间对细胞的抑制作用影响较小。阿霉素对MDA-MB-231细胞的抑制作用具有浓度与时间依赖性。西妥昔与阿霉素合用能明显增强对MDA-MB-231细胞株的抑制作用,合用组12、24、48 h的细胞存活率与西妥昔组、阿霉素组相比,差异均具有显著性(P<0.05或P<0.01)。PI结果显示:单用西妥昔、阿霉素均可诱导MDA-MB-231的凋亡。联合用药可明显提高细胞的凋亡率,合用24 h的凋亡率达到了(43.86±3.62)%,与西妥昔组(11.0±2.32)%、阿霉素组(17.1±1.37)%相比,差异具有显著性(P<0.01)。JC-1染色结果显示西妥昔、阿霉素单用及联合应用均可降低线粒体膜电位,合用组降低更明显。Western blot显示西妥昔可下调Bcl-2、GRP-78的表达,激活Caspase-3。阿霉素对Bcl-2及Caspase-3表达无影响,可增加GRP-78的表达。合用组的GRP-78、Bcl-2表达明显降低,Caspase-3的激活明显增加。结论西妥昔与阿霉素合用可增强对三阴乳腺癌细胞株MDA-MB-231的抑制作用,增加细胞凋亡,其机制可能是西妥昔通过下调内质网应激水平,去除内质网应激对细胞的保护作用,进而减少Bcl-2表达,降低线粒体膜电位,激活线粒体凋亡通路,促进细胞的凋亡。
2015年12期 v.31 1735-1740页 [查看摘要][在线阅读][下载 1295K] [下载次数：280 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 史毅;吴伟忠;霍安;周伟;朱志图;
目的探究补骨脂乙素(Isobavachalcone,IBC)对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞迁移和侵袭的抑制作用及其可能的作用机制。方法将不同浓度的IBC作用于体外培养的Tca8113细胞,通过MTT法检测细胞增殖抑制率;划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测Akt、p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白的表达情况。结果 IBC以浓度和时间依赖的方式有效抑制Tca8113细胞增殖。IBC降低Tca8113细胞迁移及侵袭能力。Western blot法显示IBC能够以浓度相关性下调p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白的表达,而Akt蛋白水平不受IBC处理剂量的影响。结论 IBC可抑制Tca8113细胞的增殖,迁移和侵袭,其作用与下调MMP-2和MMP-9蛋白及抑制其上游Akt的磷酸化有关。
2015年12期 v.31 1741-1745页 [查看摘要][在线阅读][下载 1102K] [下载次数：249 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：20 ] |[阅读次数：1 ] - 史毅;吴伟忠;霍安;周伟;朱志图;
目的探究补骨脂乙素(Isobavachalcone,IBC)对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞迁移和侵袭的抑制作用及其可能的作用机制。方法将不同浓度的IBC作用于体外培养的Tca8113细胞,通过MTT法检测细胞增殖抑制率;划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测Akt、p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白的表达情况。结果 IBC以浓度和时间依赖的方式有效抑制Tca8113细胞增殖。IBC降低Tca8113细胞迁移及侵袭能力。Western blot法显示IBC能够以浓度相关性下调p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白的表达,而Akt蛋白水平不受IBC处理剂量的影响。结论 IBC可抑制Tca8113细胞的增殖,迁移和侵袭,其作用与下调MMP-2和MMP-9蛋白及抑制其上游Akt的磷酸化有关。
2015年12期 v.31 1741-1745页 [查看摘要][在线阅读][下载 1102K] [下载次数：249 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：20 ] |[阅读次数：1 ] - 赵铁华;史子惠;张另沾;
目的探讨聚乙二醇修饰改善EILDVP肽体内过程的效果。方法 KM小鼠以NaI饱和甲状腺后,按5 mL·kg~(-1)容积,分别尾静脉注射3.441GBq·L~(-1)浓度的~(125)Ⅰ标记的EILDVP-Tyr-NH_2、EILDVP-Cys(mP EG2000-MAL)-Tyr-NH_2和EILDVP-Cys(mPEG_(20000)-MAL)-Tyr-NH_2肽。给药后不同时间取血,分离血浆,经三氯乙酸处理后测定沉淀部分放射性;测定数据分别代入已制备的相应标准曲线方程,取得血药浓度-时间数据,经3P97药动学统计软件计算主要药代动力学参数。结果在3.75~480μg·L~(~(-1))浓度范围内,3种~(125)Ⅰ标记肽线性关系良好,回收率在88.92%~106.66%之间,日内变异系数(RSD)<10%;~(125)Ⅰ标记的mPEG2000和mPEG_(20000)修饰EILDVP-Tyr-NH_2肽的血浆半衰期(T1/2)分别为0.43 h和1.94 h、较原型肽(0.28 h)延长1.54倍和6.93倍,清除率(Cl)分别降低1.23倍和24.71倍;3种受试化合物表观分布容积(V)值均较小,主要分布在血浆中。结论适宜分子质量mPEG修饰有利于延长EILDVP肽的体内维持时间,对提高药效具有积极意义;在实验范围内,分子质量较大的mPEG_(20000)对EILDVP肽修饰效果较好。
2015年12期 v.31 1745-1748页 [查看摘要][在线阅读][下载 189K] [下载次数：104 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 赵铁华;史子惠;张另沾;
目的探讨聚乙二醇修饰改善EILDVP肽体内过程的效果。方法 KM小鼠以NaI饱和甲状腺后,按5 mL·kg~(-1)容积,分别尾静脉注射3.441GBq·L~(-1)浓度的~(125)Ⅰ标记的EILDVP-Tyr-NH_2、EILDVP-Cys(mP EG2000-MAL)-Tyr-NH_2和EILDVP-Cys(mPEG_(20000)-MAL)-Tyr-NH_2肽。给药后不同时间取血,分离血浆,经三氯乙酸处理后测定沉淀部分放射性;测定数据分别代入已制备的相应标准曲线方程,取得血药浓度-时间数据,经3P97药动学统计软件计算主要药代动力学参数。结果在3.75~480μg·L~(~(-1))浓度范围内,3种~(125)Ⅰ标记肽线性关系良好,回收率在88.92%~106.66%之间,日内变异系数(RSD)<10%;~(125)Ⅰ标记的mPEG2000和mPEG_(20000)修饰EILDVP-Tyr-NH_2肽的血浆半衰期(T1/2)分别为0.43 h和1.94 h、较原型肽(0.28 h)延长1.54倍和6.93倍,清除率(Cl)分别降低1.23倍和24.71倍;3种受试化合物表观分布容积(V)值均较小,主要分布在血浆中。结论适宜分子质量mPEG修饰有利于延长EILDVP肽的体内维持时间,对提高药效具有积极意义;在实验范围内,分子质量较大的mPEG_(20000)对EILDVP肽修饰效果较好。
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